Постановление № 811 от 20.08.2018

ПРАВИТЕЛЬСТВО РЕСПУБЛИКИ МОЛДОВА

ПОСТАНОВЛЕНИЕ

об утверждении Методологии анализа и тестирования

термообработанного молока, предназначенного для

непосредственного потребления человеком

№ 811  от  20.08.2018

 (в силу 05.04.2019) 

Мониторул Офичиал ал Р. Молдова № 377-383 ст. 999 от 05.10.2018

* * *

На основании статьи 11 Закона № 50/2013 года об официальном контроле с целью проверки соответствия кормовому и пищевому законодательству и правилам, касающимся здоровья и благополучия животных (Официальный монитор Республики Молдова, 2013 г., № 122-124, ст.383), Правительство

ПОСТАНОВЛЯЕТ:

1. Утвердить Методологию анализа и тестирования термообработанного молока, предназначенного для непосредственного потребления человеком.

2. Контроль за исполнением настоящего постановления возложить на Национальное агентство по безопасности пищевых продуктов.

3. Настоящее постановление вступает в силу через шесть месяцев с даты его опубликования.

Утверждена

Постановлением Правительства

№ 811/2018

МЕТОДОЛОГИЯ

анализа и тестирования термообработанного молока, предназначенного

для непосредственного потребления человеком

Настоящая Методология перелагает Решение Совета ЕЕС 92/608 от 14 ноября 1992 года, в котором излагаются определенные методы анализа и тестирования термообработанного молока, предназначенного для непосредственного потребления человеком, опубликованное в Официальном журнале Европейского сообщества, L 407 от 31 декабря 1992 года.

I. ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Настоящая Методология устанавливает эталонные методы анализа и тестирования для определения сухого вещества, содержания жира, содержания сухих обезжиренных веществ, общего содержания азота, содержания белка и объемной массы термообработанного молока, предназначенного для непосредственного потребления человеком, как местного, так и импортного производства.

2. Эта Методология применяется к продуктам тарифных позиций 0401 (0401 10; 0401 10 100; 0401 10 900; 0401 20; 0401 20 110; 0401 20 190; 0401 20 910; 0401 20 990) и 0402 (0402 91; 0402 91 100) в соответствии с Комбинированной товарной номенклатурой, утвержденной Законом № 172/2014.

II. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

3. Эталонные методы анализа и тестирования термообработанного молока для непосредственного потребления человеком относятся к реагентам, материалам, выражению результатов, критериям достоверности и отчету об анализе.

4. Применение эталонных методов анализа и испытаний, установление критериев достоверности, а также отбора проб должно проводиться в соответствии с правилами, установленными в приложении № 1 к настоящей Методологии.

5. Эталонный метод для определения содержания сухого вещества в молоке описан в приложении № 2 к настоящей Методологии.

6. Эталонный метод для определения содержания жира в цельном молоке, частично обезжиренном и обезжиренном молоке, приведен в приложении № 3 к настоящей Методологии.

7. Режим работы с колонками для вытяжки жировых веществ, оборудованных сифоном или стиральным устройством, приведен в инструкции, изложенной в приложении № 3 к настоящей Методологии.

8. Эталонный метод для определения содержания сухих обезжиренных веществ в термообработанном молоке описан в приложении № 4 к настоящей Методологии.

9. Эталонный метод для определения общего содержания азота в цельном молоке, частично обезжиренном и обезжиренном молоке, описан в приложении № 5 к настоящей Методологии.

10. Эталонный метод для определения содержания белка в термообработанном молоке предусмотрен в приложении № 6 к настоящей Методологии.

11. Эталонный метод для определения объемной плотности сырого молока, цельного молока, частично обезжиренного молока и обезжиренного молока при 20°С описан в приложении № 7 к настоящей Методологии.

12. Эталонные методы могут применяться только лабораториями, аккредитованными в соответствии с Законом № 235/2011 о деятельности по аккредитации и оценке соответствия.

13. В случае обжалования решающим является результат, полученный эталонным методом.

Приложение № 1

к Методологии анализа и

тестирования термообработанного молока,

предназначенного для непосредственного

потребления человеком

ПРАВИЛА

для применения эталонных методов анализа и тестирования,

установления критериев достоверности,

а также сбора образцов

I. Материалы и методы

1. Настоящий раздел относится к реагентам, материалам, выражению результатов, критериям достоверности и анализу.

2. Реагенты

1) Вода

a) Если нет других указаний, вода, используемая для операций растворения, разбавления или промывки, обязательно должна быть дистиллированной водой, деионизированной водой или минерализованной водой, по меньшей мере, эквивалентной чистоты.

b) Под «раствором» или «разбавлением» (без других уточнений) понимается «раствор в воде» или «разбавление водой».

2) Химические продукты

Если нет других указаний, все используемые химические продукты должны иметь признанное аналитическое качество.

3. Материалы

1) Список материалов

Список материалов, упомянутых в различных эталонных методах, относится только к объектам со специфическим использованием и имеет особые характеристики.

2) Аналитические весы

Под «аналитическими весами» понимают весы, которые могут взвешивать с точностью до 0,1 мг.

4. Выражение результатов

1) Результаты

Если нет других указаний, результатом, фигурирующим в отчете об анализе (пункт 6), должно быть среднее арифметическое двух тестов с учетом критерия повторяемости (подпункт 1) пункта 5), установленного для этого метода. Если критерий повторяемости не соблюдается, тест следует повторить.

Если эта работа невозможна, результат должен быть отменен.

2) Расчет массовой доли

Если не существует других указаний, результат рассчитывается в массовой доле образца.

5. Критерии правильности

Повторяемость и воспроизводимость, которые фигурируют для каждого метода, определяются следующим образом:

1) повторяемость (r) представляет собой значение, ниже которого находится абсолютная величина разности между двумя отдельными результатами, полученными с помощью одного и того же процесса, на идентичном продукте, в тех же условиях (тот же аналитик, идентичное оборудование, та же лаборатория и в течение короткого промежутка времени);

2) воспроизводимость (R) представляет собой значение, ниже которого находится абсолютная величина разности между двумя отдельными результатами, полученными с помощью одного и того же процесса, на идентичном продукте, в различных условиях (разные аналитики, различные устройства, различные лаборатории и/или в различные временные интервалы);

3) если нет никаких указаний о любых из применяемых методов, значения повторяемости и воспроизводимости выражаются на уровне вероятности 95% в соответствии со стандартом SR SR ISO 5725;

4) цикличные тесты и необходимые исследования следует планировать и проводить в соответствии с международными принципами.

6. Отчет об анализе

В отчете анализа должны быть указаны использованная методология и полученные результаты. Кроме того, он должен отмечать все рабочие детали, не указанные в методе анализа, все дополнительные детали, а также все обстоятельства, которые могли повлиять на результаты. Отчет об анализе должен содержать всю информацию, позволяющую полностью идентифицировать образец.

II. Образцы термообработанного молока

1. Предмет и область применения

В настоящем разделе описывается эталонный метод, применимый к сбору, транспортировке и сохранению образцов термообработанного молока.

2. Общие соображения

Отбор проб термообработанного молока (хранящегося в цистернах) должен осуществляться инспектором Национального агентства по безопасности пищевых продуктов или представителем, делегированным лабораторией, который получил профессиональную подготовку перед проведением сбора образцов.

3. Оборудование, предназначенное для отбора проб

Оборудование, необходимое для отбора проб, не только должно быть изготовлено из нержавеющей стали или другого подходящего материала достаточной прочности, но и его конструкция должна соответствовать конкретному использованию, для которого оно предназначено (смешивание, отбор проб и т.д.).

