Постановление № 1207 от 02.11.2016

ПРАВИТЕЛЬСТВО РЕСПУБЛИКИ МОЛДОВА

ПОСТАНОВЛЕНИЕ

об утверждении Санитарного регламента

о косметической продукции

№ 1207  от  02.11.2016

 (в силу 11.11.2018) 

Мониторул Офичиал ал Р. Молдова № 388-398 ст.1308 от 11.11.2016

* * *

Примечание: По всему тексту постановления слова "Министерство здравоохранения" и "Национальный центр общественного здоровья" во всех грамматических формах заменить соответственно словами "Министерство здравоохранения, труда и социальной защиты" и "Национальное агентство общественного здоровья" в соответствующем падеже, согласно Пост.Прав. N 1090 от 18.12.2017, в силу 11.11.2018

На основании статьи 6 Закона № 10-XVI от 3 февраля 2009 года о государственном надзоре за общественным здоровьем (Официальный монитор Республики Молдова, 2009 г., № .67, ст.183), с последующими изменениями и дополнениями, Правительство

ПОСТАНОВЛЯЕТ:

1. Утвердить Санитарный регламент о косметической продукции (прилагается).

2. Настоящее постановление вступает в силу по истечении 24 месяцев с даты опубликования в Официальном мониторе Республики Молдова.

3. Контроль за выполнением настоящего постановления возложить на Министерство здравоохранения.

[Пкт.3 изменен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

Приложение

к Постановлению Правительства

№ 1207 от 2 ноября 2016 г.

Примечание: В грифе утверждения текст "Приложение № 1" заменить словом "Приложение",
- а по всему тексту Положения текст "Министерство здравоохранения, труда и социальной защиты" в любой грамматической форме заменить словами "Министерство здравоохранения" в соответствующей грамматической форме,
- по всему тексту слова "государственный язык" в любой грамматической форме заменить словами "румынский язык" в соответствующей грамматической формесогласно Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024

САНИТАРНЫЙ РЕГЛАМЕНТ

о косметической продукции

Настоящее Постановление частично перелагает Регламент (ЕС) Европейского Парламента и Совета № 1223/2009 от 30 ноября 2009 года о косметической продукции (CELEX: 32009R1223), опубликованный в Официальном журнале Европейского Союза L 342 от 22 декабря 2009 года, с последними изменениями, внесенными Регламентом (ЕU) 2024/996 Комиссии от 3 апреля 2024 года.

[Формула гармонизации в редакции Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024] 

1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

1. Санитарный регламент о косметической продукции (далее – Регламент) устанавливает правила и нормы размещения на рынке косметической продукции в целях гарантирования функционирования внутреннего рынка и обеспечения защиты здоровья населения.

2. Настоящий Регламент распространяет свое действие только на косметическую продукцию, не затрагивая лекарственные препараты, медицинские изделия, биоцидную продукцию. Разграничение сфер регулирования вытекает, в частности, из детализированного определения косметической продукции, которое относится как к сфере применения, так и к целям использования такой продукции.

Не относятся к косметической продукции вещества или смеси, предназначенные для приема внутрь, вдыхания, инъекций или имплантации в тело человека.

3. В целях настоящего Регламента применяются следующие понятия и определения:

косметический продукт – вещество или смесь, предназначенные для нанесения на различные внешние участки человеческого тела (эпидермис, система волосяного покрова, ногти, губы и внешние генитальные органы) или на зубы и на слизистую оболочку ротовой полости исключительно или преимущественно для их отчистки, ароматизирования, изменения внешнего вида, защиты, сохранения в хорошем состоянии или коррекции запаха тела;

готовый косметический продукт – косметическая продукция в конечном составе, в каком она размещается на рынке и предоставляется в распоряжение конечным потребителям, или ее прототип;

прототип – первая модель или образец, который не выпускался серийно и на основе которого воспроизводилась или окончательно дорабатывалась готовая косметическая продукция;

вещество – химический элемент или его состав в натуральном состоянии или полученный в процессе производства, включая любые примеси, необходимые для сохранения его устойчивости и любые посторонние примеси, получаемые в результате применяемого процесса, за исключением любых растворов, которые могут отделяться без воздействия на устойчивость вещества или изменения его состава;

смесь – смесь или раствор, образуемые из двух или более веществ;

ингредиент – вещество или смесь, используемые в косметическом продукте в процессе производства;

производитель – физическое или юридическое лицо, которое производит косметическую продукцию или решает вопросы, связанные с проектированием или производством такой продукции, и продает данную косметическую продукцию под своим именем или своей торговой маркой;

дистрибьютор – физическое или юридическое лицо в цепи поставки, не являющееся производителем или импортером, которое предоставляет косметическую продукцию на внутренний рынок;

конечный потребитель – потребитель или специалист, использующий косметическую продукцию;

введение на рынок – первое предоставление косметической продукции на рынок;

импортер – физическое или юридическое лицо, которое вводит на рынок косметическую продукцию из другой страны;

наноматериал – нерастворимый или биологически устойчивый и специально произведенный материал с одним или более размеров, или внутренней структурой, размером от 1 до 100 нанометров;

консерванты – вещества, которые исключительно или в основном предназначены для препятствования размножению микроорганизмов в косметической продукции;

красители - вещества, которые исключительно или в основном предназначены для окрашивания косметической продукции, тела в целом или его определенных частей, посредством впитывания или отражения видимого солнечного света; кроме того, красителями признаются прекурсоры окисляемых красителей для волос;

ультрафиолетовые фильтры – вещества, которые исключительно или в основном предназначены для защиты кожи от ультрафиолетового излучения посредством впитывания, отражения или рассеивания ультрафиолетового излучения;

нежелательный эффект – нежелательная реакция на здоровье населения, обусловленная нормальным или предсказуемым использованием косметической продукции;

серьезный нежелательный эффект – нежелательный эффект, который приводит к временной или постоянной функциональной неспособности, нетрудоспособности, госпитализации, врожденным аномалиям или к непосредственному риску для жизни или к смерти;

изъятие – мера, направленная на недопущение предоставления на рынок косметической продукции в цепи поставки;

снятие с продажи – мера, направленная на возврат косметической продукции, которая уже была предоставлена на рынок конечному потребителю;

окончательный состав – состав, который включает категорию или назначение ингредиентов и их максимальную концентрацию в косметической продукции или предоставляет соответствующую качественную и количественную информацию во всех случаях, когда такой состав не охватывает или частично охватывает косметическую продукцию.

смываемая после применения продукция – косметическая продукция, которая предназначена для удаления после применения на коже, волосах или слизистых оболочках;

несмываемая после применения продукция – косметическая продукция, которая предназначена для нахождения в долговременном контакте с кожей, волосами или слизистой оболочкой;

средство для ухода за волосами – косметическая продукция, которая предназначена для нанесения на волосы головы или лица, за исключением ресниц;

средство для ухода за кожей – косметическая продукция, которая предназначена для нанесения на кожу;

средство для ухода за губами – косметическая продукция, которая предназначена для нанесения на губы;

средство для ухода за кожей лица – косметическая продукция, которая предназначена для нанесения на кожу лица;

средство для ухода за ногтями – косметическая продукция, которая предназначена для нанесения на ногти;

средство гигиены полости рта – косметическая продукция, которая предназначена для нанесения на зубы или слизистую оболочку ротовой полости;

продукция, контактирующая со слизистыми оболочками – косметическая продукция, которая предназначена для нанесения на слизистую оболочку ротовой полости, на ободок глаз или наружные половые органы;

средство для глаз – косметическая продукция, которая предназначена для применения вокруг глаз;

профессиональное использование – применение или использование косметической продукции лицами в процессе осуществления ими своей профессиональной деятельности;

соли – соли катионов натрия, калия, кальция, магния, аммония и этаноламина; соли анион хлорид бромид, сульфат, ацетат;

сложные эфиры – метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, фенил;

общие международные названия:

международное общее название (Nonproprietary Names – INN) для фармацевтических препаратов, рекомендованных Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ), Женева, август 1975 г.;

международные CAS-номера (Chemical Abstracts Service);

номер СЕ (ЕС) – который соответствует либо номерам Европейского перечня существующих коммерческих химических веществ ((European Inventory of Existing Commercial chemical Substances – EINECS), либо номерам Европейского перечня зарегистрированных химических веществ (European List of Notified Chemical Substances – ELINCS), или регистрационному номеру, установленному Регламентом ЕС 1907/2006;

XAN – название которое является наименованием, одобренным определенной страной (X), например USAN, которое соответствует наименованию, одобренному США;

наименование по Классификатору общепринятых названий ингредиентов – международная номенклатура косметических ингредиентов (INCI).

3¹. Учитывая различные определения наноматериалов, опубликованные различными органами, и постоянный технический и научный прогресс в области нанотехнологий, Министерство здравоохранения приведет понятие наноматериал в соответствие и адаптирует его, исходя из технического и научного прогресса и определений, принятых на международном уровне.

[Пкт.3.1 введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

4. Список включенных категорий косметической продукции, так как они определены в пункте 3 настоящего Регламента, изложен в Приложениии № 1 к настоящему Регламенту, но не лимитирован.

II. БЕЗОПАСНОСТЬ, ОТВЕТСТВЕННОСТЬ

5. Косметическая продукция, предоставленная на рынок, должна быть безопасной для здоровья населения при ее использовании в нормальных или разумно предсказуемых условиях, принимая во внимание, в частности, следующее:

1) при представлении продукции (форма, запах, цвет, внешний вид, упаковка, объем или размер) должно соблюдаться обязательное требование – косметическая продукция должна быть оформлена и упакована таким образом, чтобы потребители, в частности дети, не перепутали ее с пищевыми продуктами и не поместили ее себе в рот или не проглотили, что могло бы привести впоследствии к таким рискам, как удушье, отравление, перфорация или непроходимость кишечного тракта;

2) маркировку с точным указанием даты минимального срока годности, после которой следует указание даты потребления;

3) инструкции по ее использованию и удалению после использования;

4) любые иные указания или информацию, предоставленные ответственным лицом, определенным в пункте 7.

[Пкт.5 изменен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

6. Положения о предупреждениях не освобождают лиц, указанных в пунктах 3 и 7 настоящего Регламента, от обязанности выполнять другие требования, предусмотренные настоящим Регламентом.

7. На рынке размещается только та косметическая продукция, за которую несет ответственность юридическое или физическое лицо, назначенное в качестве ответственного лица.

[Пкт.7 в редакции Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024] 

7¹. Ответственное лицо обеспечивает соответствие размещенной на рынке косметической продукции обязательствам, установленным в Регламенте.

[Пкт.7¹ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

7². Для косметической продукции, произведенной в Республике Молдова, ответственным лицом является зарегистрированный в Республике Молдова производитель. Производитель письменным распоряжением может назначить в качестве ответственного лица другое зарегистрированное в Республике Молдова лицо с его письменного согласия.

[Пкт.7² введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

7³. Если косметическая продукция, произведенная в Республике Молдова, впоследствии становится предметом экспорта, зарегистрированный в Республике Молдова производитель назначает письменным распоряжением лицо в качестве ответственного лица, с его письменного согласия.

[Пкт.7³ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

7⁴. Для импортированной косметической продукции каждый импортер является лицом, ответственным за конкретную косметическую продукцию, которую он размещает на рынке. Импортер письменным распоряжением может назначить зарегистрированное в Республике Молдова лицо в качестве ответственного лица, с его письменного согласия.

[Пкт.7⁴ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

7⁵. Дистрибьютор является ответственным лицом, если он размещает косметическую продукцию на рынке под своим именем или изменяет уже размещенную на рынке продукцию таким образом, что это может отразиться на ее соответствии требованиям Регламента.

[Пкт.7⁵ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

8. Перевод информации на румынский язык о косметической продукции, уже размещенной на рынке, не рассматривается в качестве модификации этого продукта, способной повлиять на соответствие применимым требованиям настоящего Регламента.

8¹. Национальное агентство общественного здоровья проверяет подлинность/ достоверность/ правильность сопровождающей продукцию информации, переведенной с других языков ответственным лицом.

[Пкт.8¹ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

[Пкт.9 утратил силу согласно Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

10. Ответственное лицо обязано:

1) обеспечить соответствие косметической продукции требованию пунктов 5, 13,15-54, 56, 58-71 настоящего Регламента;

2) если есть основания предполагать, что косметическая продукция, размещенная на рынке, не соответствует требованиям настоящего Регламента, в течение 24 часов предпринять соответствующие меры, необходимые для приведения продукции в соответствие с настоящим Регламентом, включая изъятие или снятие ее с продажи;

3) в случае, если косметическая продукция представляет риск для здоровья населения, информировать в течение 24 часов Национальное агентство общественного здоровья и компетентные органы государства, на территории которого обеспечен сводный доступ к данными о продукции, сообщив подробности о несоответствии продукции и о предпринятых корректирующих мерах по устранению несоответствия;

4) взаимодействовать с национальными органами, указанными в подпункте 3) данного пункта, по их требованию, в отношении любых действий, направленных на устранение рисков косметической продукции, размещенной на рынке, в частности, представлять Национальному агентству общественного здоровья, на основании мотивированного требования, на румынском языке, всю информацию и документацию, необходимую для доказательства соответствия отдельных составляющих продукции;

11. Обязательства дистрибьюторов:

1) соблюдать требования, применяемые к косметической продукции, размещенной на рынке;

2) до предоставления косметической продукции на рынок дистрибьюторы должны проверить, что:

а) на маркировке присутствует информация, предусмотренная подпунктами 1, 5, 6 пункта 52 и пунктами 54 и 55 настоящего Регламента;

b) соблюдены требования в отношении языка, предусмотренные пунктами 56 и 57 настоящего Регламента;

с) не истек минимальный срок годности, если применимы положения пункта 52 настоящего Регламента;

3) в случае, когда считают или есть основания полагать, что:

а) косметическая продукция не соответствует требованиям, указанным в настоящем Регламенте, дистрибьюторы размещают продукцию на рынке только после приведения ее в соответствие с обязательными требованиями;

b) если косметическая продукция, которую они уже разместили на рынке, не соответствует требованиям настоящего Регламента, они должны проследить за тем, чтобы были предприняты все коррективные меры, необходимые для приведения продукции в соответствие, или изъять ее, или снять с продажи, в зависимости от ситуации;

4) в случае когда косметическая продукция представляет риск для здоровья населения, дистрибьюторы должны в течение 24 часов проинформировать ответственное лицо и Национальное агентство общественного здоровья, сообщив подробности о несоответствии продукции и о предпринятых коррективных мерах;

5) гарантировать, что пока продукция находится под их ответственностью, условия ее хранения и транспортировки не ставят под угрозу ее соответствие требованиям, установленным настоящим Регламентом;

6) взаимодействовать с Национальным агентством общественного здоровья и по требованию последнего в отношении любых действий, направленных на устранение рисков от продукции, которую они предоставили на рынок, в частности, на основании мотивированного требования Национального агентства общественного здоровья предоставлять ему всю информацию и документацию, предусмотренную настоящим Регламентом, необходимую для доказательства соответствия продукции требованиям подпункта 2, на румынском языке или языке международного общения.

12. В цепи размещения, по требованию Национального агентства общественного здоровья:

1) ответственное лицо устанавливает дистрибьюторов, которым оно поставляет косметическую продукцию;

2) дистрибьютор устанавливает ответственное лицо, от которого он закупил косметическую продукцию, а также физических и юридических лиц, которым он поставил косметическую продукцию;

3) обязательства, предусмотренные подпунктами 1) и 2) настоящего пункта должны выполняться в течение трех лет от даты предоставления в распоряжение дистрибьютора последней партии косметической продукции.

[Пкт.12 изменен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

13. При производстве косметической продукции должны соблюдаться лучшие практики организации производства для обеспечения целей пункта 1 настоящего Регламента. Соблюдение надлежащей производственной практики предполагает, что производство организовано согласно соответствующим гармонизированным стандартам, чьи ссылки опубликованы в Официальном журнале Европейского Союза, которые приняты в качестве молдавских стандартов.

14. Национальные органы не могут отказать в выпуске косметической продукции в свободное обращение, запрещать или ограничивать предоставление на рынок косметической продукции, соответствующей требованиям настоящего Регламента.

III. ОЦЕНКА БЕЗОПАСНОСТИ,

ДАННЫЕ О ПРОДУКЦИИ, УВЕДОМЛЕНИЕ

Раздел 1

Оценка безопасности

15. Для доказательства того, что косметическая продукция соответствует требованиям пункта 5 настоящего Регламента, до ее размещения на рынке ответственное лицо должно убедиться в том, что данная продукция прошла оценку безопасности, проведенную на основе необходимой информации, и что был разработан отчет об оценке ее безопасности в соответствии с приложением № 2 к настоящему Регламенту.

16. Ответственное лицо должно гарантировать, что:

1) при оценке безопасности приняты во внимание предусмотренное применение косметической продукции и планируемый способ воздействия отдельных ингредиентов, которые присутствуют в итоговом составе продукции;

2) при оценке безопасности путем анализа совокупности данных, полученных из всех существующих источников, использован соответствующий подход, основанный на доказательной ценности этих данных;

3) отчет о безопасности косметической продукции должен постоянно актуализироваться в свете дополнительной информации по теме, появляющейся после размещения продукции на рынке.

17. Министерство здравоохранения в тесном сотрудничестве со всеми заинтересованными лицами принимает руководства и рекомендации консультативного характера для предоставления возможности предприятиям, особенно малым и средним, составить доклад о безопасности косметической продукции, предусмотренный приложением № 2 к настоящему Регламенту.

18. Оценка безопасности косметической продукции, произведенной в Республике Молдова и других странах, в отсутствие отчета о безопасности косметической продукции, как установлено в приложении № 2, осуществляется учреждениями и лабораториями, аккредитованными в области согласно соответствующим гармонизированным стандартам, ссылки на которые опубликованы в Официальном журнале Европейского Союза и которые приняты в качестве молдавских стандартов.

[Пкт.18 в редакции Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024] 

18¹. Оценка безопасности косметической продукции, как установлено в пункте 18 и в приложении № 2, осуществляется лицами, обладающими дипломами или другим официальным подтверждением квалификации, выданным по окончании университетского курса теоретической и практической подготовки в области фармакологии, токсикологии, медицины или аналогичной дисциплины, либо признанного эквивалентным курса подготовки.

[Пкт.18¹ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

18². Неклинические исследования безопасности, указанные в предусмотренной в пункте 15 оценке безопасности и постоянно проводимые для оценки безопасности косметической продукции, должны соответствовать национальному законодательству о принципах надлежащей лабораторной практики, действующей на момент проведения исследования, или другим международным стандартам, признанным Европейской комиссией или Европейским агентством по химикатам эквивалентными или принятым в качестве молдавских стандартов.

[Пкт.18² введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

Раздел 2

Дело с данными о продукте

19. При размещении на рынке косметической продукции ответственное лицо осуществляет хранение дел с данными о продукте.

20. Дело с данными о продукте подлежит хранению в течение 10 лет с даты размещения на рынке последней партии косметической продукции.

21. Дело с данными о продукте должно содержать следующую информацию и данные, которые подлежат обновлению столько раз, сколько это необходимо:

1) описание косметической продукции, которое позволяет однозначно установить связь между делом с данными о продукте и рассматриваемой косметической продукцией;

2) отчет о безопасности косметической продукции, как указано в пункте 15 настоящего Регламента;

3) описание методов производства и декларацию соответствия о применении надлежащей практики организации производства, как указано в пункте 13 настоящего Регламента;

4) доказательство заявленного воздействия косметической продукции, если это оправдано характеристиками или эффектом воздействия косметической продукции;

5) данные о любых испытаниях на животных, проводимых производителем, его агентами или поставщиками на этапах разработки или оценки безопасности косметической продукции или ее ингредиентов, включая тесты на животных, проводимые в целях соблюдения законодательных или регулятивных требований третьих стран.

22. Ответственное лицо убеждается в том, что компетентному органу государства, в котором хранится дело с информацией о продукте, обеспечен легкий доступ к делу, в электронном формате или в другом формате, по адресу, указанному на этикетке.

23. Информация, фигурирующая в деле с данными о продукте, обязательно должна быть доступна на румынском языке, без исключения ее представления и на другом языке, принятом компетентными органами.

[Пкт.24 утратил силу согласно Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

Раздел 3

Отбор образцов и их анализ

25. Отбор и анализ образцов косметической продукции проводятся надежным и воспроизводимым методом в соответствии с требованиями, изложенными в приложении № 10.

[Пкт.25 в редакции Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024] 

26. В отсутствие применимого национального законодательства предполагается выполнение требований надежности и воспроизводимости, если используемый метод отвечает соответствующим гармонизированным стандартам, ссылки на которые опубликованы в Официальном журнале Европейского Союза и которые приняты в качестве молдавских стандартов.

[Пкт.26 в редакции Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024] 

27. Упомянутые методы в пункте 26 настоящего Регламента обеспечивают руководящие прицепы для производства, утверждения, тестирования косметической продукции, в соответствии с кодексом надлежащих практик производства (Good Manufacturing Practices – GMP), охватывающих аспекты производственного процесса и проверки качества в лаборатории для подтверждения критериев соответствия косметической продукции.

Раздел 4

Санитарная авторизация

(уведомление властей)

28. Перед размещением на рынке косметическая продукция подлежит санитарной авторизации путем уведомления.

[Пкт.28 в редакции Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024] 

29. В целях соблюдения процедуры санитарной авторизации, предусмотренной пунктом 28 настоящего Регламента, ответственное лицо отправляет в Национальное агентство общественного здоровья с помощью электронных средств, бланка уведомления согласно приложению № 17 следующую информацию:

1) категория косметической продукции и ее название или названия, способствующие ее индивидуализации;

2) наименование и адрес ответственного лица, которое обеспечивает свободный доступ к данным о продукции;

3) страна происхождения продукции, в случае ее импорта;

4) контактная информация физического лица, с которым можно связаться в случае необходимости;

5) наличие веществ в форме наноматериалов и:

a) их индивидуализирующие признаки, включая химическое название и другие описания, как указано в пункте 3 настоящего Регламента;

b) условия воздействия обоснованно предсказуемые;

6) наименование и номер CAS или ЕС веществ, классифицированных как канцерогенные, мутагенные или токсичные при воспроизводстве (CMR) и отнесенных к категориям 1A или 1B, в соответствии с гармонизированным Списком классификаторов и этикетирования опасных химических веществ в ЕС;

7) итоговый состав, принимаемый в расчет для оказания скорой и надлежащей медицинской помощи в тяжелых случаях.

[Пкт.29 дополнен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

29¹. Информация о косметической продукции, подлежащей уведомлению в Республике Молдова, публикуется на официальном веб-сайте Национального агентства общественного здоровья.

[Пкт.29¹ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

30. При размещении на рынке косметической продукции ответственное лицо уведомляет Национальное агентство общественного здоровья о ее фирменной маркировке и, для большей четкости, прилагает фотографию соответствующей упаковки.

31. Дистрибьютор, который предоставляет на рынок косметическую продукцию, уже размещенную на рынке другого государства, и по своей инициативе переводит любые элементы маркировки данной продукции в целях соответствия национальному законодательству, должен в электронной форме направить Национальному агентству общественного здоровья следующую информацию:

1) категорию косметической продукции, ее название в других государствах, из которых она предоставляется на рынок, и название в государстве, где она будет размещена на рынке, способствующие ее индивидуализации;

2) государство, на территории которого косметическая продукция будет размещена на рынке;

3) свое наименование и адрес;

4) наименование и адрес ответственного лица, которое обеспечит свободный доступ к делу с данными о продукте.

31¹. Если косметическая продукция была размещена на рынке до вступления в силу изменений, внесенных в настоящий Регламент, ответственное лицо с помощью электронных средств передает в Национальное агентство общественного здоровья предусмотренную в пункте 29 информацию, если не были выполнены уведомления в соответствии с пунктом 28.

[Пкт.31¹ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

32. Национальное агентство общественного здоровья предоставляет доступ к информации, в электронной форме, по требованию, всем компетентным органам власти. Данная информация может быть использована только в целях контроля и анализа рынка, оценки и информирования потребителей в контексте пунктов 69-77 настоящего Регламента.

33. Если какая-либо информация, предусмотренная пунктами 29 и 31 настоящего Регламента, изменяется, то ответственное лицо или дистрибьютор в течение 3 дней информируют Национальное агентство общественного здоровья об актуализации.

34. Информация, указанная в пунктах 29 и 30 настоящего Регламента, может быть передана и токсикологическим центрам или аналогичным структурам, которые позднее смогут ее использовать только в целях оказания медицинской помощи.

IV. ОГРАНИЧЕНИЯ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕННЫХ ВЕЩЕСТВ

Раздел 1

Ограничения для веществ, используемых

в составе косметической продукции

[Название раздела 1 главы IV в редакции Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024] 

35. Без ущерба положениям пункта 5 настоящего Регламента, косметическая продукция не должна содержать следующее:

1) запрещенные вещества (запрещенные вещества, указанные в приложении № 3 к настоящему Регламенту);

2) вещества, допускаемые к использованию с ограничениями (вещества, допускаемые к использованию с ограничениями, указанные в приложении № 4 к настоящему Регламенту);

3) красители:

а) красители, отличные от указанных в приложении № 5 к настоящему Регламенту, и красители, указанные в нем, но которые используются в соответствии с условиями, установленными в данном приложении, за исключением продукции, предназначенной для окрашивания волос, указанной в пункте 37 настоящего Регламента;

b) без ущерба положениям абзаца а) подпункта 2, подпункта 4, абзаца а) подпункта 5, вещества, указанные в приложении № 6 настоящего Регламента, не предназначенные для использования в качестве красителей и не используемые в соответствии с условиями, установленными в данном приложении;

4) консерванты:

а) другие консерванты, кроме указанных в приложении № 5 к настоящему Регламенту, и консерванты, указанные в нем, но не используемые в соответствии с условиями, установленными в данном приложении;

b) без ущерба положениям абзаца а) подпункта 2, подпункта 3 и абзаца а) подпункта 5, вещества, указанные в приложении № 6 настоящего Регламента, но не предназначенные для использования в качестве консервантов и не используемые в соответствии с условиями, установленными в данном приложении;

5) ультрафиолетовые фильтры – UV:

а) ультрафиолетовые фильтры, отличные от указанных в приложении № 7, и ультрафиолетовые фильтры, указанные в нем, но не используемые в соответствии с условиями, установленными в данном приложении;

b) без ущерба положениям подпункта 2 абзаца b) подпункта 3 и абзаца а) подпункта 4, вещества, указанные в Приложении № 7 настоящего Регламента, но не предназначенные для использования в качестве ультрафиолетовых фильтров и не используемые в соответствии с условиями, установленными в данном приложении.

36. Продукты для окрашивания волос не должны содержать другие красители, предназначенные для окрашивания волос, чем перечисленные в приложении № 5 к настоящему Регламенту, и красители, предназначенные для окрашивания волос, перечисленные, но не используемые в соответствии с условиями, изложенными в данном приложении.

37. Запрещается использовать в составе косметической продукции вещества, квалифицированные как канцерогенные, мутагенные или токсичные при воспроизводстве, в соответствии с национальным законодательством, касающимся классификации, маркировки и упаковки веществ и смесей. Однако вещества, отнесенные к категории 2, могут использоваться в составе косметических средств, если в результате оценки Национального агентства общественного здоровья они были признаны безопасными для использования в составе косметической продукции.

38. Запрещается использовать в составе косметической продукции вещества, классифицированные как канцерогенные, мутагенные или токсичные при воспроизводстве, относящиеся к категории 1A или 1B, в соответствии с национальным законодательством, касающимся классификации, маркировки и упаковки веществ и смесей. Однако в исключительных случаях такие вещества могут использоваться в составе косметической продукции в случае, если в результате их классификации в качестве канцерогенных, мутагенных или токсичных веществ при воспроизводстве, относящихся к категориям 1A и 1B, в соответствии с национальным законодательством, касающимся классификации, маркировки и упаковки веществ и смесей, выполняются все следующие условия:

1) они соответствуют требованиям безопасности пищевых продуктов, как указано в Законе № 306/2018 о безопасности пищевых продуктов;

2) не существует доступных заменяющих веществ, как показывает анализ вариантного исследования;

3) запрос осуществляется для специального использования определенной категории продукции известного воздействия; а также

4) они были апробированы и признаны безопасными Национальным агентством общественного здоровья для использования в косметической продукции, с учетом воздействия этих продуктов и принимая во внимание общее воздействие из других источников, особо учитывая социально уязвимые группы населения.

[Пкт.38 изменен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

39. Во избежание неправильного применения косметической продукции должна быть обеспечена специфическая маркировка, в соответствии с пунктом 5 настоящего Регламента, с учетом возможных рисков, связанных с наличием опасных веществ и способов воздействия.

39¹. В целях введения в действие настоящего пункта и в случае подозрений относительно безопасности продукции ввиду наличия определенных химических веществ, в том числе в целях приведения в соответствие с изменениями, внесенными в нормативную базу ЕС в области химических веществ в составе косметической продукции, Министерство здравоохранения совместно с Национальным агентством общественного здоровья представляет Правительству предложения о внесении изменений в приложения № 3–8.

[Пкт.39¹ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

39². Министерство здравоохранения совместно с Национальным агентством общественного здоровья разрабатывает и обеспечивает утверждение соответствующих руководств, позволяющих использовать гармонизированный подход для разработки и использования оценок мирового воздействия в оценке безопасного использования мутагенных, канцерогенных или токсичных веществ при воспроизводстве (CMR). Эти руководства разрабатываются на основе рекомендаций Научного комитета по безопасности потребителей (CSSC), Европейского агентства по химикатам (ECHA), Европейского органа по безопасности продуктов питания (EFSA) и других соответствующих учреждений, на основании передовых практик в области.

[Пкт.39² введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

39³. В случае если доступны критерии для установления эндокринных разрушителей, принятые на уровне Европейского Союза или согласованные на международном уровне, Министерство здравоохранения представляет Правительству предложение о внесении изменений в приложения № 3–8 в части, касающейся эндокринных разрушителей.

[Пкт.39³ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

Раздел 2

Наноматериалы

40. В отношении каждого косметического продукта, содержащего наноматериалы, должен быть обеспечен высокий уровень защиты здоровья населения.

41. Положения настоящего пункта не применяются к наноматериалам, используемым в качестве красителей, ультрафиолетовых фильтров или консервантов, регулируемых пунктом 35 настоящего Регламента, если не предусмотрено иное.

42. В дополнение к уведомлению, согласно пунктами 28 и 29 настоящего Регламента, информация о косметической продукции, содержащей наноматериалы, должна быть представлена Национальному агентству общественного здоровья ответственным лицом, в электронной форме, за шесть месяцев до ее размещения на рынке.

43. Положения пункта 42 не распространяются на косметическую продукцию, которая содержит наноматериалы и которая соответствует требованиям перечня веществ, которые не должна содержать косметическая продукция, за исключением косметической продукции, которая является предметом ограничений, установленных Правительством по предложению Министерства здравоохранения.

[Пкт.43 в редакции Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024] 

44. Информация, предоставляемая Национальному агентству общественного здоровья, должна содержать, по крайней мере, следующее:

1) индивидуализирующие признаки наноматериалов, включая химическое название (согласно International Union of Pure Applied Chemistry) и другие описания, как указано в пункте 3 настоящего Регламента;

2) характеристики наноматериалов, включая размер частиц, физические и химические свойства;

3) оценку количества наноматериалов, содержащихся в косметической продукции, предназначенной для размещения на рынке ежегодно;

4) токсикологические показатели наноматериалов;

5) данные по безопасности наноматериала, относящегося к категории косметической продукции, если он используется в такой продукции;

6) условия воздействия.