Соединительные приспособления и мешалки, предназначенные для перемешивания жидкостей в контейнерах, должны иметь достаточную площадь для обеспечения надлежащего перемешивания продукта, чтобы не появился прогорклый вкус. Каждый половник должен быть снабжен твердой ручкой, достаточной для сбора проб с любой глубины контейнера. Емкость половника составляет не менее 50 мл.

Контейнеры для образцов и их крышки должны быть из стекла, металла или пластика.

Материалы, используемые при изготовлении оборудования, которое будет использоваться для отбора проб (контейнеры с крышками), не должны вызывать каких-либо изменений в образце, которые могут повлиять на результаты анализа. Оборудование, а также контейнеры, предназначенные для хранения образцов, имеют чистую, сухую и гладкую поверхность без трещин, а углы должны быть закруглены.

4. Процедура отбора проб

1) Общие положения

Независимо от характера анализа, перед отбором молоко должно быть соответствующим образом гомогенизировано, вручную или механически.

Образец собирают сразу же после гомогенизации, когда молоко еще находится в движении.

Объем образца должен соответствовать потребностям анализа. Поэтому выбирается такая емкость используемого контейнера, чтобы контейнеры были наполнены образцами почти доверху, позволяя в то же время производить надлежащую гомогенизацию перед анализом, избегая при этом сгущения во время транспортировки.

2) Ручная отборка

a) Отбор пробной партии

В тех случаях, когда количество молока, из которого следует отбирать пробу, разделено на несколько контейнеров, из каждого контейнера берется репрезентативное количество и фиксируется количество молока, соответствующее отобранному образцу. Если каждый образец не подвергается отдельному анализу, части этих репрезентативных количеств должны быть гомогенизированы пропорционально количеству в контейнере, из которого был собран каждый образец. После гомогенизации берут один (или более) образец этих пропорциональных количеств.

b) Отбор из больших контейнеров-резервуаров, автоцистерн и вагонов-цистерн

b₁) Перед сбором образцов молоко гомогенизируется путем соответствующей процедуры.

Для гомогенизации содержимого больших контейнеров-резервуаров, автоцистерн и вагонов-цистерн рекомендуется механическое перемешивание (b₂).

Продолжительность гомогенизации зависит от продолжительности нахождения молока в неподвижном состоянии. Следует отметить, что процесс гомогенизации, используемый в каждом конкретном случае, соответствует типу рассматриваемого анализа.

Эффективность гомогенизации значительно влияет на сходство между результатами анализов, проведенных на образцах, отобранных из различных частей партии, либо из выпускного отверстия резервуара через равные промежутки времени в течение его опоражнивания.

Процесс гомогенизации молока (сырого или цельного) считается эффективным, если разница между содержанием жира в двух образцах, отобранных в условиях, описанных выше, была ниже 0,1%.

В большом контейнере, снабженном выходным отверстием на нижней стороне, может накапливаться небольшое количество молока, нерепрезентативного для отбора, даже после гомогенизации. По этой причине предпочтительно собирать образцы через отверстие доступа. Если сбор происходит через выпускное отверстие, для обеспечения репрезентативного характера образца должно быть слито достаточное количество молока.

b₂) Гомогенизация содержимого больших контейнеров или резервуаров, автоцистерн или вагонов-цистерн может осуществляться следующим образом:

- с помощью механической мешалки, помещенной в бак и приводимой в действие электродвигателем;

- с помощью пропеллера или мешалки, приводимой в действие электродвигателем и помещенной в отверстие доступа, чтобы мешалка находилась в подвешенном состоянии;

- в случае автоцистерн и вагонов-цистерн путем перекачки молока в гибкую транспортную трубку, подключенную к насосу и вставленную в отверстие доступа;

- с помощью фильтрованного и чистого сжатого воздуха.

Должны использоваться минимальное давление и объем воздуха для исключения появления кислого вкуса молока.

3) Отбор проб термообработанного молока, предназначенного для непосредственного потребления человеком и упакованного для розничной продажи

В случае термообработанного молока, предназначенного для непосредственного потребления человеком и упакованного для розничной продажи, образцы обязательно должны поступать из нетронутых и неоткрытых контейнеров. Если возможно, образцы берутся непосредственно из упаковочной машины или холодной камеры отделения для обработки как можно скорее после обработки (в случае пастеризованного молока – в тот же день).

Количество образцов каждого типа термообработанного молока (пастеризованного, обработанного «при сверхвысокой температуре», стерилизованного) должно соответствовать количеству анализов, которые должны быть выполнены, и инструкциям, полученным из лаборатории, ответственной за проведение анализа, или от другого компетентного органа,

5. Идентификация образца

Образец должен получить идентификационный код, позволяющий быстро идентифицировать его соответственно указаниям лаборатории, осуществляющей анализ, или другого компетентного органа.

6. Обработка, транспортировка и хранение образцов

По согласованию с компетентными национальными органами лаборатории, выполняющие анализы, разрабатывают инструкции о продолжительности и условиях обработки (химической или термической), транспортировке и хранении, которые должны соблюдаться с момента сбора проб и до их анализа, в зависимости от типа молока и процесса анализа.

В инструкциях должно быть указано следующее.

Во время транспортировки и хранения принимаются меры предосторожности для защиты образца от нежелательного запаха и прямого солнечного света.

Если контейнер, используемый для хранения образца, прозрачен, он хранится в темном месте.

Приложение № 2

к Методологии анализа и

тестирования термообработанного молока,

предназначенного для непосредственного

потребления человеком

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ СУХОГО ВЕЩЕСТВА В МОЛОКЕ

1. Предмет и область применения

В настоящем приложении описывается эталонный метод для определения содержания сухого вещества в молоке.

2. Определение

«Сухое вещество» представляет массовую долю в процентах, которая остается после полной сушки, описанной ниже.

3. Принцип

Выпаривание воды из пробы в сушильном шкафу при температуре 102°C ± 2°C до получения постоянной массы сухого остатка.

4. Аппаратура и лабораторная посуда

Обычный лабораторный материал, в частности:

1) аналитические весы;

2) эксикатор, снабженный эффективным осушителем (например, недавно высушенный силикагель с гигрометрическим индикатором);

3) вентилируемый сушильный шкаф, регулируемый термостатом для работы во всем рабочем диапазоне 102°C ± 2°C;

4) капсулы с плоским дном, имеющие высоту от 20 до 25 мм, диаметром от 50 до 75 мм, изготовленные из адекватного материала, оснащенные подходящими крышками и легко раскрываемые;

5) водяная баня, работающая при температуре кипения;

6) гомогенизатор.

5. Подготовка тестового образца

Добавляется образец молока при температуре 20-25°С. Тщательно гомогенизируется, чтобы получить однородное распределение жировых веществ внутри образца. Не следует слишком сильно встряхивать, чтобы избежать вспенивания или сгущения. Если слой крема диспергируется с трудом, постепенно молоко доводится до температуры между 35-40°С, осторожно перемешивая, чтобы снять крем, который прилип к стенке сосуда. После этого образец быстро охлаждается до 20-25°С.

Для более легкого диспергирования жировых веществ в молоке может быть использован гомогенизатор.

Результаты неверны, если образец содержит видимые жидкие жировые вещества или нерегулярные белые частицы, которые прилипают к стенкам контейнера.