45. Ответственное лицо может письменным распоряжением назначить другое юридическое или физическое лицо для извещения о наноматериалах и проинформировать об этом Национальное агентство общественного здоровья

46. Национальное агентство общественного здоровья обеспечивает ссылки для предъявленных на рассмотрение токсикологических характеристик, которые могут заменить информацию, подлежащую уведомлению, согласно подпункту 4 пункта 44 настоящего Регламента.

47. В случае если Национальное агентство общественного здоровья имеет основания для опасения в отношении безопасности наноматериалов, он без промедления требует предоставления заключения относительно безопасности такого наноматериала для его использования в соответствующей категории косметической продукции и в условиях обоснованно предсказуемого воздействия. Национальное агентство общественного здоровья предает гласности такую информацию.

47¹. Национальное агентство общественного здоровья может инициировать процедуру, указанную в пункте 47, при наличии подозрений относительно безопасности наноматериала, например, в результате получения информации от третьего лица.

[Пкт.47¹ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

47². Министерство здравоохранения совместно с Национальным агентством общественного здоровья на основании норм Европейского Союза, основанных на результатах оценок и заключений CSSC относительно безопасности косметической продукции, получают всю информацию о наноматериалах, используемых в размещенной на рынке косметической продукции, в том числе о тех, что используются в качестве красителей, УФ-фильтров и консервантов, и периодически пересматривают положения Регламента о наноматериалах в свете научного прогресса и предлагают Правительству, в случае необходимости, внести в них соответствующие изменения.

[Пкт.47² введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

48. Непреднамеренное наличие запрещенных микроэлементов, обусловленное примесями натуральных или синтетических ингредиентов, процессом производства, хранением, перемещением их из упаковки, которое технически неизбежно при надлежащей практике производства, допустимо при условии, что это наличие соответствует пункту 5 настоящего Регламента.

V. ОПЫТЫ НАД ЖИВОТНЫМИ

49. Без ущерба общим обязательствам, вытекающим из пункта 5 настоящего Регламента, запрещается:

1) размещение на рынке косметической продукции, конечный состав которой, в соответствии с требованиями настоящего Регламента, прошел тесты на животных, с использованием другого метода, чем альтернативный, после того как такой альтернативный метод был подтвержден и принят на национальном уровне;

2) размещение на рынке косметической продукции, содержащей ингредиенты или комбинации ингредиентов, которые в целях соответствия требованиям настоящего Регламента прошли испытания на животных, с использованием метода, отличного от альтернативного, после того как такой альтернативный метод был обоснован и закреплен на национальном уровне;

3) проведение в стране тестирования на животных итоговой косметической продукции в целях соблюдения требований настоящего Регламента;

4) проведение в стране тестирования на животных ингредиентов или комбинаций ингредиентов в целях соответствия требованиям настоящего Регламента, после даты, начиная с которой такие тесты должны быть заменены на один или несколько подтвержденных альтернативных методов, перечисленных в приложении № 9 к настоящему Положению.

50. Положения пункта 49 настоящего Регламента не относятся к случаям если имеется риск причинения вреда здоровью населения, а необходимость проведения испытаний на животных обоснована и подтверждена детальным протоколом исследований, предложенным в качестве основы для оценки. Итоговые результаты включаются в ежегодный доклад Национального агентства общественного здоровья.

VI. ИНФОРМАЦИЯ ДЛЯ ПОТРЕБИТЕЛЕЙ

Раздел 1

Маркировка

51. Без ущерба другим положениям настоящего пункта косметическая продукция может быть размещена на рынке только в случае, если на ее тару и упаковку нанесена отчетливая, несмываемая, легко читаемая информация следующего содержания:

1) наименование или фирменное наименование и адрес ответственного лица. Такая информация может содержать аббревиатуры, если они дают возможность идентифицировать лицо и его адрес. Если указываются несколько адресов, то первым следует адрес, по которому ответственное лицо быстро обеспечивает доступ к делу с данными о продукте. Для импортируемой косметической продукции должна быть указана страна ее происхождения,

2) номинальное содержание на дату упаковки, выраженное в единицах массы или объема, за исключением случаев, когда масса или объем упаковки составляют менее пяти граммов или пяти миллилитров соответственно, а также в случае предоставления бесплатных образцов или наличия упаковки для одноразовой продукции, в случае расфасовки некоторого количества экземпляров продукции, обычно продаваемых в комплекте, для которых масса или объем не являются существенными, не требуется указание содержания на таре при условии, что на упаковке указано количество экземпляров. Такая информация не предоставляется, если количество экземпляров легко увидеть снаружи или продукция обычно продается по отдельности;

3) дату, до наступления которой косметическая продукция, хранение которой осуществляется с соблюдением соответствующих условий, сохраняет свое назначение и, в частности, продолжает соответствовать пункту 5 настоящего Регламента ("дата истечения минимального срока годности"):

a) сама дата или элементы на упаковке, на которых она содержится, должны предваряться символами, указанными в пункте 3 приложения № 8 настоящего Регламента, или словами "желательно использовать до";

b) дата истечения минимального срока годности должна быть указана четко и содержать месяц и год или день, месяц и год, в указанной последовательности. В случае необходимости, помимо данной информации должны быть указаны условия, при соблюдении которых гарантируется установленный срок годности;

с) указание даты истечения минимального срока годности не является обязательным для косметической продукции, минимальный срок годности которой составляет более 30 месяцев. В отношении такой продукции должно содержаться указание на период времени после вскрытия упаковки, в течение которого продукция является безопасной и может быть использована без причинения вреда потребителю. Данная информация приводится с помощью символа, за исключением случаев, когда срок годности после вскрытия упаковки не имеет значения, согласно пункту 2 Приложения № 8 настоящего Регламента, с последующим указанием периода (в месяцах и/или в годах);

4) конкретные меры предосторожности, которые должны соблюдаться при использовании, особенно указанные в приложениях № 4-7 настоящего Регламента, а также информация об особых мерах предосторожности в отношении косметической продукции, предназначенной для профессионального использования;

5) серийный номер производителя или справочную информацию, позволяющую идентифицировать косметическую продукцию. Если это невозможно в силу практических соображений вследствие слишком малого количества косметической продукции, такая информация должна содержаться только на упаковке;

6) назначение косметической продукции, если это прямо не следует из ее описания;

7) список ингредиентов. Эта информация может содержаться только на упаковке. Данный список должен предваряться словом "ингредиенты". Не признаются ингредиентами:

a) примеси, используемые в сырьевых материалах;

b) вспомогательные технологические вещества, используемые в смесях, но не присутствующие в итоговом продукте;

8) парфюмерные или ароматические композиции и сырье для них обозначаются терминами "парфюм" или "арома". Более того, наличие субстанций, указание на которые предусмотрено в столбце "другие ограничения и требования" из приложения № 4 настоящего Регламента, должно быть указано в списке ингредиентов в дополнение к терминам "парфюм" и "арома";

9) список ингредиентов должен быть составлен в порядке убывания их массы на момент добавления в косметическую продукцию. Ингредиенты, концентрация которых составляет менее 1%, могут указываться в списке в любом порядке после тех, концентрация которых превышает 1%;

10) все ингредиенты в форме наноматериалов должны быть четко указаны в списке ингредиентов. Наименования таких ингредиентов должны сопровождаться словом "нано" в скобках;

11) красители, отличные от тех, которые предназначены для окрашивания волос, могут указываться в любом порядке после иных ингредиентов. В отношении декоративной косметической продукции, имеющей несколько цветовых оттенков, могут быть указаны все используемые красители, отличные от тех, которые предназначены для окрашивания волос, путем добавления слов "могут содержать" или символов "+/-". Номенклатура CI (цветовой индекс) может использоваться в случае, если она применима.

52. В случае если по практическим соображениям информацию, предусмотренную в подпунктах 4 и 6 пункта 51 настоящего Регламента, невозможно разместить на маркировке, применяется следующее:

1) информация должна быть размещена на прилагаемых или прикрепленных к продукции брошюре, бирке, этикетке или карточке;

2) в случае, когда это непрактично, делается ссылка на информацию посредством аббревиатуры или символа, указанного в пункте 1 приложения № 8 настоящего Регламента, который наносится на тару или упаковку в отношении информации, предусмотренной подпунктом 4 пункта 52, и на упаковку в отношении информации, предусмотренной подпунктом 6 пункта 52 настоящего Регламента.

53. В случае мыла, шариков для ванн и других средств небольших размеров, если в силу практических соображений невозможно разместить информацию, предусмотренную подпунктом 6 пункта 51 настоящего Регламента, на бирке, этикетке, карточке или прилагаемой брошюре, такая информация должна содержаться на рекламном извещении, находящемся в непосредственной близости от емкости, в которой косметическая продукция выставлена на продажу.

54. Для косметической продукции, которая не расфасована, упакована в пункте продажи по просьбе покупателя или расфасована для немедленной продажи, приведение сведений, указанных в пункте 51 настоящего Регламента, осуществляется в соответствии с положениями пункта 53 настоящего Регламента.

55. Информация, предусмотренная подпунктами 2, 3, 4, 6 пункта 51 настоящего Регламента, должна быть представлена на румынском языке.

56. Информация, указанная в подпункте 5 пункта 51, должна быть сформулирована с использованием наименований общепринятых ингредиентов, представленных в классификаторе, предусмотренном в пункте 82 настоящего Регламента. При отсутствии общепринятых наименований подлежит использованию термин, содержащийся в общепринятой номенклатуре.

Раздел 2

Декларации в отношении продукта

57. При маркировке, размещении на рынке и рекламе косметической продукции не должны использоваться тексты, названия, торговые марки, рисунки и изобразительные или другие знаки, которые дают основание полагать, что данная продукция содержит не соответствующие ей характеристики или свойства.

58. Ответственное лицо может указать на упаковке продукции или любом документе, уведомлении, бирке, кольце или бандероли, сопровождающих или отсылающих к продукции, на тот факт, что такая продукция не прошла испытаний на животных только в том случае, если производитель и его поставщики не проводили или не уполномочивали кого-либо провести испытания на животных итоговой косметической продукции или ее прототипа или любого содержащегося в такой продукции ингредиента, или не использовали ингредиенты, которые испытывались на животных другими лицами с целью разработки новой косметической продукции.

Раздел 3

Доступ общественности к информации

59. Без ущерба положениям о защите, в частности, коммерческой тайны и прав интеллектуальной собственности, ответственное лицо должно убедиться в том, что при помощи любых надлежащих средств легко обеспечить доступ населения к информации о количественных и качественных показателях косметической продукции, наименованию и номеру кода состава парфюмерных и ароматических составляющих, наименованию их поставщика, а также к имеющимся данным о нежелательных или серьезных нежелательных эффектах от применения косметической продукции.

60. Информация о количественном составе косметической продукции, которая должна быть доступна населению, ограничивается опасными веществами в соответствии с Законом № 1236 от 3 июля 1997 года о режиме вредных продуктов и веществ.

VII. НАДЗОР ЗА РЫНКОМ

Раздел 1

Контроль рынка

61. Контроль косметической продукции осуществляется Национальным центром общественного здоровья согласно положениям пункта 62 настоящего Регламента в соответствии с Законом № 131/2012 о государственном контроле, Законом № 10/2009 о государственном надзоре за общественным здоровьем и Законом № 162/2023 о надзоре за рынком и соответствии продукции.

[Пкт.61 изменен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

[Пкт.61 изменен Пост.Прав. N 323 от 30.04.2024, в силу 27.07.2024]

61¹. Деятельность Национального агентства общественного здоровья по надзору за косметической продукцией представляет собой неотъемлемую часть Секторальной программы по надзору за рынком, которая предусматривает проведение контроля в отношении любой деятельности по размещению на рынке косметической продукции, осуществляемому физическими и/или юридическими лицами в области производства, импорта, распространения, хранения, реализации и рекламы указанной продукции.

[Пкт.61¹ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

61². В рамках Секторальной программы по надзору за рынком Национальное агентство общественного здоровья осуществляет следующие полномочия:

1) проводит контроль на месте в целях обнаружения риска заболевания населения, использующего косметическую продукцию;

2) отбирает пробы;

3) проводит анализ проб и проверку состава косметической продукции;

4) публикует отчеты.

[Пкт.61² введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

62. В рамках контроля, проводимого в отношении размещенной на рынке косметической продукции, Национальное агентство общественного здоровья на основании проверочных листов проверяет:

1) выполнено ли в отношении продукции уведомление в Республике Молдова;

2) соответствие процесса производства принципам практики надлежащего производства;

3) соблюдение требований к этикетированию косметической продукции и соответствие состава заявленной на этикетке информации;

4) соблюдение положений пунктов 35–39;

5) использовались ли при производстве косметической продукции вещества, классифицированные как канцерогенные, мутагенные или токсичные для репродуктивной системы, отнесенные к категории 1A или 1B, в соответствии с национальным законодательством, касающимся классификации, этикетирования и упаковки веществ и смесей;

6) условия размещения деклараций о продукции, в том числе достоверность предоставленной населению информации, а также меры предосторожности перед применением, необходимые для обеспечения безопасности косметической продукции.

[Пкт.62 в редакции Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024] 

Раздел 2

Сообщение о серьезных нежелательных эффектах продукции

63. В случае обнаружения серьезных нежелательных эффектов продукции ответственное лицо и дистрибьютор в течение 24 часов передает в Национальное агентство общественного здоровья следующую информацию:

1) обо всех серьезных нежелательных эффектах, которые им известны или которые, как предполагается, должны быть им известны;

2) о наименовании рассматриваемой косметической продукции с указанием ее отличительных особенностей;

3) о предпринятых мерах по исправлению ситуации.

64. Если ответственное лицо сообщает Национальному агентству общественного здоровья о серьезных нежелательных эффектах продукции, обнаруженных на территории Республики Молдова, Национальное агентство общественного здоровья в течение 24 часов передает информацию, указанную в пункте 63 настоящего Регламента, компетентным органам государств, которые произвели или экспортировали данную продукцию.

65. Если дистрибьютор сообщает Национальному агентству общественного здоровья о серьезных нежелательных эффектах продукции, обнаруженных на территории Республики Молдова, Национальное агентство общественного здоровья в течение 24 часов передает информацию, указанную в пункте 64 настоящего Регламента, компетентным органам государств, которые произвели или экспортировали данную продукцию.

66. Если конечный потребитель или работники здравоохранения сообщают Национальному агентству общественного здоровья о серьезных нежелательных эффектах продукции, обнаруженных на территории Республики Молдова, Национальное агентство общественного здоровья в течение 5 рабочих дней передает информацию о соответствующей косметической продукции компетентным органам государств, которые ее произвели или экспортировали.

67. Национальное агентство общественного здоровья и Агентство по защите прав потребителей могут использовать информацию, указанную в пункте 66 настоящего Регламента, в целях надзора за общественным здоровьем, анализа рынка, оценки и информирования потребителей в контексте пунктов 70-78 настоящего Регламента.

Информация о веществах

68. В случае наличия неаргументированной, с научной точки зрения, информации, подвергающей сомнению безопасность любого вещества, содержащегося в косметической продукции, компетентный орган может на основании обоснованного запроса потребовать от ответственного лица предоставить список всей косметической продукции, за которую несет ответственность и которая содержит это вещество. В списке указана концентрация этого вещества в косметической продукции.

[Пкт.68 изменен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

69. Министерство здравоохранения, Национальное агентство общественного здоровья могут использовать информацию, указанную в пункте 68 настоящего Регламента, в целях надзора за общественным здоровьем, анализа безопасности косметической продукции, оценки и информирования потребителей в контексте пунктов 70-78 настоящего Регламента.

VIII. НЕСОБЛЮДЕНИЕ СООТВЕТСТВИЯ,

УСЛОВИЕ О ГАРАНТИЯХ

Раздел 1

Несоблюдение соответствия ответственным лицом

70. Без ущерба пункту 72 настоящего Регламента Национальное агентство общественного здоровья должно требовать от ответственного лица принятия надлежащих мер, соответствующих характеру риска, включая корректированные действия по обеспечению приведения в соответствие косметической продукции, изъятие продукции с рынка или снятие ее с продаж, в течение четко определенного периода времени, соразмерного характеру риска, если допущено несоответствие с одним из следующих элементов:

1) надлежащая практика организации производства, указанная в пункте 13 настоящего Регламента;

2) оценка безопасности, указанная в пунктах 15-18 настоящего Регламента;

3) требования к делу с данными о продукте, как предусмотрено в пунктах 19-24 настоящего Регламента;

4) положения об отборе и анализе проб, указанные в пунктах 25-27 настоящего Регламента;

5) требования к извещениям, указанные в пунктах 28-34 и 40-47 настоящего Регламента;

6) ограничения по веществам, указанные в пунктах 35-39 и 48 настоящего Регламента;

7) требования к опытам на животных, указанные в пунктах 49-50 настоящего Регламента;

8) требования к маркировке, указанные в подпунктах 1, 2, 5 и 6 пункта 52 настоящего Регламента;

9) требования к декларации в отношении продукции, установленные пунктами 57 и 58 настоящего Регламента;

10) доступ населения к информации, согласно пунктам 59 и 60 настоящего Регламента;

11) сообщения о серьезных нежелательных эффектах, указанных в пунктах 63-67 настоящего Регламента;

12) требования к информации о веществах в соответствии с пунктами 68 и 69 настоящего Регламента.

[Пкт.70 изменен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

70¹. Если ответственное лицо не принимает меры по обеспечению указанного в пункте 70 соответствия, Национальное агентство общественного здоровья информирует компетентные органы государства, в котором зарегистрировано ответственное лицо, об установленных в отношении него мерах в целях их применения.

[Пкт.70¹ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

71. Ответственное лицо должно убедиться в том, что меры, указанные в пункте 70 настоящего Регламента, приняты в отношении всей продукции, размещенной на рынке.

72. В случае наличия серьезного риска здоровью населения и если Национальное агентство общественного здоровья считает, что это несоответствие не ограничивается территорией страны, в которой косметическая продукция предоставлена на рынок, он информирует соответствующие страны о мерах, которые он потребовал предпринять от ответственного лица.

73. Национальное агентство общественного здоровья предпринимает необходимые меры для запрета или ограничения предоставления косметической продукции на рынок или для изъятия продукции, или снятия ее с продаж в следующих случаях:

1) когда необходимы безотлагательные действия в случае серьезного риска для здоровья населения; или

2) когда ответственное лицо и/или дистрибьютор не предприняло все надлежащие меры в срок, указанный в подпункте 1 пункта 73 настоящего Регламента.

[Пкт.73 изменен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

73¹. В отсутствие серьезного риска для здоровья человека, если ответственное лицо не предпринимает все соответствующие меры, Национальное агентство общественного здоровья незамедлительно информирует компетентные органы государства, в котором зарегистрировано ответственное лицо, о предпринятых мерах.

[Пкт.73¹ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

73². Для целей пунктов 72 и 73 используется система обмена информацией, предусмотренная в статье 8¹ Закона № 422/2006 об общей безопасности продукции.

[Пкт.73² введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

74. В случае, когда установлено несоответствие косметической продукции требованиям, установленным в пункте 11 настоящего Регламента, Национальное агентство общественного здоровья должно потребовать от дистрибьютеров принятия всех надлежащих мер, включая коррективные действия, для обеспечения соответствия косметической продукции или изъятия продукции с рынка, или снятия ее с продаж в течение разумного срока, соотносящегося с природой рисков.

[Пкт.74 изменен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

Раздел 2

Условие о гарантиях

75. В случае соответствия продукции требованиям, перечисленным в пункте 70 настоящего Регламента, и если Национальное агентство общественного здоровья устанавливает или имеет достаточные основания считать, что косметическая продукция, размещенная на рынке, представляет или может представлять серьезный риск для здоровья населения, он предпринимает все соответствующие предварительные меры, чтобы убедиться в том, что данная продукция изъята, снята с продаж или ее доступность ограничена иным способом.

[Пкт.75 изменен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

76. В случае риска, связанного с наличием продукции, упомянутой в пункте 75 настоящего Регламента, на территории других государств, чем Республика Молдова, Национальное агентство общественного здоровья уведомляет о введенных мерах Государственную инспекцию по надзору за непищевыми продуктами и защите прав потребителей, которое является участником национального пункта договора о системе быстрого обмена информацией об опасной продукции, в соответствии с Законом № 422 -XVI от 22 декабря 2006 года об общей безопасности продукции.

[Пкт.76 изменен Пост.Прав. N 323 от 30.04.2024, в силу 27.07.2024]

77. Если меры, предусмотренные пунктом 75 настоящего Регламента, являются необоснованными, Национальное агентство общественного здоровья отменяет соответствующие меры.

Раздел 3

Надлежащая административная практика

78. Любое решение, принятое на основании пунктов 70-77 настоящего Регламента, указывает на его точные причины. Национальное агентство общественного здоровья должны без промедления известить ответственное лицо или дистрибьютора о принятом решении, а также сообщить ему о средствах правовой защиты, предоставленных ему законодательством, и о периоде времени, в течение которого они могут оспорить данное решение.

[Пкт.78 изменен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

79. За исключением случаев, когда по причине серьезного риска для здоровья населения необходимы безотлагательные действия, ответственному лицу предоставляется возможность до вынесения решения высказать свою точку зрения.

80. Положения пунктов 78 и 79 настоящего Регламента, применяются в отношении дистрибьютора при принятии любых решений в соответствии с пунктами 74-77 настоящего Регламента.

80¹. Министерство здравоохранения сотрудничает с национальными органами и Европейской комиссией для обеспечения соответствующего соблюдения настоящего Регламента. Для этих целей вовлеченные стороны осуществляют взаимный обмен всей информацией, необходимой для единообразного применения его положений.

[Пкт.80¹ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

80². Национальное агентство общественного здоровья обращается к компетентным органам других государств, у которых имеется пакет документов, содержащий информацию о продукции, с обоснованным запросом о проверке, отвечает ли данный пакет документов требованиям, предусмотренным в пунктах 28 и 29, и содержатся ли в данной информации сведения, подтверждающие безопасность косметической продукции.

[Пкт.80² введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

80³. Положения пунктов 15, 19–23 применяются также к косметической продукции, на которую выдано санитарное заключение до вступления в силу изменений, внесенных в настоящий Регламент.

[Пкт.80³ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

IX. ЗАКЛЮЧИТЕЛЬНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ

81. Национальное агентство общественного здоровья руководствуется в деятельности по регулированию косметической продукции Международной номенклатурой косметических ингредиентов (INCI), разработанной Европейской Комиссией.

82. В этих целях Национальное агентство общественного здоровья принимает во внимание признанные международные номенклатуры, в том числе Классификатор, общих названий ингредиентов. Последний не представляет собой список веществ, разрешенных к применению в составе косметической продукции.

83. Общее название ингредиента должно применяться в целях маркировки косметической продукции, размещенной на рынке максимум в последние двенадцать месяцев после публикации Классификатора.

83¹. Национальное агентство общественного здоровья является компетентным органом с функцией надзора за рынком косметической продукции, в том числе оценки безопасности косметической продукции.

[Пкт.83¹ введен Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

84. Юридические и физические лица несут ответственность за несоблюдение настоящего Регламента в соответствии с частями (1) и (3) статьи 80 и статьи 84 Кодекса о правонарушениях Республики Молдова № 218-XVI от 24 октября 2008 года.

Приложение № 1

к Санитарному регламенту

о косметической продукции

СПИСОК

категорий косметической продукции

Кремы, эмульсии, лосьоны, гели и масла для кожи

Маски для лица

Тональные основы (жидкости, пасты, порошки)

Порошки для макияжа, порошки после ванны, гигиенические порошки

Туалетное мыло, дезодорирующее мыло

Духи, туалетная вода, одеколон

Средства для ванны и душа (соли, пены, масла, гели и т.д.)

Средства для депиляции

Дезодоранты и антиперспиранты

Красители для волос, продукты для завивки, выпрямления и фиксации волос, укладки волос, очищающие продукты для волос (лосьоны, порошки, шампуни), кондиционирующие продукты для волос/бальзамы для волос (лосьоны, кремы, масла), парикмахерские продукты (лосьоны, лаки, бриллиантины)

Средства для бритья (кремы, пенки, лосьоны)

Средства для макияжа и очищающие продукты

Продукты, предназначенные для нанесения на губы

Средства для гигиены полости рта

Продукты для ухода за ногтями

Продукты для внешней интимной гигиены

Средства для загара

Средства для искусственного загара

Средства для отбеливания кожи

Средства от морщин

Приложение № 2

к Санитарному регламенту

о косметической продукции

ОТЧЕТ

о безопасности косметической продукции

Отчет о безопасности косметической продукции должен, как минимум, содержать следующее:

I. ИНФОРМАЦИЯ О БЕЗОПАСНОСТИ

КОСМЕТИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ

1. Качественные и количественные показатели косметической продукции, включая химические признаки веществ (включая химическое название, номер CAS, номер в Международной номенклатуре косметических ингредиентов и в Европейском перечне существующих коммерческих химических соединений/Европейском списке нотифицированных химических веществ EINECS/ILINCS, если возможно) и их предназначение. В случае парфюмерных и ароматических составляющих указываются наименование и номер кода состава и наименование поставщика.

2. Физические/химические характеристики и устойчивость косметической продукции:

1) физические и химические характеристики веществ или смесей, а также косметической продукции;

2) устойчивость косметической продукции при нормально предсказуемых условиях хранения.

3. Микробиологические свойства:

1) микробиологические характеристики веществ или смесей и косметической продукции в целом. Особое внимание должно уделяться косметике, используемой вокруг глаз, слизистой оболочки в целом, на поврежденной коже, косметике для детей до трех лет, пожилых людей и лиц с нарушенной иммунной реакцией;

2) результаты теста на консервацию.

4. Примеси, микроэлементы, информация об упаковочном материале:

1) чистота веществ и смесей;

2) в случае наличия запрещенных микроэлементов, доказательства их технической неизбежности;

3) основные характеристики упаковочного материала, в частности, чистота и устойчивость последнего.

5. Нормальное и обоснованно предвиденное использование:

1) нормальное и обоснованно предвиденное использование продукции;

2) доводы должны быть обоснованными, особенно в свете предупреждений и других пояснений, указанных на маркировке продукции.

6. Воздействие косметической продукции:

1) данные о воздействии косметической продукции, принимаемые во внимание результаты, согласно пункту 5 настоящего Регламента, в отношении:

a) области или областей применения;

b) площади или площадей поверхности применения;

c) количества применяемой продукции;

d) длительности и частот использования;

e) нормального(ых) или оправданно предвиденного(ых) способа(ов) воздействия;

f) населения или целевых групп населения (или групп воздействия) принимается во внимание потенциальное воздействие на специфическую группу населения;

2) при определении характера воздействия также должны учитываться возможные токсикологические эффекты (например, возможно необходимо рассчитать эффект воздействия исходя из единицы поверхности кожи и единицы веса тела). Также должна учитываться возможность подобного воздействия в результате прямого применения (например, непроизвольное вдыхание спреев, непроизвольный прием внутрь продукции для ухода за губами и т.д.);

3) особое внимание должно уделяться возможному воздействию в зависимости от размера частиц.

7. Данные о воздействии веществ, содержащихся в косметической продукции, для соответствующих токсикологических характеристик, с учетом информации, указанной в пункте 6 настоящего Регламента.

8. Токсикологический порфиль веществ:

1) токсикологический порфиль косметической продукции по всем токсикологическим характеристикам без ущерба главе V настоящего Регламента. Оценка локальной токсичности (раздражение кожи, глаз), чувствительность кожи и в случае поглощения ультрафиолета должна быть оценена фотоиндуцированная токсичность;

2) должны быть рассмотрены все известные токсикологические способы поглощения, а также оценены системные эффекты и предел безопасности (MoS), основанный на уровне, не вызывающем видимых нежелательных явлений (NOAEL). Отсутствие этих факторов должно быть обосновано;

3) особое внимание следует уделить возможному воздействию на токсикологический профиль, возникшему в результате:

- размера частиц, включая наноматериалы;

- примесей в веществах и используемом сырье;

- взаимодействия веществ;

4) любая перекрестная ссылка должна быть надлежащим образом обоснована и подтверждена;

5) источник информации должен быть четко определен.

9. Нежелательные эффекты и серьезные нежелательные эффекты:

1) все полные данные о нежелательных и серьезных нежелательных эффектах косметической продукции или, в соответствующих случаях, другой косметической продукции;

2) эти сведения содержат статистические данные.

10. Информация о косметической продукции: другая значимая информация, например, существующие исследования, проведенные волонтерами или надлежащим образом подтвержденные и обоснованные результаты оценок риска, реализованные в других подобных отраслях.

II. ОЦЕНКА БЕЗОПАСНОСТИ КОСМЕТИЧЕСКОЙ

ПРОДУКЦИИ

1. Выводы оценки: декларация о безопасности косметической продукции в соответствии с пунктом 5 настоящего Регламента.

2. Предупреждения и инструкции по применению на маркировке:

декларация о необходимости указания на маркировке конкретных предостережений и инструкций по применению в соответствии с подпунктом 4) пункта 51 настоящего Регламента.

3. Обоснование:

1) представление научного обоснования, приведшего в выводам оценки, указанной в разделе I и в декларации, разработанной в соответствии с требованиями, предусмотренными пунктом 2 настоящего Регламента. Данное объяснение должно опираться на описание, указанное в главе III настоящего Регламента. В соответствующих случаях пределы безопасности должны быть оценены и обсуждены;

2) кроме того, необходимо провести специфическую оценку косметической продукции, предназначенной детям до трех лет, и исключительно для использования в интимной гигиене наружного применения;

3) необходимо оценивать возможные взаимосвязи веществ, содержащихся в косметической продукции;

4) необходимо должным образом обосновать принятие во внимание или игнорирование различных токсикологических профилей;

5) необходимо должным образом рассмотреть влияние устойчивости на безопасность косметической продукции.

4. Сведения о профессиональной квалификации эксперта по оценке и утверждение данных, указанных в главе II настоящего Отчета:

1) наименование и адрес ответственного лица по оценке безопасности;

2) доказательства квалификации ответственного лица по оценке безопасности;

3) дата и подпись ответственного лица по оценке безопасности.

Приложение № 3

к Санитарному регламенту о косметической продукции

ПЕРЕЧЕНЬ

веществ, запрещенных к использованию в косметической продукции

[Приложение N 3 в редакции Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

Приложение № 4

к Санитарному регламенту о косметической продукции

ПЕРЕЧЕНЬ

веществ, запрещенных к использованию в косметической продукции, за

исключением тех, которые являются предметом установленных ограничений

[Приложение N 4 в редакции Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

Приложение № 5

к Санитарному регламенту о косметической продукции

ПЕРЕЧЕНЬ

красителей, разрешенных к использованию в косметической продукции

[Приложение N 5 в редакции Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

Приложение № 6

к Санитарному регламенту о косметической продукции

ПЕРЕЧЕНЬ

консервантов, разрешенных к использованию в косметической продукции

[Приложение N 6 в редакции Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

Приложение № 7

к Санитарному регламенту о косметической продукции

ПЕРЕЧЕНЬ

УФ-фильтров, разрешенных к использованию в косметической продукции

[Приложение N 7 в редакции Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]

Приложение № 8

к санитарному Регламенту

о косметической продукции

Символы, используемые на упаковке/реципиенте

1.Ссылка на информацию, включенную или прикрепленную к косметическому продукту

2. Срок использования после вскрытия упаковки

3. Дата минимального срока годности

Приложение № 9

к Санитарному Регламенту

о косметических продуктах

СПИСОК

утвержденных альтернативных методов для замены тестов на животных

В данном приложении перечислены существующие альтернативные методы, утвержденные Европейским центром по валидации альтернативных методов Объединенного исследовательского центра, отвечающие требованиям настоящего Регламента, которые не перечислены в Регламенте Комиссии (ЕК) № 440/2008 от 30 мая 2008 года, устанавливающем методы испытаний в соответствии с Регламентом № 1907/2006 Европейского Парламента и Совета относительно регистрации, оценки, разрешения и ограничения химических веществ (REACH). Поскольку возможно, что тестирование на животных не сможет быть заменено полностью альтернативными методами, следует указать в данном приложении, если альтернативный метод полностью или частично заменяет метод тестирования на животных.