6. Режим работы

1) Подготовка капсулы

Капсулу необходимо высушить (подпункт 4) пункта 4) со снятым колпачком в сушильном шкафу (подпункт 3 пункта 4), поддерживая температуру 102°C ± 2°C в течение не менее 30 минут. Колпачок помещают на капсулу и немедленно размещают его в эксикатор (подпункт 2) пункта 4). Необходимо остудить до температуры окружающей среды (не менее 30 минут) и взвесить с точностью до 0,1 мг.

2) Отбор проб

В подготовленной капсуле (подпункт 1) пункта 6) быстро взвешивается, с точностью до 0,1 мг, 1-5 г (согласно SM ISO 6731:2014) испытуемого образца (пункт 5).

3) Определение сухого вещества

a) Необходимо предварительно высушить капсулу путем размещения ее в водяную баню на 30 минут (подпункт 5) пункта 4).

b) Капсулу со снятым колпачком помещают в сушильный шкаф (подпункт 3) пункта 4), поддерживая температуру 102°C ± 2°C в течение двух часов. Колпачок размещают на капсулу и извлекают из сушильного шкафа.

c) Необходимо остудить в эксикаторе (подпункт 2 пункта 4) при температуре окружающей среды (не менее 30 минут) и взвесить с точностью до 0,1 мг.

d) Капсулу следует вновь разместить со снятым колпачком в сушильный шкаф на один час. Колпачок размещают на капсулу и извлекают из сушильного шкафа. Затем остужают примерно в течение 30 минут в эксикаторе и взвешивают с точностью до 0,1 мг.

e) Операции, описанные в литере d) подпункта 3) пункта 6, повторяются до тех пор, пока разница в массе между двумя последовательными взвешиваниями не будет превышать 0,5 мг. Записывается наименьшая масса.

7. Выражение результатов

1) Расчет и формула

Расчет процента сухой массы по формуле:

где:

W_T = сухое вещество в 100 г (в г);

m₀ = масса в граммах капсулы и колпачка (подпункт 1) пункта 6);

m₁ = масса в граммах капсулы, колпачка и образца (подпункт 2) пункта 6);

m₂ = масса в граммах капсулы, колпачка и сухого образца (литера е) подпункта 3) пункта 6).

Обобщается полученное значение 0,01 (в процентах по массе).

2) Правильность

a) Повторяемость (r): 0,10 г сухого вещества на 100 г продукта.

b) Воспроизводимость (R): 0,20 г сухого вещества на 100 г продукта.

Приложение № 3

к Методологии анализа и

тестирования термообработанного молока,

предназначенного для непосредственного

потребления человеком

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ЖИРОВЫХ ВЕЩЕСТВ

В ЦЕЛЬНОМ, ЧАСТИЧНО ОБЕЗЖИРЕННОМ И ОБЕЗЖИРЕННОМ МОЛОКЕ

1. Предмет и область применения

В настоящем приложении описывается эталонный метод для определения содержания жировых веществ в цельном, частично обезжиренном и обезжиренном молоке.

2. Определение

«Содержание жировых веществ в молоке» представляет все вещества, определенные в процессе, описанном ниже, и выражается в массовой доле.

3. Принцип

Содержание жира определяется путем экстракции жира диэтиловым эфиром и петролейным эфиром (в соответствии с SM EN ISO 1211:2015) из спиртового аммиачного раствора в пробе с последующим выпариванием растворителей, взвешиванием остатка, расчетом массовой доли образца в соответствии с принципом Роуз-Готтлиба.

4. Реагенты

Все реагенты должны иметь признанное аналитическое качество и не оставлять значительные остатки в контрольной пробе.

Чтобы проверить качество реагентов, производится определение, описанное в подпункте 3) пункта 6. Для взвешивания используются колба, лабораторный стакан или пустая металлическая капсула (подпункт 8 пункта 5), приготовленные как тара согласно указаниям подпункта 4) пункта 6 (для коррекции влияния изменения атмосферных условий на результат взвешивания). Если общий остаток, с поправкой на изменения веса тары, больше, чем 2,5 мг, определяется остаток растворителей путем выпаривания 100 мл диэтилового эфира (подпункт 4) пункта 4) и соответственно 100 мл петролейного эфира (подпункт 5) пункта 4). Также используется тара для взвешивания. Если остаток превышает 2,5 мг, необходимо очистить перегонкой растворитель или заменить его.

1) Гидроксид аммония представляет собой раствор примерно 25% (м/м) NH₃. Также может использоваться более концентрированный раствор гидроксида аммония (литера a) подпункта 5) пункта 6 приложения и литера a) подпункта 5) пункта 1 инструкции).

2) Этанол, не менее 94% (v/v). Можно использовать этанол, денатурированный метанолом, если есть уверенность, что это не изменит результаты определения.

3) Конго красный или крезоловый красный

Растворить 1 г Конго красного или крезолового красного в воде и разбавить до 100 мл.

Использование этого раствора, который позволяет лучше наблюдать контактную поверхность между растворителем и водным слоем, является необязательным (литера b) подпункта 5) пункта 6).

Могут быть использованы другие водные растворы красителей, если они не изменяют результаты определения.

4) В диэтиловом эфире отсутствуют пероксиды с содержанием антиоксидантов менее 2 м/кг и согласно требованиям контрольного образца ( подпункт 3) пункта 6).

5) Петролейный эфир с температурой кипения 30-60°C.

6) Смесь растворителей, полученных незадолго до использования путем смешивания равных объемов диэтилового эфира (подпункт 4) пункта 4) и петролейного эфира (подпункт 5) пункта 4).

5. Аппаратура и лабораторная посуда

Поскольку в процессе определения веществ используются летучие легковоспламеняющиеся растворители, используемое электрооборудование должно соответствовать законодательству об использовании таких видов растворителей.

Обычный материал, в частности:

1) аналитические весы;

2) центрифуга, в которой экстракционные колбы или колонки (подпункт 6) пункта 5) могут быть подвергнуты скорости вращения от 500 до 600 об/мин^-1, таким образом получается гравитационное поле 80-90 г на внешних концах воздушных шаров или колонок.

Использование центрифуги является необязательным (литера e) подпункта 5) пункта 6);

3) устройства для дистилляции или выпаривания, позволяющие дистиллировать растворители и этанол из колб или выпаривать их из лабораторных стаканов либо капсул (литеры е) и о) подпункта 5) пункта 6) при температуре, не превышающей 100°С.

4) сушильный шкаф, оборудованный полностью открытыми вентиляционными отверстиями, регулируемыми при температуре 102°C ± 2°C в рабочем пространстве. Шкаф должен быть оснащен соответствующим термометром;

5) регулируемая водяная баня при температуре 35-40°С;

6) колбы для экстракции жировых веществ типа Mojonnier.

Также могут использоваться экстракционные колонки для извлечения жировых веществ, оснащенные сифоном или моющим устройством. Их порядок работы, другой в данном случае, описан в инструкции к приложению № 3.