Приложение № 10

к Санитарному Регламенту

о косметической продукции

МЕТОДЫ АНАЛИЗА,

необходимые для проверки состава косметической продукции (I)

Mетоды анализа, необходимые для проверки состава косметической продукции (I) (в дальнейшем – Методы) приведены полностью в соответствии с положениями Директивы 80/1335/CEЕ Комиссии от 22 декабря 1980 года о сближении законодательств государств-членов, относительно методов анализа, необходимых для контроля состава косметической продукции, опубликованной в Официальном журнале Европейского Сообщества (JOCE) № L 383 п.27 от 31 декабря 1980 г., с изменениями, внесенными Директивой 87/143/CEЕ Комиссии от 10 февраля 1987 г., опубликованной в Официальном журнале Европейского Сообщества (JOCE) № L 57 р.56 от 27 февраля 1987 г.

I. ОПРЕДЕЛЕНИЯ

1.1. В целях настоящего Регламента используются следующие определения:

элементарная проба – отобранная единица из одной партии, предложенной для продажи;

общая проба – сумма всех отобранных элементарных проб из одной партии;

лабораторная проба – репрезентативная фракция из общей выборки, которая должна быть проанализирована в лабораториях;

анализируемая лабораторная часть – репрезентативная часть лабораторной пробы, которая необходима для проведения одного анализа;

реципиент – изделие, которое содержит продукт и находится в продолжительном прямом контакте с ним;

аэрозольный распылитель – сборка многоразовых упаковок из металла, стекла или пластмассы, содержащих сжатый газ, сжиженный или растворенный под давлением, с/или без жидкости, пасты или порошка, снабженных устройством для отбора проб, которое позволяет отбор содержимого в виде твердых или жидких частиц в суспензии в виде газовой пены, пасты или порошка или в жидкой форме;

реципиент – упаковка, которая содержит продукт и находится в постоянном прямом и продолжительном контакте с ним;

вещество – химический элемент и/или его соединения в естественном состоянии или полученный в процессе производства, в том числе с использованием любых добавок для сохранения стабильности продуктов, и любая примесь, полученная в процессе производства, за исключением любых растворителей, которые могут отделяться без воздействия на стабильность вещества и/или изменения его состава;

смесь – смесь или соединенный раствор, образованный из двух или более веществ.

II . ТРЕБОВАНИЯ К ОТБОРУ ПРОБ

И ИХ ИДЕНТИФИКАЦИИ

2.1. Отбор проб осуществляется лицом, обученным и уполномоченным компетентным органом.

2.2. Пробы отбираются отдельно из каждой исследуемой партии или подпартии.

2.3. Пробы косметической продукции отбираются произвольно в их оригинальной упаковке и отправляются в запечатанном виде для исследований в аккредитованные лаборатории.

2.4. Для косметических продуктов, которые продаются в розницу или оптом в упаковках, отличных от оригинального производителя, должны быть соответствующие инструкции для отбора проб в месте использования или продажи.

2.5. Во время отбора и подготовки проб, должны быть приняты меры по предотвращению обмена проб, в целях предостережения влияния на результаты проверки аналитического определения, которые сделали бы пробу непригодной в исследуемой партии.

2.6. Количество элементарных проб, необходимых для подготовки лабораторных проб, определяется аналитическим методом и количеством анализов, выполненных каждой лабораторией.

2.7. Пробы пломбируются на месте отбора и идентифицируются в соответствии с действующими правилами.

2.8. Каждая отобранная элементарная проба должна маркироваться и содержать следующую информацию:

- название косметического продукта;

- дату, время и место отбора пробы;

- фамилию лица, ответственного за отбор пробы;

- фамилию инспектора, наименование инспекции.

2.9. Оформляется акт отбора проб в соответствии с действующими правилами.

2.10. Элементарные пробы должны храниться в соответствии с условиями, указанными в инструкциях производителя, если таковые имеются.

2.11. Только в случаях, когда не указаны другие условия, лабораторные образцы хранятся в темных помещениях при температуре от 10 до 25 ° С.

2.12. Основные образцы не должны открываться до тех пор, пока не начнется анализ.

III. ПОДГОТОВКА ЛАБОРАТОРНОЙ ПРОБЫ К ИСПЫТАНИЯМ

1. ОСНОВНЫЕ ОСОБЕННОСТИ

1.1. Если есть возможность, необходимо проводить анализ каждой элементарной пробы. Если элементарная проба слишком маленькая, должны использоваться минимальные количества элементарных проб. Они должны быть тщательно смешаны до отбора общей пробы.

1.2. Открыть упаковку в атмосфере инертного газа, если это указано в аналитическом методе, и отобрать количество общих проб как можно быстрее. Анализ должен проводиться с минимальным опозданием. Если пробу необходимо сохранить упаковку следует повторно опечатать в атмосфере инертного газа.

1.3. Косметические средства могут быть получены в жидкой, твердой или в полутвердой форме. Если происходит разделение первоначально однородного продукта, он должен быть повторно гомогенизирован до отбора анализируемой пробы.

1.4. В случае, когда косметический продукт размещен на рынке в особой специальной форме, которая не позволяет его тестирование в соответствии с данной инструкцией и если не предусмотрен соответствующий метод обследования, может быть проведена оригинальная процедура при условии, что она будет изложена в письменном виде в отчете лабораторных исследований.

2. ЖИДКОСТИ

2.1. Могут быть в виде продуктов, таких как маслянистые, спиртовые и водные растворы: туалетная вода, лосьоны или молочко и могут быть упакованы во флаконы, бутылки, ампулы или тюбики.

2.2. Отбор части пробы для анализа:

– встряхнуть хорошо упаковку перед открытием;

– открыть контейнер (упаковку);

– налить несколько миллилитров жидкости в пробирку для визуального осмотра ее характеристик с целью отбора анализируемой пробы;

– запечатать контейнер;

– отобрать необходимое количество для выполнения анализа;

– тщательно вновь запечатать.

3. ПОЛУТВЕРДЫЕ ПРОДУКТЫ

3.1. Могут быть в виде продуктов, таких как пасты, кремы, плотные эмульсии и гели, и упакованы в тюбики, пластиковые бутылки или банки.

3.2. Отбор пробы для анализа в случае:

3.2.1) реципиента с узким горлом. Удалить, по меньшей мере, первый сантиметр продукта, выдавить пробу для анализа и немедленно запечатать реципиент;

3.2.2) реципиента с широким горлом. Равномерно очистить поверхность для удаления верхнего слоя продукта, отобрать пробу для анализа и немедленно запечатать реципиент.

4. ТВЕРДЫЕ ПРОДУКТЫ

4.1. Могут быть в виде продуктов, таких как порошки, компактная пудра или батоны, и могут быть упакованы в самые разнообразные упаковки.

4.2. Отбор пробы для анализа в случае:

4.2.1. рассыпчатой пудры – энергично встряхнуть, прежде чем открыть крышку. Открыть и отобрать пробу;

4.2.2) компактной пудры или батона – снять поверхностный слой равномерным соскобом и отобрать пробу с поверхности продукта.

5. ПРОДУКТЫ В ГЕРМЕТИЧНЫХ УПАКОВКАХ (аэрозольные распылители)

5.1. После энергичного встряхивания взять определенное количество содержимого аэрозольного распылителя, перенести с помощью соединительного устройства (рис.1), в отдельных случаях аналитический метод может потребовать использования других соединителей для стеклянной посуды с пластиковым покрытием (рис.4) с предусмотренным аэрозольным клапаном, но не оборудованным иммерсионной трубкой. Во время отбора клапан посуды должен быть направлен вниз, что делает содержимое ясным, видимым, соответствующим одному из следующих четырех случаев:

5.1.1) аэрозольный продукт в виде однородного раствора для непосредственного анализа;

5.1.2) аэрозольный продукт, состоящий из двух жидких фаз. Каждая фаза может быть проанализирована, после чего нижняя фаза будет отделена и переведена в другую стеклянную посуду. В этом случае первая стеклянная посуда придерживается клапаном вниз, а нижняя фаза обычно жидкая и лишена пропеллента (например, формула бутан/вода);

5.1.3) аэрозольный продукт, содержащий порошок в суспензии. Жидкая фаза может быть проанализирована после удаления порошка;

5.1.4) продукт в виде пены или крема. Сначала в стеклянной посуде для перевода взвешивается точное количество 5 – 10 г 2-метоксиэтанола. Это вещество предотвращает образование пены в процессе дегазации, после чего возможно удаление пропульсивного газа без потери жидкости.

5.2. Вспомогательные устройства:

Устройство для подключения (рис. 1) изготовлено из дюралюминия или латуни. Оно спроектировано таким образом, чтобы с помощью полиэтиленового адаптера подходило к различным системам с клапанами. Оно приводится в качестве примера: можно использовать и другие разъемы (рис. 2 и 3).

Стеклянная посуда для перевода пробы (рис.4) изготовлена из белого стекла с внешним защитным покрытием из прозрачной пластмассы, объемом от 50 до 100 мл. На стеклянной посуде предусмотрен кран для аэрозолей без иммерсионной трубки.

5.3. Метод

Для того, чтобы перевести достаточное количество пробы, стеклянная посуда должна быть освобождена от воздуха. Чтобы достичь этого, через устройство для подключения вводится около 10 мл дихлордифторметана или бутана (в зависимости от аэрозольного продукта), а потом дегазируется полностью до исчезновения жидкой фазы, удерживая посуду клапаном вверх. Снять разъем устройства для подключения. Взвесить посуду для перевода ("a" граммов). Встряхнуть аэрозольный распылитель, из которого должна быть отобрана проба для анализа. Подключить разъем к клапану реципиента с аэрозолем, из которого будет отобрана проба (клапан направлен вверх), подключить посуду для перевода (с горлышком, направленным вниз) к разъему и нажать. Наполнить посуду для перевода приблизительно две трети от объема. Если передача прекращается преждевременно из-за выравнивания давления, она может быть возобновлена путем охлаждения стеклянной посуды. Устройство для подключения отодвигается, взвешивается заполненная посуда ("b" граммов) и определяется вес аэрозольной пробы, m₁ (m = b – a).

Полученная таким образом проба может быть использована:

1) для обычного химического анализа;

2) для анализа летучих компонентов методом газовой хроматографии.

5.3.1. Химический анализ

Держа стеклянную мерную посуду для перевода краном вверх, действуют следующим образом:

– продукт подвергается дегазации. Если операция по дегазации приводит к вспениванию, то следует использовать стеклянную мерную посуду для перевода, в которую ранее было введено точно взвешенное количество (5-10 г) 2-метоксиэтанола с помощью шприца через разъем;

– завершить удаление без потери летучих компонентов путем встряхивания в водяной бане, при температуре 40°С, отключить разъем.

– повторно взвесить стеклянную посуду для перевода ("с" граммы) для определения веса остатка, m₂ (m₂ = с ─ а);

(Примечание. При расчете массы остатка, вычесть вес используемого 2-метоксиэтанола);

– открыть стеклянную мерную посуду для перевода путем снятия клапана,

– полностью растворить осадок в известном количестве соответствующего растворителя;

– выполнить желаемое определение в части аликвоты.

Формулы для расчета:

где:

m₁ – масса аэрозоля, в посуде для перевода;

m₂ – масса остатка после нагревания при 40 °С;

r – процент конкретного вещества в m₂ (определяется соответствующим методом);

R – процент первоначального вещества в аэрозоле,

Q – общая масса данного вещества в аэрозольной упаковке;

Р – масса нетто первоначальной аэрозольной упаковки.

5.3.2. Анализ летучих компонентов с помощью газовой хроматографии

5.3.2.1. Принцип

Используя шприц для газовой хроматографии, взять соответствующее количество из мерной колбы. Затем ввести содержимое шприца в газовый хроматограф.

5.3.2.2. Вспомогательное устройство

Точный шприц для газовой хроматографии 25 µl или 50 µl (рис. 5), серии А2. Этот шприц снабжен золотником в конце иглы. Шприц подключен к посуде для перевода с помощью соединителя из полиэтиленовой трубки (длиной 8 мм, внутренний диаметр 2,5 мм).

5.3.2.3. Метод

После того как соответствующее количество аэрозольного продукта было переведено в посуду, установить для перевода коническую крышку шприца, подсоединенного к мерной колбе, как описано в 5.4.2.2. Открыть клапан и сделать аспирацию соответствующего количества жидкости. Устранить газовые пузырьки, приведя в действие несколько раз поршень (охладить шприц, если это необходимо). Закрыть клапан, когда шприц содержит соответствующее количество жидкости, свободной от пузырьков, и отсоединить шприц от мерной колбы. Установить иглу, вставить шприц в инжектор газового хроматографа, открыть клапан и ввести раствор.

5.3.2.4. Внутренний стандарт

Если необходим внутренний стандарт, то его вводят в мерную колбу (с помощью обычного стеклянного шприца с соединителем).

Рис. 1. Коннектор P1

Рис. 2. Коннектор M₂ для соединения кранов с внешней и внутренней резьбой

Рис. 3. Коннектор M₁ для соединения кранов с внешней резьбой

 Объем от 50 до 100 ml

IV. ОПРЕДЕЛЕНИЕ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ГИДРОКСИДА

КАЛИЯ И НАТРИЯ В СВОБОДНОЙ ФОРМЕ

1. ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Данный метод определяет процедуру выявления косметических продуктов, содержащих значительное количество свободного гидроксида натрия и/или калия, и определение таких же гидроксидов натрия и/или калия в свободной форме в препаратах для укрепления волос и препаратах для растворения ногтевых кутикул.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Свободный гидроксид натрия и калия определяется объемом стандартной кислоты, необходимой для нейтрализации продукта при специфических условиях, результатное количество выражается в % m/m свободного гидроксида натрия.

3. ПРИНЦИП

Пробу растворить или диспергировать в воде и титровать стандартной кислотой. Значение рН зарегистрировать одновременно с добавлением кислоты: для обычного раствора гидроксида натрия или калия конечной точкой титрования является видимое максимальное снижение зарегистрированных изменений значения рН.

Кривая титрования может быть скрыта в присутствии:

1) аммиака и других слабых органических щелочей, которые сами по себе имеют довольно плоскую кривую титрования. В этом методе аммиак удаляется выпариванием при низком давлении, но при комнатной температуре;

2) соли слабых кислот, которые могут привести к кривой титрования с несколькими точками перегиба. В таких случаях только первая часть кривой до первой из этих точек перегиба соответствует нейтрализации иона гидроксила, происходящего из свободного гидроксида натрия или калия.

В случаях с значительными помехами из-за слабых неорганических кислот показан альтернативный метод титрования в спирте.

Хотя есть теоретическая возможность присутствия других сильных растворимых щелочей, например гидроксида лития, гидроксида четвертичного аммония, которые могут генерировать повышенные уровни рН, присутствие их в этом типе косметического продукта маловероятно.

4. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

4.1. Реагенты

4.1.1. Стандартный щелочной буферный раствор рН 9,18 при 25°С: декагидрата тетрабората натрия 0,05 М.

4.2. Аппаратура

4.2.1. Обычная лабораторная посуда.

4.2.2. Измеритель pH.

4.2.3. Стеклянный электрод с мембраной.

4.2.4. Стандартный каломельный электрод, электрод сравнения.

4.3. Процедура

Калибровать рН-метр электродами с использованием стандартного буферного раствора.

Получить раствор или 10% водную дисперсию продукта, который в дальнейшем следует анализировать и профильтровать. Измерить рН. Если рН 12 и выше, необходимо количественное определение.

5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

5.1. Титрование в водной среде

5.1.1. Реагент

5.1.1.1. Стандарт 0,1М соляной кислоты.

5.1.2. Аппаратура

5.1.2.1. Обычная лабораторная посуда.

5.1.2.2. рН-метр, предпочтительно с рекордером.

5.1.2.3. Электрод со стеклянной мембраной.

5.1.2.4. Стандартный каломельный электрод.

5.1.3. Процедура

В стакане с обьемом 150мл взвесить пробу с точностью между 0,5г и 1,0г Если присутствует аммиак, добавить несколько гранул анти-шока, помещая стакан в вакуумный эксикатор, эвакуировать с помощью водяного насоса, пока запах аммиака больше не обнаруживается (около трех часов). Добавить 100 мл воды, растворить или диспергировать остаток и титровать раствором 0,1 М соляной кислоты (5.1.2.1), записывая изменения рН (5.1.2.2).

5.1.4. Расчет

Определить точки перегиба на кривой титрования. Если первая точка перегиба появляется при рН ниже 7, проба не содержит гидроксида натрия или калия.

В случаях, когда появляются две или более точки перегиба на кривой, только тогда первая точка является показателем.

Обозначить объем титранта, соответствующий первой точке перегиба.

где: V – объем титранта, в миллилитрах;

M – масса тестируемой пробы, в граммах.

Содержание гидроксида натрия и/или калия в пробе, которое выражается как % m/m гидроксида натрия, рассчитать по формуле:

Может возникнуть такая ситуация, в которой несмотря на присутствие значительного количества гидроксидов натрия и/ или калия, кривая титрования не будет показывать видимую точку перегиба. В таком случае определение следует повторить с изопропанолом.

5.2. Титрование в изопропаноле

5.2.1. Реагенты

5.2.1.1. Изопропанол

5.2.1.2. Стандартный водный раствор соляной кислоты 1,0М

5.2.1.3. Соляная кислота 0,1М в изопропаноле, изготовленная непосредственно перед использованием путем разбавления соляной кислоты 1,0М в изопропаноле.

5.2.2. Аппаратура

5.2.2.1. Обычная лабораторная посуда.

5.2.2.2. рН-метр, предпочтительно с рекордером.

5.2.2.3. Электрод со стеклянной мембраной.

5.2.2.4. Стандартный каломельный электрод, электрод сравнения.

5.2.3. Процедура

В стакане объемом 150 мл взвесить анализируемый продукт с точностью между 0,5 г и 1,0 г. Если присутствует аммиак, добавить несколько гранул антишока, помещая стакан в вакуумный эксикатор, и удалить с помощью водяного насоса, пока запах аммиака больше не обнаруживается (около трех часов). Добавить 100 мл изопропанола, растворить или диспергировать остаток и титровать соляной кислотой 0,1 М в изопропаноле (5.2.1.3), с записью изменения видимого рН (5.2.2.2).

5.2.4. Расчет

Как и в пункте 5.1.4., первая точка перегиба появляется при рН около 9.

5.3. Повторяемость (¹)

При содержании гидроксида натрия или калия в диапазоне 5% m/m разница между результатами двух измерений, выполненными параллельно с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютное значение 0,25%.

V. ОПРЕДЕЛЕНИЕ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ И

ЕЕ ЩЕЛОЧНЫХ СОЛЕЙ В ТОВАРАХ ПО УХОДУ ЗА ВОЛОСАМИ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Описанный ниже метод предназначен для определения и идентификации щавелевой кислоты и ее щелочных солей в товарах по уходу за волосами. Он может быть использован для бесцветных водно/спиртовых растворов и лосьонов, которые содержат около 5% щавелевой кислоты или эквивалентное количество щелочного оксалата.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание щавелевой кислоты и/или ее щелочных солей, определенное этим методом, выражается в процентах массы (m/m) свободной щавелевой кислоты в пробе.

3. ПРИНЦИП

После удаления любого присутствующего анионного поверхностно-активного вещества с р-толуидиндигидрохлоридом щавелевая кислота и/или оксалаты осаждаются в виде оксалата кальция, после чего раствор фильтруется. Осадок растворить в серной кислоте и титрировать перманганатом калия.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. 5% (m/m) раствора ацетата аммония.

4.2. 10% (m/m) раствора хлорида кальция.

4.3. 95% (m/m) этанола.

4.4. Четыреххлористый углерод.

4.5. Диэтиловый эфир.

4.6. 6 ,8% раствор (m/m) дигидрохлорида р-толуидина.

4.7. Раствор перманганата калия, 0,1М.

4.8. 20% (m/m) серной кислоты.

4.9. 10% (m/m) соляной кислоты.

4.10. Ацетат натрия тригидрат.

4.11. Ледяная уксусная кислота.

4.12. Серная кислота (1:1).

4.13. Насыщенный раствор гидроксида бария.

5. УСТРОЙСТВО (АППАРАТУРА)

5.1. Делительные воронки, 500 мл.

5.2. Лабораторные стаканы, 50 мл и 600 мл.

5.3. Стеклянные тигли, тип G-4.

5.4. Мерные цилиндры, 25 мл и 100 мл.

5.5. Пипетки, 10 мл.

5.6. Всасывающие колбы, 500 мл.

5.7. Водоструйный насос.

5.8. Термометр от 0 до 100°С.

5.9. Магнитная мешалка с нагревательным элементом.

5.10. Магнитные перемешивающие стержни, с тефлоновым покрытием.

5.11. Бюретки, 25 мл.

5.12. Конические колбы, 250 мл.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Взвесить 6 – 7 г пробы в 50 мл стакане, довести рН до 3 с помощью разбавления с соляной кислотой (4.9) и промыть в делительной воронке со 100 мл дистиллированной воды. Добавить последовательно 25 мл этанола (4.3), 25 мл раствора дигидрохлорида р-толуидина (4.6) и 25-30 мл четыреххлористого углерода (4.4) и встряхнуть энергично смесь.

6.2. После разделения фаз удалить нижнюю (органическую) фазу и повторить экстракцию, используя реагенты, указанные в 6.1, и снова удалить органическую фазу.

6.3. Промыть водный раствор в 600 мл стакане и путем кипячения раствора удалить присутствие четыреххлористого углерода.

6.4. Добавить 50 мл раствора ацетата аммония (4.1), довести раствор до кипения (5.9) и в кипящем растворе перемешать 10 мл горячего раствора хлорида кальция (4.2); оставить для осаждения.

6.5. Проверить, если осаждение завершено, добавив несколько капель раствора хлорида кальция (4.2), дать остыть до комнатной температуры, а затем размешать с 200 мл этанола (4.3); (5.10) и оставить на 30 минут.

6.6. Профильтровать жидкость через стеклянный фильтр (5.3), с небольшим количеством горячей воды (50- 60°С), перевести осадок в фильтрующий тигель и промыть осадок холодной водой.

6.7. Промыть осадок пять раз с небольшим количеством этанола (4.3), а затем пять раз с небольшим количеством диэтилового эфира (4.5) и растворить осадок в 50 мл горячей серной кислоты (4.8), путем перевода через фильтрующий тигель при пониженном давлении.

6.8. Перенести раствор без потери в коническую колбу и титровать раствором перманганата калия (4.7) до появления светло-розовой окраски.

7. РАСЧЕТ

Содержание щавелевой кислоты в пробе, выраженное в процентах по массе, рассчитывается по формуле:

где:

А – количество перманганата калия 0,7 М, измеренное в соответствии с пунктом 6.8 настоящего приложения;

Е – количество анализируемой пробы в граммах (6.1);

4,50179 – коэффициент преобразования щавелевой кислоты.

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ (¹)

При содержании щавелевой кислоты около 5% разница между результатами двух измерений одной и той же пробы, параллельно выполненных, не должна превышать абсолютного значения 0,15%.

9. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

9.1. Принцип

Щавелевая кислота и/или оксалаты осаждаются в виде оксалата кальция и растворяются в серной кислоте. К раствору добавить небольшое количество раствора перманганата калия, который меняет цвет и приводит к образованию диоксида углерода. Если полученный диоксид углерода пропустить через раствор гидроксида бария, образуется белый молочный осадок карбоната бария.

9.2. Процедура

9.2.1. Провести исследование анализируемой пробы, как описано в пунктах 6.1 – 6.3. Это позволит удалить присутствующие следы моющих средств.

9.2.2. Добавить полный шпатель ацетата натрия (4.10) приблизительно к 10 мл раствора, полученного в соответствии с пунктом 9.2.1, и подкислить раствор добавлением нескольких капель ледяной уксусной кислоты (4.11).

9.2.3. Добавить 10% раствор хлорида кальция (4.2) и профильтровать. Растворить осадок оксалата кальция в 2 мл серной кислоты (1:1) (4.12).

9.2.4. Перенести раствор в пробирку и добавить по каплям около 0,5 мл раствора перманганата калия 0,1М (4.7). Если оксалат присутствует, раствор теряет цвет постепенно, а затем быстро.

9.2.5. Сразу после добавления перманганата калия поместить соответствующую стеклянную трубку с пробкой над пробиркой, немного нагреть содержимое и собрать образовавшийся углекислый газ в насыщенном растворе гидроксида бария (4.13). Появление после 3-5 минут молочного облака карбоната бария указывает на присутствие щавелевой кислоты.

VI. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ХЛОРОФОРМА В ЗУБНОЙ ПАСТЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Данный метод используется для определения хлороформа в зубной пасте методом газовой хроматографии. Этот метод пригоден для определения хлороформа на уровне 5% или менее.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание хлороформа, определенное данным методом, выражается в процентах массы продукта.

3. ПРИНЦИП

Зубную пасту суспендировать в смеси диметилформамид/метанола, к которой добавить известное количество ацетонитрила в качестве внутреннего стандарта. После центрифугирования часть жидкой фазы подвергнуть газовой хроматографии и рассчитать содержание хлороформа.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. Porapak Q, Chromosorb 101 или эквивалент, от 80 до 100 ячеек.

4.2. Ацетонитрил.

4.3. Хлороформ.

4.4. Диметилформамид.

4.5. Метанол.

4.6. Внутренний стандартный раствор.

Дoбавить пипеткой 5 мл диметилформамида (4.4) в мерную колбу на 50 мл и около 300 мг (М мг) ацетонитрила. Довести до метки диметилформамидом и смешивать.

4.7. Раствор для определения отклика относительного фактора. Ввести пипеткой точно 5 мл раствора внутреннего стандарта (4.6) в мерную колбу на 10 мл и добавить около 300 мг (М₁ мг) хлороформа. Довести до метки диметилформамидом и смешать.

5. УСТРОЙСТВО И ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Аналитические весы.

5.2. Газовый хроматограф с пламенно-ионизационным детектором.

5.3. Микро-шприц от 5 до 10 µl и градацией в 0.1 µl.

5.4. Газовая пипетка с объемом в 1, 4 и 5 мл.

5.5. Мерные колбы, 10 и 50 мл.

5.6. Пробирки, примерно 20 мл, с притертыми крышками, Sovirel Франция № 20 или эквивалент. Защитный колпачок имеет внутреннюю уплотнительную пластину, покрытую с одной стороны тефлоном.

5.7. Центрифуга.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Подходящие условия для газовой хроматографии.

6.1.1. Колонка, материал: стекло длина: 150 см;

- внутренний диаметр: 4 мм.

- внешний диаметр: 6 мм.

6.1.2. Наполнитель колонки: Porapak Q, Chromosorb 101 или эквивалент, от 80 до 100 ячеек (4.1) с кислотой одного вибратора.

6.1.3. Детектор, пламенно-ионизационный: настроить его чувствительность так, чтобы при впрыскивании 3 µl раствора (4.7) высота пика ацетонитрила примерно на три четверти отклонялась от шкалы.

6.1.4. Газы:

Носитель, азот, скорость потока 65 мл/мин.

Вспомогательно: регулировать поток газов в детектор так, чтобы поток воздуха или кислорода был в 5 – 10 раз больше, чем водорода.

6.1.5. Температуры:

6.1.6. Скорость графика: около 100 см в час.

6.2. Приготовление пробы

Взять образец для анализа из неоткрытой пробирки. Удалить треть содержимого, установить крышку на трубке, тщательно перемешать, а затем взять пробу для анализа.

6.3. Определение

6.3.1. В пробирке с завинчивающейся крышкой (5.6) взвесить около 10 мг зубной пасты, отобранной в соответствии с разделом 6.2, и добавить три небольшие стеклянные бусины.

6.3.2. Внести 5 мл раствора внутреннего стандарта (4.6), 4 мл диметилформамида ( 4.4 ) и 1 мл метанола ( 4.5 ), закрыть пробирку и перемешать.

6.3.3. Встряхивать в течение получаса с помощью механического вибратора, потом центрифугировать закрытую пробирку в течение 15 минут с такой скоростью, чтобы произвести четкое разделение фаз.

Примечание: Иногда случается, что жидкая фаза по-прежнему мутная после центрифугирования. Некоторого улучшения можно добиться добавлением от 1 до 2 г хлорида натрия в жидкой фазе и повторением центрифугирования.

6.3.4. Впрыснуть 3 µl этого раствора (6.3.3) в условиях, описанных пунктом

6.1. Повторить эту операцию. Для условий, описанных выше, могут быть предоставлены следующие показатели по времени выхода:

6.3.5. Определение фактора приблизительного ответа

Для определения этого фактора впрыскивается 3 µl раствора, указанного в пункте 4.7. Повторить эту операцию. Фактор приблизительного ответа определяется ежедневно.

7. РАСЧЕТ

7.1. Вычисление приблизительного ответа

7.1.1. Измерить высоту и ширину на половине соответствующей высоты пиков ацетонитрила и хлороформа и рассчитать площадь обоих пиков, используя формулу: высота × ширину на половине высоты.

7.1.2. Определить площадь соответствующего пика ацетонитрила и хлороформа из полученной хроматограммы в соответствии с пунктом 6.3.5, и рассчитать приблизительный ответ f_s с помощью следующей формулы:

где:

f_s – относительный коэффициент отклика для хлороформа;

As – площадь пика хлороформа (6.3.5);

A_i – площадь пика ацетонитрила(6.3.5);

Ms – количество хлороформа в мг в 10 мл раствора, указанного в пункте 6.3.5 настоящей главы (- M₁);

Мi – количество ацетонитрила в мг в 10 мл раствора, указанного в пункте 6.3.5 настоящей главы (= 1/10 М).

Рассчитать среднее значение полученных показаний.

7.2 Расчет содержания хлороформа

7.2.1. Рассчитать в соответствии с пунктом 7.1.1 настоящей главы область пиков хлороформа и ацетонитрила из полученной хроматограммы в соответствии с процедурой, описанной в пункте 6.3.4.

7.2.2. Рассчитать содержание хлороформа в зубной пасте с помощью следующей формулы:

где:

%Х – содержание хлороформа в зубной пасте, выраженное в массе;

As – площадь пика хлороформа (6.3.4);

Ai – площадь пика ацетонитрила (6.3.4);

Msx – масса в мг пробы, указанная в разделе 6.3.1 (= 1 000.M0)

Мi – количество ацетонитрила в мг на 10 мл раствора, полученного в соответствии с пунктом 6.3.2 настоящей главы (1/10 М).