Колбы (или колонки) должны быть снабжены отполированными пробками из высококачественной пробки или другого материала, которые не будут изменены используемыми реагентами. Пробки должны быть промыты диэтилоксидом (подпункт 4 пункта 4), содержащимся в воде, при температуре 60°C или более, в течение, по меньшей мере, 15 минут, а затем охлаждены в воде таким образом, чтобы в момент их использования они были пропитаны водой;

7) штатив для крепления колб (или колонки) для извлечения жировых веществ (подпункт 6 пункта 5);

8) флакон для промывки, подходящий для смеси растворителей (подпункт 6 пункта 4). Не рекомендуется использовать пластиковые флаконы;

9) контейнеры для сбора жировых веществ, например, колбы для кипения (колбы с плоским дном) или колбы Эрленмейера емкостью от 125 до 250 мл или металлические капсулы. Если используются металлические капсулы, они предпочтительно должны быть изготовлены из нержавеющей стали, иметь плоское дно, горлышко, с диаметром от 80 до 100 мм и высотой около 50 мм;

10) обезжиренные кипятильники из непористой керамики, карбид кремния или стеклянные шарики (дополнительно используются в случае металлических капсул);

11) градуированные цилиндры емкостью 5 и 25 мл;

12) градуированные пипетки емкостью 10 мл;

13) металлические щипцы для работы с колбами, лабораторными стаканами и капсулами.

6. Режим работы

Другой режим работы с помощью экстракционных колонок для извлечения жировых веществ, снабженных сифоном или стиральным устройством (см. подпункт 6) пункта 5), который описан в инструкции.

1) Подготовка образца для тестирования

Необходимо нагреть испытательный образец до температуры около 35-40°C в течение примерно 15 минут, используя, при необходимости, водяную баню (подпункт 5) пункта 5). Далее образец гомогенизируется, осторожно вращая контейнер несколько раз, чтобы не вызвать пены или крема, и быстро охлаждается примерно до 20°C.

2) Отбор проб

Образец гомогенизируется (подпункт 1) пункта 6), осторожно вращая контейнер три или четыре раза и сразу взвешивается с точностью до 1 мг, 10-11 г образца для теста, непосредственно или раздельно, в колбе (подпункт 6) пункта 5).

Образец, отобранный для испытания, должен быть размещен как можно полнее в нижней (узкой) части экстракционной колбы.

3) Контрольный образец

Контрольный тест проводится одновременно с основным тестом, используя тот же режим работы и те же реагенты, но заменив образец с 10-11 мл воды.

Изменение массы контейнера для извлечения жировых веществ, скорректированное изменением массы контрольного контейнера, не должно превышать 2,5 г.

4) Подготовка контейнера для извлечения жировых веществ

Необходимо высушить контейнер (подпункт 9) пункта 5), в котором были установлены несколько кипящих кипятильников (подпункт 10) пункта 5), чтобы обеспечить умеренное кипение во время последующей эвакуации растворителей в сушильном шкафу (подпункт 4) пункта 5) в течение одного часа. Далее контейнер должен охладиться (не в эксикаторе, а в пылесборнике) до температуры помещения, в котором производится взвешивание (не менее одного часа в случае стеклянных контейнеров и не менее 30 минут в случае металлических капсул). Используя шпицы (в частности, чтобы избежать различий в температуре), контейнер помещают на весы и взвешивают с точностью до 0,1 мг.

5) Определение

a) Добавляется 2 мл раствора гидроксида аммония (подпункт 1) пункта 4) или эквивалентного объема более концентрированного раствора и энергично перемешивается с образцом в узкой части колбы. После добавления гидроксида аммония определение производится немедленно.

b) Добавляется 10 мл этанола (подпункт 2) пункта 4) и тщательно перемешиваются таким образом, чтобы содержимое колбы могло стекать от одного конца колбы к другому, избегая приближения жидкости к шейке колбы. Можно добавить две капли Конго красного или крезолового красного (подпункт 3) пункта 4).

c) Добавляется 25 мл диэтилового эфира (подпункт 4) пункта 4), затем колбу закрывают натуральной пробкой, насыщенной водой, или пробкой, смоченной водой (подпункт 6) пункта 5), помешивая колбу, но не слишком сильно (чтобы избежать образования стойких эмульсий), в течение одной минуты в горизонтальном положении, узкой частью вверх, позволяя жидкости стечь из широкой части в узкую. Если необходимо, колба охлаждается под проточной водой, затем осторожно удаляется пробка или закрывающее устройство и промывается, а также горлышко колбы, небольшим количеством смеси растворителей (подпункт 6) пункта 4), используя промывочный флакон (подпункт 8) пункта 5), чтобы промывочные жидкости могли стечь во флакон.

d) Добавляется 25 мл петролейного эфира (подпункт 5) пункта 4), колбу закрывают с помощью водоотталкивающей пробки или другого закрывающего устройства и осторожно встряхивают в течение 30 секунд, как указано в литере c) подпункта 5) пункта 6.

e) Закрытую колбу центрифугируют в течение 1-5 минут при скорости вращения 500-600 об/мин^-1 (подпункт 2) пункта 5). Если центрифуга не используется (см. подпункт 2) пункта 5), оставьте ее на подставке (подпункт 7) пункта 5) не менее чем на 30 минут, пока отстоявшийся слой надосадочной жидкости не станет прозрачным и заметно отделится от водного слоя. При необходимости, колбу охлаждают под проточной водой.

f) Пробка или закрывающее устройство осторожно удаляются и промываются, включая внутреннюю часть горловины колбы, небольшим количеством смеси растворителей (подпункт 6) пункта 4), чтобы промывающие жидкости могли стечь во флакон.

Если интерфейс находится ниже дна горловины колбы, его следует приблизить к основанию, осторожно выливая воду вдоль стенок колбы, чтобы облегчить осаждение растворителя.

g) Удерживая экстракционную колбу за узкую часть, необходимо сцедить с большой осторожностью, насколько это возможно, надосадочный слой жидкости в подготовленный сосуд для извлечения жировых веществ (подпункт 4) пункта 6), содержащий несколько кипятильников (подпункт 10) пункта 5), в случае колб (необязательно в случае механических капсул), исключая сцеживание небольшой части водного слоя.

h) Внешнюю часть горловины экстракционной колбы необходимо промыть небольшим количеством смеси растворителей (подпункт 6) пункта 4) и собрать промывочные жидкости в контейнер для извлечения жировых веществ, предотвращая вытекание смеси растворителей за пределы экстракционной колбы.

Растворитель можно удалить целиком или частично из контейнера путем перегонки или выпаривания, как описано в литере l) подпункта 5) пункта 6.

i) В содержимое экстракционной колбы добавляется 5 мл этанола (подпункт 2) пункта 4), используя его для промывания внутренней части горловины колбы, затем смешивается, как указано в литере b) подпункта 5) пункта 6).

j) Вторая экстракция проводится начиная с операций, описанных в литере c) подпункта 5) пункта 6 и в литере h) подпункта 5) пункта 6, используя при этом только 15 мл диэтилового эфира ( подпункт 4) пункта 4) и 15 мл петролейного эфира (подпункт 5 пункта 4). Диэтилоксид следует использовать для полоскания внутренней части горловины экстракционной колбы. При необходимости, интерфейс доводится до середины горлышка колбы, чтобы обеспечить окончательное осаждение растворителей как можно полнее.

k) Для выполнения третьей экстракции повторяют операции, описанные в литерах c) и h) подпункта 5) пункта 6, но используя только 15 мл диэтилового эфира (подпункт 4) пункта 4) и 15 мл петролейного эфира (подпункт 5) пункта 4). Диэтилоксид следует использовать для дезинфекции внутренней части горловины экстракционной колбы. При необходимости, интерфейс доводится до середины экстракционного колбы, чтобы обеспечить как можно более полное и окончательное отстаивание растворителей.