Рассчитать среднее значение найденных уровней и выразить результат с точностью до 0,1%.

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ (¹)

При содержании хлороформа около 3% разница между результатами двух измерений, выполненных в одной и той же пробе, не должна превышать абсолютное значение 0,3%.

VII. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИНКА

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод пригоден для определения содержания цинка в виде хлорида, сульфата или 4-гидроксибензолсульфоната, или как смесь нескольких солей цинка, в косметической продукции.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание цинка в пробе определяется гравиметрически как би (оксид цинка 2-метил-8-хинолила) и выражается в процентах массы цинка в пробе.

3. ПРИНЦИП

Цинк, присутствующий в растворе, оседает в кислой среде, как би(оксид цинка 2-метил-8-хинолила). После фильтрации осадок высушить и взвесить.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты

4.1. Концентрированный аммиак 25% (m/m)

4.2. Ледяная уксусная кислота

4.3. Ацетат аммония

4.4. 2-метилхинолин-8-ол

4.5. 6% раствора аммиака (m/m)

Перенести 240 г концентрированного аммиака (4.1) в мерную колбу объемом в 1000 мл, довести до метки дистиллированной водой и перемешать.

4.6. Раствор ацетата аммония 0.2 М

Растворить 15,4 г ацетата аммония (4.3) в дистиллированной воде, довести до метки в мерной колбе на 1 000 мл и перемешать.

4.7. Раствор 2-метилхинолин-8-ола.

Растворить 5 г 2-метилхинолин-8-ола в 12 мл ледяной уксусной кислоты и перенести в мерную колбу на 100мл. Довести до метки дистиллированной водой и перемешать.

5. УСТРОЙСТВО И ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Мерные колбы, 100 и 1 000 мл.

5.2. Стаканы объемом в 400 мл.

5.3. Мерные цилиндры объемом в 50 и 150 мл.

5.4. Мерные пипетки объемом в 10 мл .

5.5. Фильтрующие тигли G-4 из стекла.

5.6. Вакуумные колбы объемом в 500 мл.

5.7. Водоструйный насос.

5.8. Термометр от 0 до 100°С

5.9. Эксикатор с подходящим осушителем и индикатором влажности, например силикагель или эквивалент.

5.10. Сушильный шкаф с регулируемой температурой от 150 ± 2 ºC.

5.11. Измеритель pH.

5.12. Электрическая плита.

5.13. Фильтровальная бумага Whatman № 4, или эквивалент.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. На каждые 10 мг цинка, содержащиеся в растворе (6.1.2.), добавить 2 мл 2 – метилхинолин-8-ола (4.7.) и перемешать.

6.3. Смесь разбавить 150 мл дистиллированной воды, довести до температуры 60°С (5.12) и добавить 45 мл раствора ацетата аммония 0,2М (4.6), постоянно перемешивая.

6.4.Довести рН раствора до 5,7 – 5,9; 6 %-ным раствором аммиака (4.5.) при постоянном помешивании, используя рН-метр для измерения рН раствора.

6.5.Оставить раствор на 30 минут. Фильтровать с помощью водоструйного насоса через фильтрующий тигель G-4, который был предварительно высушен при 150°C и взвесить после охлаждения (М₀ граммы), промыть осадок со 150 мл дистиллированной воды при 95 °С.

6.6. Поместить тигель в сушильный шкаф при температуре 150°С и высушивать в течение одного часа.

6.7. Снять тигель из сушильной печи, поместить его в эксикатор (5.9) и после охлаждения до комнатной температуры определить массу (М₁ граммы).

7. РАСЧЕТ

Рассчитать содержание цинка в пробе в процентах массы (% m/m) с помощью следующей формулы:

где

M = масса пробы в граммах, отобранной в соответствии с 6.1;

М₀ = масса пустого и сухого фильтрующего тигля в граммах (6.5.);

M₁ = масса фильтрующего тигля с осадком в граммах (6.7.).

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ (¹)

При содержании цинка около 1% (m/m) разница между результатами двух измерений, выполненных параллельно в одной и той же пробе, не должна превышать абсолютное значение 0,1%.

VIII. ОПРЕДЕЛЕНИЕ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ

4-ГИДРОКСИБЕНЗОЛ СУЛЬФОНОВОЙ КИСЛОТЫ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод пригоден для идентификации и определения 4-гидроксибензол сульфоновой кислоты в косметических продуктах, таких как аэрозоли и лосьоны для лица.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание 4-гидроксибензол сульфоновой кислоты, определяемое в соответствии с этим методом, выражается в процентах массы безводного 4-гидроксибензол сульфоната цинка в продукте.

3. ПРИНЦИП

Анализируемую часть сконцентрировать при пониженном давлении, растворить в воде и очистить с помощью экстракции хлороформом. Определение 4-гидроксибензол сульфоновой кислоты осуществляется йодометрически в части водного фильтрованного раствора.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. Концентрированная соляная кислота 36% (m/m)

4.2. Хлороформ.

4.3. Бутанол-1-ол.

4.4. Ледяная уксусная кислота.

4.5. Йодистый калий.

4.6. Бромистый калий.

4.7. Карбонат натрия.

4.8. Сульфаниловая кислота.

4.9. Нитрат натрия.

4.10. Бромат калия 0,1 М.

4.11. Раствора тиосульфата натрия 0,1 М.

4.12. 1% (m/m) водный раствор крахмала.

4.13. 2% (m/m) водный раствор карбоната натрия.

4.14. 4,5% (m/m) водный раствор нитрита натрия.

4.15. 0,05% (m/m) раствор дитизона в хлороформе.

4.16. Проявляющий растворитель: бутан-1-ол/ледяная уксусная кислота/вода (4:1:5 объемное соотношение); после перемешивания в делительной воронке отделить нижнюю фазу.

4.17. Реагент Pauly

Растворить 4,5 г сульфаниловой кислоты (4.8) в 45 мл концентрированной соляной кислоты (4.1), нагреть и одновременно разбавить раствор водой до 500 мл. Охладить 10 мл раствора в чашке с водой со льдом и добавить при перемешивании 10 мл холодного раствора нитрита натрия (4.14). Оставить раствор в течение 15 минут при 0° С (при этой температуре раствор остается стабильным в течение от одного до трех дней) и непосредственно перед распылением (7.5) добавить 20 мл раствора карбоната натрия (4.13).

4.18. Готовые пластины целлюлозы для тонкослойной хроматографии; формат 20 × 20см, толщина слоя абсорбента 0,25 мм;

5. УСТРОЙСТВО И ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Колбы с круглым дном, 100 мл.

5.2. Делительная воронка, 100 мл.

5.3. Коническая колба с стеклянной пробкой, 250 мл.

5.4. Бюретки, 25 мл.

5.5. Газовые пипетки, 1, 2 и 10 мл.

5.6. Градированная пипетка, 5 мл.

5.7. Микро-шприц, 10 µl с градаций в 0,1 µl.

5.8. Градированный термометр от 0 до 100°С.

5.9. Водяная баня.

5.10 Шкаф сушильный, хорошо проветриваемый и регулирующийся при 80°С.

5.11. Обычное устройство для осуществления тонкослойной хроматографии.

6. ПОДГОТОВКА ПРОБЫ

В описанном ниже методе, для идентификации и определения гидроксибензол сульфоновой кислоты в аэрозолях использовать остаток, полученный при освобождении из аэрозольного баллончика растворителей и пропеллентов, которые испаряются при нормальном давлении.

7. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

7.1. С помощью микро-шприца (5.7) нанести 5 µl осадка (6) или пробы на каждую из шести точек на линии старта на расстоянии 1 см от нижнего края тонкослойной пластинки (4.18).

7.2. Поместить пластинку в проявляющую камеру, которая уже содержит проявляющий растворитель (4.16), и проявлять до тех пор, пока фронт растворителя не достигнет 15 см от линии старта.

7.3. Снять пластинку из камеры и высушивать при 80°С до тех пор, пока не будут ощущаться пары уксусной кислоты. Пластинку опрыскать раствором карбоната натрия (4.13) и высушить на воздухе.

7.4. Прикрыть половину пластинки стеклянной пластиной и опрыскать непокрытую часть 0,05% раствором дитизона (4.15). Появление пурпурно-красных пятен на хроматограмме указывает на присутствие ионов цинка.

7.5. Накрыть опрысканную половину стеклянной пластины и опрыскать другую половину раствором Pauly (4.17). Наличие 4-гидроксибензол сульфоновой кислоты обозначается появлением желтовато-бурых пятен со значением Rf около 0,26 , в то же время желтое пятно со значением Rf около 0,45 на хроматограмме указывает на наличие 3-гидроксибензол сульфоновой кислоты.

8. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

8.1. Взвесить 10 г пробы или осадка (6) в круглодонной колбе объемом 100 мл и выпарить в вакууме почти досуха на роторном испарителе на водяной бане при температуре 40ºC.

8.2. Внести 10 мл воды (V₁ мл) в колбу и растворить нагреванием осадка, полученного после выпаривания (8.1).

8.3 Перенести количественно раствор в делительную воронку (5.2) и экстрагировать водный раствор дважды, порциями по 20 мл хлороформа (4.2).После каждой экстракции фазу с хлороформом отбросить.

8.4. Профильтровать водный раствор через складчатый фильтр. В зависимости от содержания гидроксибензол сульфоновой кислоты, с помощью пипетки ввести 1,0 или 2,0 мл (V₂) фильтрата в коническую колбу объемом 250 мл (5.3) и разбавить водой до 75 мл.

8.5. Добавить 2,5 мл 36% соляной кислоты (4.1) и 2,5 г бромида калия (4.6), смешать и довести раствор до температуры 50°С с помощью водяной бани.

8.6. Из бюретки добавлять 0,1 М бромата калия (4.10) до тех пор пока цвет раствора, который все еще находится при 50°С, не пожелтеет.

8.7. Добавить еще 3,0 мл раствора бромата калия (4.10), закрыть колбу и оставить на водяной бане в течение 10 минут при 50°С.

Если через 10 минут раствор потеряет цвет, добавить еще 2,0 мл раствора бромата калия (4.10.), закрыть колбу и нагреть на водяной бане при 50°С.

Записать добавленное количество раствора бромата калия (а).

8.8. Охладить раствор до комнатной температуры, добавить 2 г иодида калия (4.5) и перемешать.

8.9. Титрировать образовавшийся йод с помощью раствора тиосульфата натрия 0,1М (4.11). К концу титрования добавить несколько капель раствора крахмала (4.12) в качестве индикатора. Записать используемое количество тиосульфата натрия (b).

9. РАСЧЕТ

Рассчитать содержание цинка гидроксибензол сульфоната цинка в пробе или осадке (6) в процентах массы (% m/m) с помощью следующей формулы:

где:

а -общее количество в миллилитрах добавленного раствора бромата калия 0,1M (8.7);

b – количество в миллилитрах раствора тиосульфата натрия 0,1М, используемого при обратном титровании (8.9.);

m – количество продукта или анализируемого осадка, выраженное в миллиграммах (8.1);

V₁- объем полученного раствора в соответствии с пунктом 8.2 настоящей главы, выраженный в миллилитрах;

V₂ – объем осадка, полученного выпариванием, используемый для анализа (8.4), выраженный в миллилитрах.

Примечание. В случае аэрозолей результат измерения в % (m/m) осадкa (6) должен быть выражен в терминах исходного продукта. Для этого преобразования делается ссылка на правила отбора проб аэрозолей.

10. ПОВТОРЯЕМОСТЬ (¹)

При содержании около 5% гидроксибензолсульфоната цинка разница между результатами двух измерений одной и той же пробы, выполненных параллельно, не должно превышать абсолютное значение 0,5%.

11. ТОЛКОВАНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

В соответствии с Директивой Совета 76/768 / ЕЕС в отношении косметической продукции разрешенная максимальная концентрация 4- гидроксибензол сульфоната цинка в лосьонах для лица и дезодорантах составляет 6 % (m/m). Это означает, что помимо содержания гидроксибензол сульфоновой кислоты, должно быть определено содержание цинка. Содержание гидроксибензол сульфоната цинка (9), умноженное на коэффициент 0,1588, определяет минимальное содержание цинка в % (m/m), что теоретически должно присутствовать в продукте с учетом измеренного содержания гидроксибензол сульфоновой кислоты. Содержание цинка, измеренное в действительности гравиметрическим способом (см. соответствующие положения), может быть выше, потому что хлорид цинка и сульфат цинка также могут быть использованы в косметических продуктах.

Приложение № 11

к Санитарному Регламенту

о косметической продукции

МЕТОДЫ АНАЛИЗА,

необходимые для проверки состава косметической продукции (II)

Методы анализа, необходимые для проверки состава косметической продукции (далee – Методы), приведены полностью в соответствие с положениями второй Директивы Комиссии от 14 мая 1982 года о сближении законов государств-членов, относящихся к методам анализа, необходимым для проверки состава косметической продукции № 82/434/СЕЕ, опубликованной в Официальном журнале Европейского Сообщества (JOCE) № L 185/1от 30 июня 1982г.

I. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ОКИСЛИТЕЛЕЙ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ

ПЕРЕКИСИ ВОДОРОДА В ПРОДУКТАХ ПО УХОДУ ЗА ВОЛОСАМИ

НАЗНАЧЕНИЕ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Йодометрическое определение перекиси водорода в косметических продуктах возможно только при отсутствии других окислителей, которые образуют йод из йодидов. Таким образом, перед йодометрическим определением перекиси водорода необходимо обнаружить и идентифицировать все другие присутствующие окислители. Идентификация осуществляется в двух этапах: первая охватывает персульфаты, броматы и перекись водорода, а вторая – перекись бария.

А. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПЕРСУЛЬФАТОВ, БРОМАТОВ И ПЕРЕКИСИ ВОДОРОДА

1. ПРИНЦИП

Персульфат натрия, персульфат калия и персульфат аммония; бромат калия, бромат натрия и перекись водорода, происходящие или нет из перекиси бария, идентифицируются посредством бумажной тонкослойной хроматографии с использованием двух проявляющих растворителей.

2. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

2.1. Контрольные водные растворы 0,5% (m/v) следующих соединений:

2.1.1. Персульфат натрия.

2.1.2. Персульфат калия.

2.1.3. Персульфат аммония.

2.1.4. Бромат калия.

2.1.5. Бромат натрия.

2.1.6. Перекись водорода.

2.2. Растворитель для камеры А: 80% (V/V) этанола.

2.3. Растворитель для камеры B: бензол – метанол – 3-метил-1-бутан – вода (объемное соотношение 34:38:18:10).

2.4. Проявитель А: 10% (m/m) водный раствор йодида калия.

2.5. Проявитель B, 1% (m/m) водный раствор крахмала.

2.6. Проявитель С, 10% (m/m) раствор соляной кислоты .

2.7. Соляная кислота 4 М.

3. УСТРОЙСТВО И ОБОРУДОВАНИЕ

3.1. Хроматографическая бумага (бумага Whatman № 3 и 4 или эквивалент)

3.2. Микропипетки по 1 µl.

3.3. Мерные колбы на 100 мл.

3.4. Складчатые фильтры.

3.5. Аппаратура для нисходящей бумажной хроматографии.

4. ПОДГОТОВКА ПРОБЫ

4.1. Водорастворимые продукты

Из каждой пробы готовятся по два раствора путем растворения 1 г и, соответственно, 5 г продукта в 100 мл воды. Использовать по 1 µl из каждого раствора для проведения бумажной хроматографии, описанной в 5 разделе.

4.2. Труднорастворимые в воде продукты

4.2.1. Взвесить 1 г и, соответственно, 5 г пробы и растворить в 50 мл воды, довести до метки водой, каждую из них и перемешать. Полученные растворы профильтровать через складчатый фильтр (3.4) и использовать по 1 µl из каждого фильтрата для проведения бумажной хроматографии, описанной в 5 разделе.