В случае обезжиренного молока, третья экстракция может быть отменена.

l) Растворители (включая этанол) следует удалить как можно полнее из колбы путем дистилляции, испарения из стакана или капсулы (подпункт 3) пункта 5), горловина колбы промывается небольшим количеством смеси растворителей (подпункт 6) пункта 4) до начала дистилляции.

m) Контейнер нагревают для извлечения жировых веществ (колба наклоняется, чтобы выходили пары растворителя) в течение одного часа в сушильном шкафу (подпункт 4) пункта 5). Контейнер для извлечения жировых веществ удаляется /извлекается из печи, что позволяет охладиться (не в эксикаторе, а в пылесборнике) при комнатной температуре, где будет проводиться взвешивание (в течение не менее одного часа, в случае стеклянных контейнеров, в течение, по меньшей мере 30 минут, в случае металлических капсул) с точностью до 0,1 мг.

Перед взвешиванием контейнеры нельзя протирать. Контейнер помещают на весы с помощью плоскогубцев/щипцов, в частности, чтобы избежать колебаний температуры.

n) Операции, описанные в литере m) полпункта 5) пункта 6, повторяются до тех пор, пока масса контейнера, предназначенного для извлечения жировых веществ, не уменьшится или увеличится на 0,5 мг или менее, между двумя последовательными взвешиваниями. Следует записать минимальную массу, взвешенную как массу контейнера, предназначенного для извлечения жировых веществ и экстрагированного вещества.

o) Необходимо добавить 25 мл петролейного эфира в контейнер для извлечения жировых веществ, чтобы проверить, полностью ли растворилось экстрагированное вещество или нет. Растворитель нагревают осторожно и перемешивают круговыми движениями до тех пор, пока все жировые вещества не растворятся.

Если экстрагированные вещества полностью растворены в нефтяном петролейном эфире, масса растворимых веществ представляет собой разницу между конечной массой колбы с экстрагированными веществами (литера n) подпункта 5) пункта 6) и его начальной массой (подпункт 4) пункта 6).

p) Если экстрагированное вещество не растворяется полностью в петролейном эфире или, в случае сомнения, жировые вещества в контейнере многократно экстрагируются повторной промывкой нагретым петролейным эфиром.

Проводится осаждение нерастворимых веществ и тщательное декантирование петролейного эфира, но без удаления нерастворимых веществ. Эта операция повторяется три раза, используя петролейный эфир, для промывки внутренней части горловины контейнера.

По окончании промывается наружная верхняя часть контейнера смесью растворителей таким образом, чтобы растворитель не вытекал наружу контейнера. Пары петролейного эфира удаляются путем нагрева колбы в течение одного часа в сушильном шкафу, затем охлаждается и взвешивается, как указано в литерах m) и n) подпункта 5) пункта 6.

Масса жировых веществ представляет собой разницу между массой, определенной в литере n) подпункта 5) пункта 6, и этой конечной массой.

7. Выражение результатов

1) Расчет и формула

Содержание жира, выраженное в массовой доле, рассчитывается в соответствии со следующей формулой:

где:

F = содержание жира;

m₀ = масса в граммах образца (подпункт 2) пункта 6);

m₁ = масса в граммах контейнера, предназначенного для извлечения жировых веществ и экстрагированного вещества, как определено в литере n) подпункта 5) пункта 6;

m₂ = вес в граммах резервуара, подготовленного для восстановления жировых веществ, или, в случае нерастворенных веществ, контейнера для извлечения жировых веществ и нерастворимого остатка, определенных в литере p) подпункта 5) пункта 6;

m₃ = масса в граммах контейнера для извлечения жировых веществ, используемых в контрольном образце (подпункт 3) пункта 6), и экстрагированного вещества, определенного в литере n) подпункта 5) пункта 6;

m₄ = масса в граммах контейнера для восстановления жировых веществ (подпункт 4 пункта 6), используемых в контрольном образце (подпункт 3) пункта 6), или, в случае нерастворимых веществ, контейнера для извлечения жировых веществ и нерастворимого остатка, определяется в литере p) подпункта 5) пункта 6.

Результат записывается с точностью до 0,01%.

2) Правильность

a) Повторяемость (r)

a₁) в случае цельного и частично обезжиренного молока: 0,02 г жира на 100 г продукта;

a₂) в случае обезжиренного молока: 0,01 г жировых веществ на 100 г продукта.

b) Воспроизводимость (R):

b₁) в случае цельного молока: 0,04 г жира на 100 г продукта;

b₂) в случае частично обезжиренного молока: 0,03 г жира на 100 г продукта;

b₃) в случае обезжиренного молока: 0,025 г жира на 100 г продукта.

(Инструкция к приложению № 3)

Другой порядок работы с экстракционными колонками

для извлечения жировых веществ, оснащенными сифоном

или промывочным устройством

Режим работы

1) Подготовка образцов для испытания (cм. подпункт 1) пункта 6 приложения № 3).

2) Отбор проб

Производится согласно указаниям подпункта 2) пункта 6, но при использовании колонок для извлечения жировых веществ (cм. подпункт 6) пункта 5 приложения № 3).

Образец перемещается, насколько это возможно, полностью в нижнюю часть экстракционной колонки.

3) Контрольный образец (cм. подпункт 3) пункта 6 приложения № 3).

4) Подготовка контейнера, предназначенного для извлечения жировых веществ (cм. пункт 6 подпункт 4) пункта 6 приложения № 3).

5) Определение

a) Добавляется 2 мл раствора гидроксида аммония (подпункт 1) пункта 4 приложения № 3) или эквивалентный объем раствора более концентрированного гидроксида аммония и хорошо перемешивается с образцом, предварительно обработанным в нижней части колонки. После добавления гидроксида аммония определение выполняется немедленно.

b) Добавляется 10 мл этанола (подпункт 2) пункта 4 приложения № 3) и осторожно, но в достаточной степени перемешивается в нижней части колонки. При необходимости, можно добавить две капли Конго красного или крезолового красного (подпункт 3 пункта 4 приложения № 3).

c) Добавляется 25 мл диэтилового эфира (подпункт 4) пункта 4), колонка закрывается натуральной пробкой, насыщенной водой, или пробкой из другого материала, смоченной водой (подпункт 6 пункта 5) приложения № 3), и хорошо встряхивается, но не очень сильно (чтобы избежать образования стойких эмульсий), вращая и повторяя это действие в течение одной минуты. При необходимости, колонка охлаждается под проточной водой, удаляется натуральная пробка (или пробка из другого материала), а затем ополаскивается, как и горлышко, небольшим количеством смеси растворителей (подпункт 6) пункта 4 приложения № 3) с использованием промывочного флакона (подпункт 8) пункта 5 приложения № 3) таким образом, чтобы в колонку поступала жидкость для промывки.

d) Добавляется 25 мл петролейного эфира (подпункт 5) пункта 4 приложения № 3), колонка закрывается натуральной пробкой (или пробкой из другого материала) и повторно смачивается (путем замачивания в воде), затем колонка осторожно встряхивается в течение 30 секунд, как указано в литере c) подпункта 5) пункта 1.

e) Закрытая колонка центрифугируется в течение 1-5 минут с частотой вращения 500-600 об/мин^-1 (подпункт 2) пункта 5 приложения № 3).

В отсутствие центрифуг (смотрите подпункт 2) пункта 5 приложения № 3) закупоренная колонка остается на стенке в течение, по крайней мере, 30 минут, пока надосадочный слой не прояснится и четко отделится от водного слоя. При необходимости, колонка охлаждается водопроводной водой.

f) Осторожно снимается натуральная пробка (или пробка из другого материала) и промывается, как и горлышко, небольшим количеством смеси растворителей таким образом, чтобы промывочная жидкость могла стечь в колонке.

g) Сифон или промывочное устройство вводятся в колонку, длинный патрубок погружается внутрь до тех пор, пока отверстие не оказывается примерно на 3 мм выше поверхности контакта между слоями. Внутренний патрубок должен быть параллельным оси экстракционной колонки.

Осторожно сливается надосадочный слой колонки в контейнер, подготовленный для извлечения жировых веществ (подпункт 4 пункта 6 приложения № 3), избегая перелива даже самой небольшой части водного слоя; если контейнер является колбой, он должен содержать несколько кипятильников (подпункт 10) пункта 5 приложения № 3) – необязательно в случае металлических капсул. Отверстие промывается небольшим количеством смеси растворителей таким образом, чтобы промывочная жидкость стекала в контейнер рекуперации жировых веществ.

h) Устройство отсоединяется от горловины колонки, затем необходимо осторожно поднять и промыть внутреннюю часть его длинного патрубка изнутри небольшим количеством смеси растворителей. Устройство извлекается и вновь вводится для переливки моющей жидкости в контейнер рекуперации жировых веществ.

Внешнее отверстие устройства промывается небольшим количеством смеси растворителей, затем промывочные жидкости собираются в контейнер. Растворитель также частично или полностью удаляется из контейнера путем перегонки или испарения, как указано в литере l) подпункта 5) пункта 6 приложения № 3.

i) Устройство снова отсоединяется от горловины колонки, затем устройство осторожно поднимается и добавляется 5 мл этанола в колонку, этанол используется для ополаскивания длинного патрубка изнутри, затем смешивается, как указано в литере b) подпункта 5) пункта 1 приложения № 3).

j) Второе экстрагирование производится путем повторения операций, описанных в литерах b) и h) подпункта 5) пункта 1, но с использованием только 15 мл диэтилового эфира (подпункт 4) пункта 4 приложения № 3) и 15 мл петролейного эфира (подпункт 5) пункта 4 приложения № 3). Диэтиловый эфир используется для ополаскивания длинного патрубка изнутри после первой экстракции во время вывода устройства из колонки.

k) Третья экстракция повторяет еще раз операции, описанные в литерах b) и h) подпункта 5) пункта 1, используя 15 мл диэтилового эфира и 15 мл петролейного эфира и ополаскивая внутренний длинный патрубок устройства, как указано в литере j) подпункта 5) пункта 1.

В обезжиренном молоке может быть отменена третья экстракция.

l) В дальнейшем необходимо следовать указаниям, описанным в литерах l) и p) подпункта 5) пункта 6 приложения № 3.

Приложение № 4

к Методологии анализа и

тестирования термообработанного молока,

предназначенного для непосредственного

потребления человеком

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО СОДЕРЖАНИЯ ОБЕЗЖИРЕННЫХ

СУХИХ ВЕЩЕСТВ В ТЕРМООБРАБОТАННОМ МОЛОКЕ

1. Предмет и область применения

В настоящем приложении описывается эталонный метод определения содержания обезжиренных сухих веществ в термообработанном молоке.

2. Определение и расчет

Общее содержание обезжиренных сухих веществ выражается в массовой доле.

Он представляет собой разницу между общим содержанием сухих веществ (приложение № 2) и содержанием жировых веществ (приложение № 3).

Приложение № 5

к Методологии анализа и

тестирования термообработанного молока,

предназначенного для непосредственного

потребления человеком

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО СОДЕРЖАНИЯ АЗОТА

В ЦЕЛЬНОМ, ЧАСТИЧНО ОБЕЗЖИРЕННОМ И ОБЕЗЖИРЕННОМ МОЛОКЕ

1. Предмет и область применения

В настоящем приложении описывается эталонный метод определения общего содержания азота в цельном, частично обезжиренном и обезжиренном молоке.

2. Определение

Под общим содержанием азота в молоке понимается содержание азота, выраженное в массовой доле, полученное методом Кьельдаля.

3. Принцип

Взвешенное количество образца молока расщепляется с помощью концентрированной серной кислоты и сульфата калия в присутствии сульфата меди (II) в качестве катализатора, для того, чтобы азот из органических соединений преобразовался в сульфат аммония. Аммиак, выделяемый добавлением раствора гидроксида натрия, дистиллируется и регенерируется в растворе борной кислоты. Затем этот раствор обрабатывается кислым раствором.

4. Реагенты

1) Сульфат калия (K₂SO₄)

2) Медно-сульфатный раствор. 5,0 г сульфата меди (II) пентагидрата (CuSO₄ 5H₂O) растворяют в воде и доводят до 100 мл (20°С) в мерной колбе.

3) Серная кислота, по меньшей мере, 98,0% (м/м) H₂SO₄.

4) Раствор гидроксида натрия, 47% (м/м) 704 г NaOH /л (при 20°C).

Можно использовать и менее концентрированный раствор гидроксида натрия, например, 40% (м/м) 572 г/л, 20°С, или 30% (м/м) 399 г/л, 20°С.

5) Раствор борной кислоты. Растворить 40 г борной кислоты (H₃BO₃) в одном литре теплой воды, дать остыть и хранить в боросиликатном стекле.

6) Индикатор.

Растворяется 0,01 г метил-красного, 0,02 г бромотимола и 0,06 г бромокрезола в 100 мл этилового спирта. Раствор хранится в темно-коричневой бутылке в прохладном темном месте.

7) Нормированный объемный кислотный раствор

C (½H₂SO₄) или c (HCL) = 0,05 моль/л, титрированные до 0,0001 моль/л.

8) Сахароза без соединений азота

9) Чистая соль аммония, такая как аммоний (NH₄)₂C₂O₄, H₂O, H₂O или сульфат аммония (NH₄)₂ SO₄.

10) Триптофан (C₁₁H₁₂N₂O₂), фенацетин (C₁₀H₇CH₂CONH₂) или моно- или дигидрохлорид лизина (C₆H₁₄N₂O₂∙ HCl соответственно C₆H₁₄N₂O₂ ∙ 2HCl).

Степень чистоты реагентов, упомянутых в подпунктах 9) и 10) пункта 4, должна превосходить «аналитическое качество». Для подпунктa 9) пункта 4 следует использовать, по мере возможности, раствор сертифицированных аммониевых солей.

5. Аппаратура и лабораторная посуда

Обычный материал, в частности:

1) колба Кьельдаля емкостью 500 мл;

2) кипятильники, например, стеклянные бусины диаметром около 5 мм, гранулы Хенгара и пемза;

3) бюретки или автоматические пипетки с дозой 1,0 мл;

4) стеклянные градуированные цилиндры емкостью 50, 100 и 250 мл;

5) дигестивный аппарат (подпункт 1) пункта 5) в наклонном положении (около 45°), снабженный электрическим нагревателем или регулируемой газовой горелкой, таким образом, что содержимое колбы не поднимается выше трети горлышка, и экстрактором дымовых газов;

6) дистилляционный аппарат боросиликатного стекла, к которому может быть присоединена колба Кьельдаля (подпункт 1) пункта 5), которая состоит из эффективного устройства для выпуска жидкости, полученной из первой дистилляции, соединенной с эффективной холодильной камерой с правой внутренней трубкой и трубкой выпускного отверстия, соединенного с его нижней частью; соединительные трубки и заглушки должны быть водонепроницаемыми и предпочтительно изготовлены из неопрена;

7) пипетка или автоматическая пипетка с дозой 0,10 мл;

8) конические колбы емкостью 500 мл, градуированные до 200 мл;

9) бюретка емкостью 50 мл, градуированная с интервалом 0,1 мл с максимальной погрешностью ±0,05 мл;

10) увеличительное стекло для точных измерений бюретки (подпункт 9) пункта 5);

11) измеритель pH;

12) автоматическая бюретка.

6. Режим работы

1) В колбу Кьельдаля последовательно вводятся (подпункт 1) пункта 5) кипятильники (подпункт 2) пункта 5) (например, три стеклянных шарика), 15 г сульфата калия (подпункт 1) пункта 4), 1,0 мл раствора сульфата меди (подпункт 2) пункта 4), около 5 г молока (весом до 0,001 г) и 25 мл серной кислоты (подпункт 3) пункта 4). Также используется кислота для ополаскивания сульфата меди, сульфата калия или остатков раствора сульфата молока, оставшихся на горлышке колбы, затем смешивается содержимое колбы.

Поскольку органические вещества поглощают серную кислоту во время кипения, предпочтительно использовать для дигестии 30, а не 25 мл H₂SO₄ (подпункт 3) пункта 4), если молоко содержит более 5,0% (м/м) жировых веществ. Это верно и для контрольного образца.

2) Следует нагреть каждую колбу Кьельдаля на аппарате минерализации (подпункт 5) пункта 5), сначала при низкой температуре, чтобы вся черная пена оставалась в колбе.

Если исходная пена исчезает, чтобы уступить место изобильному белому сгоревшему газу, смесь интенсивно кипятят (пары кислот будут конденсироваться на полпути в горлышке колбы), пока черные частицы полностью не исчезнут, и содержимое колбы станет прозрачным, бледного сине-зеленого цвета. Кипение продолжается, но более умеренно, по крайней мере, полтора часа.

Следует обратить внимание на следующие указания:

a) период полоскания не должен превышать один час, а общая продолжительность минерализации должна составлять не менее двух с половиной часов. Если для достижения полоскания требуется более одного часа, необходимо соответственно увеличить время минерализации;

b) сульфат калия способствует минерализации, поскольку повышает температуру кипения. Если остаточный объем H₂SO₄ в конце периода минерализации составляет менее 15 мл, может произойти потеря азота из-за перегрева. В случае нагрева газа используется пластина изоляционного материала с круглым отверстием и диаметром таких размеров, чтобы прямое пламя могло касаться только той части колбы, которая находится под поверхностью жидкости колбы (подпункт 5) пункта 5);

c) если черные частицы попадают в горлышко колбы и не все они смываются внутри колбы выщелоченной кислотой во время начальной фазы кипения (смывание может быть улучшено верчением колбы), оставьте колбу с минимальным количеством воды, пока она достаточно не охладится, и частицы не будут смыты.

Затем минерализация протекает в соответствии с описанным выше способом.

3) Если колбы Кьельдаля охладились, необходимо добавить 300 мл воды в каждый контейнер, чтобы все частицы, которые прилипали к горловине шара, были смыты. Содержимое колбы тщательно перемешивается до растворения кристаллов. Добавляется несколько кипятильников (подпункт 2) пункта 5) для получения гомогенного кипения. После этого в каждую колбу добавляются 70 мл раствора гидроксида натрия (подпункт 4) пункта 4), поддерживая колбу в наклонном положении, так, чтобы раствор гидроксида натрия образовал нижний слой в колбе. Наливать надо осторожно, чтобы раствор не вытекал наружу.

Общий объем воды и раствора гидроксида натрия должен составлять 370 мл, чтобы собрать приблизительно 150 мл дистиллята, прежде чем кипящие пузырьки появятся на поверхности колбы (подпункт 4) пункта 6). Если добавляется более раствор гидроксида натрия с концентрацией менее 47% (м/м), объем добавляемой воды должен пропорционально снижаться.

Таким образом, если добавить 85 мл 40% (м/м) раствора или 125 мл 30% (м/м) раствора, объем добавляемой воды должен составлять 282 и 245 мл соответственно.

4) Также необходимо соединить каждую колбу Кьельдаля с дистилляционным аппаратом (подпункт 6) пункта 5), обеспечивая, чтобы кончик трубки холодильной камеры был погружен в 50 мл раствора борной кислоты (подпункт 5) пункта 4) и 0,20 мл (5-6 капель) индикатора (подпункт 6) пункта 4), содержащихся в конической колбе. Каждую колбу Кьельдаля встряхивают, чтобы хорошо перемешать содержимое, и доводят до кипения, сначала на малом огне, для исключения чрезмерного образования пены. После получения от 100 до 125 мл дистиллята каждую колбу Эрленмейера опускают так, чтобы конец трубки холодильной камеры находился примерно на 40 мм выше отметки 200 мл. Каждая дистилляция длится до появления пузырьков кипения на поверхности колбы, а затем внезапно нагрев прекращается. Далее следует отсоединить каждую колбу Кьельдаля и промыть конец каждой выпускной трубки эвакуации охладителя небольшим количеством воды, собирая промывочную воду в колбе Эрленмейера.

Следует обратить внимание на следующие указания:

a) скорость дистилляции должна позволять собирать около 150 мл дистиллята перед появлением пузырьков кипения, что соответствует общему объему примерно 200 мл в колбе Эрленмейера;

b) эффективность каждой холодильной камеры должна быть такой, чтобы поддерживать температуру жидкости в каждой колбе ниже 25°C во время дистилляции.

5) Титрируется каждый дистиллят объемным раствором (подпункт 7) пункта 4) до рН 4,6 ± 0,1 с использованием измерителя рН и автоматической бюретки. Добавление индикатора позволяет проверить точность процесса титрования. Записывается значение, указанное каждой бюреткой, с точностью 0,01 мл, используя увеличительное стекло (подпункт 10) пункта 5), чтобы избежать ошибок параллакса.

Титрование может выполняться только с помощью указателя. Титрование проводится до тех пор, пока дистиллят не достигнет цвета свежеприготовленного раствора 150 мл воды, к которому добавляют 50 мл раствора борной кислоты и 0,20 мл индикатора из колбы Эрленмейера (подпункт 8) пункта 5).

6) Необходимо сделать заготовку, как указано в подпунктах 1) и 5) включительно, используя 5 мл дистиллированной воды с примерно 0,1 г сахарозы (пункта 4 подпункт 8) пункта 4) вместо образца молока.

Для титрования дистиллята требуется только очень небольшое количество нормированного кислого объемного раствора (подпункт 7) пункта 4).

7) Периодически проверяется точность результатов путем выполнения двух тестов восстановления, следуя инструкциям в подпунктах 1) и 5) пункта 6.

a) Необходимо следить за тем, чтобы при дистилляции не возникало потерь азота в результате чрезмерного нагрева или механической утечки; для этой цели используют образец, состоящий из 0,15 г оксалата аммония или сульфата аммония (подпункт 9) пункта 4), взвешенный с точностью до 0,001 г, и 0,1 г сахарозы (подпункт 8) пункта 4).

Процент извлекаемого азота должен составлять от 99 до 100%.

Результаты ниже или выше этого интервала свидетельствуют о процедурной ошибке и/или ошибке концентрации нормализованного раствора (подпункт 7) пункта 4).

b) Проверяется, если процедура минерализации может высвободить общее количество белкового азота с использованием образца, состоящего из 0,20 г чистого триптофана, 0,35 г фенацетина или 0,20 г гидрохлорида лизина (подпункт 10) пункта 4). Все соединения должны быть взвешены с точностью до 0,001 г. Процент извлечения азота должен составлять не менее 98-99%.

7. Меры безопасности

При работе с концентрированной серной кислотой, концентрированной гидроокисью натрия и колбами Кьельдаля всегда следует носить лабораторный фартук, защитные очки и кислотостойкие перчатки.

Во время дистилляции колбы Кьельдаля постоянно контролируются.

Если содержимое колбы начинает сильно кипеть, дистилляция немедленно прекращается, во избежание рисков. В случае нагрева дистилляционного аппарата более двух, трех минут, коллекторная колба опускается так, чтобы конец охладителя выходил из жидкости.

8. Выражение результатов

1) Расчет и формула

Содержание азота рассчитывается в граммах азота на 100 г продукта, используя формулу:

где:

N = содержание азота;

V = объем в мл нормированного кислого объемного раствора, используемого при дозировании;

V₀ = объем в мл нормированного кислого объемного раствора, используемого в пробе образца;

С = молярная концентрация/л нормированного кислого объемного раствора (подпункт 7) пункта 4);

m = масса в граммах образца.

Результат округляется с 0,001 г на 100 г.

2) Правильность

a) Повторяемость (r): 0,007 г на 100 г

b) Воспроизводимость (R): 0,015 г на 100 г

9. Модифицированный режим работы

1) Использование кальцинирующей печи вместо системы минерализации с колбами Кьельдаля (подпункты 1) и 5) пункта 5). В этом случае, чтобы избежать возможных неполадок, проверяется каждый пункт отдельно (подпункт 7) пункта 6).

2) Вместо прямого нагрева (подпункт 4) пункта 6) следует использовать систему паровой дистилляции. Если прибор не позволяет использовать дистиллированную воду, используемая вода не должна содержать кислотных или щелочных летучих веществ.

3) Вместо 5 г (подпункт 1) пункта 6) можно использовать образец 1 г молока (метод полумакро-Кьельдаль) при условии, что:

a) количество реагентов, используемых для минерализации (подпункт 1) пункта 6): 25 мл H₂SO₄, 1 мл CuSO₄, 5 мл H₂O, 5 мл K₂SO₄ редуцируемые пропорционально (на одну пятую);

b) общая продолжительность минерализации (подпункт 2) пункта 6) уменьшается до 75 минут;

c) количество гидроксида натрия (подпункт 3) пункта 6) должно быть редуцировано пропорционально (на одну пятую);

d) используется нормированный кислый раствор (подпункт 7) пункта 4) более низкой концентрации (0,02-0,03 моль/л).

Использование одного или другого из этих вариантов приемлемо только при условии, что повторяемость (литера a) подпункта 2) пункта 8) и результаты двух проверок точности (подпункт 7) пункта 6) соответствуют значениям, установленным нормой.

Приложение № 6

к Методологии анализа и

тестирования термообработанного молока,

предназначенного для непосредственного

потребления человеком

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО СОДЕРЖАНИЯ БЕЛКА

В ТЕРМООБРАБОТАННОМ МОЛОКЕ

1. Предмет и область применения

В настоящем приложении описывается эталонный метод определения содержания белка в термообработанном молоке.

2. Определение

Общее содержание молочного белка: значение, полученное путем умножения соответствующим фактором (пункт 3) общего содержания азота, выраженного в массовой доле, определяемым методом, описанным в приложении № 5 (пункт 3).

3. Расчет

Общее содержание белка в молоке = 6,38 × общее содержание в азоте молока в процентах.

Приложение № 7

к Методологии анализа и

тестирования термообработанного молока,

предназначенного для непосредственного

потребления человеком

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЪЕМНОЙ МАССЫ СЫРОГО МОЛОКА,

ЦЕЛЬНОГО МОЛОКА, ЧАСТИЧНО ОБЕЗЖИРЕННОГО МОЛОКА

И ОБЕЗЖИРЕННОГО МОЛОКА ПРИ 20°C

1. Предмет и область применения

В настоящем приложении описывается эталонный метод определения объемной плотности сырого молока, цельного молока, частично обезжиренного молока и обезжиренного молока при 20°С.

2. Определение

Объемная плотность молока представляет собой массу определенного объема молока при 20°C относительно этого объема.

3. Принцип

Объемная плотность при 20°C определяется изометрией.

4. Аппаратура и лабораторная посуда

Обычный лабораторный материал и, в частности:

1) ареометр

Ареометр объемной массы представляет собой инструмент, состоящий из стеклянного поплавка, широкого и расположенного на его нижнем конце, и цилиндрического стеклянного стержня, приваренного к верхней части поплавка и коаксиальный с ним, причем, верхний конец стержня закрыт.

Стеклянный поплавок содержит грузило (свинец, ртуть и т.д.) для регулировки массы ареометра. Стержень включает градиентную шкалу от 1,025 до 1,035 г/мл.

Ареометр следует проверять пикнометрическим методом, используя пикнометр емкостью 100 мл, оборудованный высокоточным термометром;

2) цилиндрические пробирки (из стекла или нержавеющей стали) следующих минимальных размеров:

a) внутренний диаметр цилиндра: приблизительно 35 мм;

b) высота внутреннего цилиндра: приблизительно 225 мм;

3) водяная баня при температуре 20 ± 0,1°C;

4) водяная баня при температуре 40 ± 2°C;

5) термометр, градуированный с интервалом не менее 0,5°C.

5. Режим работы

1) Образец гомогенизируется, вращая контейнер для диспергирования жировых веществ. Образец помещается в водяную баню (подпункт 4 пункта 4) и находится там до тех пор, пока температура не достигнет 40°C, а затем еще 5 минут при этой же температуре. Далее хорошо перемешивается путем последовательных поворотов, чтобы получить однородное распределение жировых веществ, и охлаждается до 20°C во второй водяной бане (4 подпункт 3 пункта 4).

2) Образец хорошо гомогенизируется, вращая контейнер, но избегая проникновения воздуха. Молоко выливают в цилиндрическую трубку (подпункт 2 пункта 4), выдерживают в наклонном положении, чтобы избежать вспенивания или пузырьков. Используется достаточное количество молока для выведения жидкости во время ввода ареометра (подпункт 1 пункта 4) в пробирку. Ареометр осторожно погружается в молоко и свободно плавает, пока не найдет свою точку равновесия. Трубку размещают в вертикальном положении.

Ареометр располагают посредине колонны жидкости, чтобы он не касался стенок пробирки.

3) Если ареометр достиг точки равновесия, устанавливается градация в верхней части мениска.

4) Сразу после считывания ареометра вводится термометр (подпункт 5 пункта 4) в образец и определяется температура с точностью до 0,5°C. Температура не должна отклоняться более чем на ±2°C от 20°C.

6. Коррекция температуры

Если в момент измерения объемной массы температура молока, подвергнутого анализу, составляет не ровно 20°C, результат должен быть скорректирован путем добавления просчитанной объемной массы 0,0002 для каждого градуса Цельсия выше 20°C или уменьшения 0,0002 для каждого градуса Цельсия ниже 20°C. Эта поправка действительна только в том случае, если температура образца превышает 20°C не более чем на 5°C.

7. Выражение результатов

Объемная масса образца, выраженная в г/мл обезжиренного молока при 20°С, рассчитывается в соответствии со следующей формулой:

где:

mv = объемная плотность образца, полученная путем считывания ареометра (подпункт 4 и пункт 5) в г/л;

MG = содержание жировых веществ в образце (г/л);

0,92 = плотность жировых веществ.

8. Правильность

1) Повторяемость (r): 0,0003 г/мл

2) Воспроизводимость (R): 0,0015 г/мл