4.2.2.Приготовить еще раз по 2 раствора из каждой пробы путем растворения 1г и ,соответственно, 5 г в 50мл воды, подкисленной разбавленной соляной кислотой (2.7), довести до метки водой и перемешать. Раствор профильтровать через складчатый фильтр (3.4) и использовать по 1 µl из каждого фильтрата для проведения бумажной хроматографии, описанной в 5 разделе.

4.3. Кремы

Растворить 5 г и 20 г из каждого продукта в 100мл воды, полученные растворы использовать для проведения бумажной хроматографии, описанной в разделе 5.

5. МЕТОД

5.1. В две отдельные хроматографические камеры залить в соответствующем количестве растворитель А (2.2) и В (2.3) с целью проведения нисходящей бумажной хроматографии. Насыщать хроматографические камеры парами растворителя не менее 24 часов.

5.2. Нанести по 1 µl из раствора пробы и контрольного раствора, приготовленного в соответствии с пунктами 4 и 2.1 настоящего раздела, на две исходные точки на хроматографической бумаге (бумага Whatman № 3 или эквивалент) длиной 40 см и шириной 20 см (3.1) или другого подходящего формата и выпаривать растворы в воздухе.

5.3. Хроматографическую бумагу (5.2) поместить в хроматографическую камеру, заполненную растворителем А (5.1), и проявлять до момента продвижения фронта растворителя на 35 см (примерно 15 часов).

5.4. Процедуру, описанную в пунктах 5.2 и 5.3, повторить с использованием хроматографической бумаги (бумага Whatman № 4 или эквивалент) (3.1) и растворителя В и хроматографированием до момента продвижения фронта растворителя на 35 см (примерно 5 часов).

5.5. После проявления хроматограммы извлечь и сушить на воздухе.

5.6. Выделить пятна на хроматограмме путем последовательного распыления с:

5.6.1. проявителем А (2.4), а затем вскоре после этого с проявителем B (2.5). Пятна персульфатов появляются первыми на хроматограмме, а потом следуют пятна перекиси водорода. Пятна отметить карандашом;

5.6.2. проявителем C (2.6) на полученных хроматограммах в соответствии с пунктом 5.6.1; наличие броматов на хроматограмме отмечено синевато-серыми пятнами.

5.7. Исходя из вышеуказанных условий, с соответствующими растворителями A (2.2) и B (2.3) можно получить примерно следующие значения R_f контрольных растворов (2.1):

В. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПЕРЕКИСИ БАРИЯ

1. ПРИНЦИП

Перекись бария идентифицируется путем образования перекиси водорода после подкисления пробы (A.4.2) и присутствием ионов бария:

- при отсутствии персульфатов (А), путем добавления разбавленной серной кислоты к части подкисленного рабочего раствора (B.4.1), в результате образуется белый осадок сульфата бария. Наличие ионов бария в пробе (B.4.1) в этом случае еще раз подтверждается с помощью бумажной хроматографии способом, описанным выше (В.5);

- при одновременном присутствии перекиси бария и персульфатов (B.4.2), путем ассимиляции осадка из раствора (B. 4.2) в щелочной среде; после растворения в соляной кислоте, присутствие ионов бария подтверждается в растворе расплава (B.4.2.3) методом бумажной хроматографии и путем осаждения сульфата бария.

2. РЕАГЕНТЫ

2.1. Метанол.

2.2. Концентрированная соляная кислота 36% (m/m).

2.3. Соляная кислота 6 М.

2.4. Серная кислота 4 М.

2.5. Динатриевая соль родизоновой кислоты.

2.6. Хлорид бария (BaCl₂ · 2H₂O).

2.7. Безводный карбонат натрия.

2.8. Водный раствор хлорида бария 1% (m/m).

2.9. Растворитель, состоящий из метанола, концентрированной соляной кислоты (36%) и воды (объемное соотношение 80:10:10).

2:10. Проявитель, водный раствор 0,1% (m/m) динатриевой соли родизоновой кислоты, непосредственно приготовленный перед применением.

3. УСТРОЙСТВО И ОБОРУДОВАНИЕ

3.1. Микропипетки на 5 µl

3.2. Платиновые тигли

3.3. Мерные колбы по 100 мл

3.4. Хроматографическая бумага Schleisher и Schull 2043b или эквивалент. Бумага очищается путем проявления ее за ночь в нисходящей хроматографической камере (A.3.5), содержит проявляющий растворитель (B.2.9) и потом сушится.

3.5. Гофрированная фильтровальная бумага

3.6. Оборудование для проведения нисходящей хроматографии на бумаге.

4. ПОДГОТОВКА ПРОБЫ

4.1. Продукты, не содержащие персульфаты

4.1.1. Растворить 2 г продукта в 50 мл воды и довести рН раствора примерно до 1 с помощью соляной кислоты (B.2.3).

4.1.2. Перевести водный раствор в мерную колбу на 100 мл, довести объем водой до метки и перемешать. Этот раствор использовать для анализа путем нисходящей бумажной хроматографии, описанной в 5 разделе, для идентификации бария путем осаждения сульфата.

4.2. Продукты, содержащие персульфаты

4.2.1. Растворить 2 г продукта в 100 мл воды и профильтровать.

4.2.2. Добавить к высушенному осадку карбонат натрия (В.2.7) в количестве от 7 до 10 раз больше чем вес остатка, перемешать и расплавить смесь в платиновом тигле (В.3.2) в течение получаса.

4.2.3. Охладить при комнатной температуре, растворить сплав в 50 мл воды и профильтровать (B.3.5).

4.2.4. Осадок из расплава растворить соляной кислотой (B.2.3) и довести водой до 100 мл. Этот раствор использовать для анализа путем бумажной тонкослойной хроматографии, описанной в 5 разделе, и для идентификации бария осаждением из сульфата.

5. МЕТОД

5.1. Соответствующее количество растворителя (B.2.9) залить в камеру для восходящей бумажной хроматографии и насыщать ее не менее 15 часов.

5.2. На лист бумаги для хроматографии, предварительно обработанной в соответствии с разделом В.3.4, нанести по 5 µl каждого из растворов, приготовленных в соответствии с разделами В.4.1.2 и B.4.2.4, и контрольного раствора В.2.8 на три исходные точки.

5.3. Пятна пробы и контрольные пятна сушить на воздухе. Проявлять хроматограмму пока фронт растворителя поднимется на 30 см.

5.4. Вынуть хроматограмму из камеры и сушить на воздухе.

5.5. Выделить пятна на хроматограмме путем распыления бумаги проявителем B.2.10.

При наличии бария на хроматограмме появляются красные пятна со значением R_f примерно 0,1.

С. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПЕРЕКИСИ ВОДОРОДА

1. ПРИНЦИП

Йодометрический метод определения перекиси водорода основан на следующей реакции:

Реакция протекает медленно, но может быть ускорена добавлением молибдата аммония. Образовавшийся йод определить титрованием с тиосульфатом натрия, которое служит мерой для определения содержания перекиси водорода.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание перекиси водорода, определенное описанным выше методом, выражается в процентах к массе продукта (% m/m).

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Серная кислота 2 n.

3.2. Йодистый калий.

3.3. Аммоний молибдат.

3.4. Натрий тиосульфат 0,1 n.

3.5. Раствор йодистого калия 10% (m/m), приготовленный непосредственно перед употреблением.

3.6. Раствор молибдата аммония 20% (m/m).

3.7. Раствор крахмала 1% (m/m).

4. УСТРОЙСТВО И ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стаканы на 100 мл.

4.2. Бюретки на 50 мл.

4.3. Мерные колбы на 250 мл.

4.4. Измерительные цилиндры на 25 и 100 мл.

4.5. Пипетки на 10 мл с одной маркировкой.

4.6. Конические колбы на 250 мл.

5. МЕТОД

5.1. В химическом стакане на 100 мл взвесить 10г (m граммы) продукта, содержащего около 0,6 г перекиси водорода. Перенести содержимое с водой в мерную колбу на 250 мл, довести до метки водой и перемешать.

5.2. В коническую колбу на 250 мл (4.6) налить пипеткой 10 мл раствора пробы (5.1) и добавить последовательно 100 мл серной кислоты 2 n (3.1), 20 мл раствора йодистого калия (3.5) и три капли раствора молибдата аммония (3.6).

5.3. Образовавшийся йод титровать сразу раствором натрия тиосульфата 0,1М (3.4) и точно перед достижением верхней точки добавить несколько миллилитров раствора крахмала в качестве индикатора (3.7). Регистрировать расход натрия тиосульфата 0,1n (3.4) в миллилитрах (V).

5.4. Методом, описанным выше в пунктах 5.2 и 5.3, произвести контрольное определение, заменяя 10 мл раствора образца на 10 мл воды. Регистрировать расход натрия тиосульфата 0,1n при контрольном определении (Vо мл)

6. РАСЧЕТ

Содержание перекиси водорода в продукте рассчитывается в процентах к массе (% м/м), используя следующую формулу:

где:

m – количество анализированного продукта в граммах (5.1);

Vо – количество расхода раствора тиосульфата 0,1n в миллилитрах для контрольного определения (5.4);

V – количество расхода раствора тиосульфата 0,1n в миллилитрах при титровании раствора пробы (5.3).

7. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

Для продукта, содержащего примерно 6% m/m перекиси водорода, разница между результатами двух параллельных определений, проведенных с той же пробой, не должна превышать абсолютного значения в 0,2%.

II. ИДЕНТИФИКАЦИЯ

И ПОЛУКОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ НЕКОТОРЫХ

ОКИСЛИТЕЛЬНЫХ КРАСИТЕЛЕЙ В КРАСКАХ ДЛЯ ВОЛОС

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Данный метод пригоден для идентификации и полуколичественного определения в красках для волос в виде кремов и жидкостей следующих веществ:

2. ПРИНЦИП

Окислительные красители извлекаются при рН 10 с помощью 96% этанола из красок в виде кремов или жидкостей и идентифицируются с помощью одно- или двумерной тонкослойной хроматографии.

Для полуколичественного определения этих веществ, хроматограммы образцов сравнивают, используя четыре системы проявления с контрольными растворами, приготовленными в одно и то же время и наиболее максимально аналогичных условиях.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Безводный этанол.

3.2. Ацетон.

3.3. Этанол, 96% v/v.

3.4. Раствор аммиака, 25%:

3.5. L (+) аскорбиновая кислота.

3.6. Хлороформ.

3.7. Циклогексан.

3.8. Технический азот.

3.9. Толуол.

3.10. Бензол.

3.11. n-бутанол.

3.12. 2-бутанол.

3.13. Раствор гипофосфорной кислоты, 50% v/v

3.14. Диазореагент. Может быть одним из следующих:

- хлорбензолсульфонат 3-нитро-1-бензолдиазониум (стабильная форма соли), как в Красном 2 JN – Francolor;

- нафталинбензоат 2-хлор-4-нитро-1-бензолдиазониум (стабильная форма соли), как в Реагенте NNCD – номер позиции 74 150 FLUKA или эквивалент.

3.15. Нитрат серебра.

3,16. р-диметиламинобензальдегид.

3.17. 2,5-диметилфенол.

3.18. Гексагидрат хлорида железа (FeCl₃ 6Н₂О).

3.19. Раствор соляной кислоты, 10% m/m.

3.20. Контрольные вещества.

Контрольные вещества указаны в I главе "Предмет и область применения". В случае соединений аминов контрольными веществами должны быть либо гидрохлориды (моно- или ди) или свободные щелочи.

3.21. Контрольные растворы 0,5% (m/m):

Приготовить по одному раствору 0,5% (m/m) каждого из контрольных веществ, указанных в пункте 3.20 настоящего раздела.

В мерной колбе на 10 мл взвесить 50 мг ± 1 мг контрольного вещества.

Добавить 5 мл 96% этанола (3.3) и 250 мг аскорбиновой кислоты (3.5).

Раствор подщелочить раствором аммиака (3.4), чтобы иметь рН 10 (проверить индикаторной бумагой).

Добавить до 10 мл с 96% этанола (3.3) и перемешать.

Растворы могут сохраняться в течение одной недели в темном прохладном месте.

В некоторых случаях после добавления аскорбиновой кислоты и аммиака может образоваться осадок. В этом случае он должен осесть, прежде чем использовать раствор в работе.

3.22. Проявляющиеся растворители для камеры

3.22.1. Ацетон – хлороформ – толуол (объемное соотношение 35:25:40)

3.22.2. Хлороформ – циклогексан – этанол – аммиак 25% (объемное соотношение 80:10:10:1)

3.22.3. Бензол – 2-бутанол – вода (объемное соотношение 50:25:25). Хорошо перемешать и после разделения при комнатной температуре (от 20 до 25°С) использовать верхнюю фазу.

3.22.4. n-бутанол – хлороформ – реактив М (объемное соотношение 7:70:23).

Аккуратно разделить при комнатной температуре (от 20 до 25°С) и использовать нижнюю фазу.

Примечание. Проявляющие растворители, содержащие аммиак, необходимо хорошо перемешать перед использованием.

3:23. Индикаторные спреи.

3.23.1. Диазореагент

Приготовить 5% (m/v) водный раствор выбранного реагента (3.14.) непосредственно перед применением.

3.23.2. Реагент Эрлиха

Растворить 2 г n-диаметиламинобензальдегида (3.16) в 100 мл 10% (m/v) водного раствора соляной кислоты (3.19.).

3.23.3. 2,5-диметилфенол – гексагидрат хлорида железа

1-ый раствор: растворить 1 г диметилфенола (3.17) в 100 мл 96% этанола (3.3).

2-ой раствор: растворить 4 г гексагидрата хлорида железа (3.18) в 100 мл 96% этилового спирта (3.3).

Для проявления эти растворы распылять отдельно, сначала 1-ый раствор, а затем 2-ой раствор.

3.23.4. Аммиачный нитрат серебра

К 5% водного раствора (m/m) нитрата серебра (3.15) добавить 25% раствора аммиака (3.4) до растворения осадка. Данный реагент должен быть приготовлен непосредственно перед применением.

Реагент не сохраняется.

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Лабораторное оборудование, необходимое для тонкослойной хроматографии.

4.1.1. Крышка из пластика или стекла, изготовленная таким образом, чтобы хроматографическая пластинка была окружена азотом во время появления пятен и сушки. Эта мера предосторожности необходима из-за восприимчивости к окислению некоторых красителей.

4.1.2. Микрошприц на 10 µl, градуированный делениями по 0,2 µl, с иглой с квадратным отверстием или лучше с повторным дозатором на 50 µl, установленный на подставке с зажимом таким образом, чтобы пластинка находилась в атмосфере азота.

4.1.3. Пластинки, покрытые силикагелем для тонкослойной хроматографии, готовые к применению, толщиной 0,25 мм, формат 20 × 20 см (Macherey и Nagel, Silica G-HR, с пластиковой подложкой, или эквивалент).

4.2. Центрифуга, 4000 оборотов/мин.

4.3. Пробирки для центрифугирования на 10 мл, с винтовыми пробками, покрытые ПТФЕ, или эквивалент.

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. Обработка проб

Удалить первые 2-3 см крема выдавливанием из упаковочного тюбика.

В пробирку для центрифугирования (4.3), предварительно заполненную азотом, поместить следующие вещества: 300мг аскорбиновой кислоты с 3г крема или 3г гомогенизированной жидкости.

Добавить каплями 25% раствор аммиака (3.4) до рН 10. Добавить также до 10 мл 96% этанола (3.3).

Гомогенизировать в среде азота (3.8), закрыть пробкой и центрифугировать (при 4000 оборотов/мин) в течение 10 минут. Использовать надосадочную жидкость.

5.2. Хроматография

5.2.1. Разметка пластинок

В среде азота (3.8) на хроматографическую пластинку (4.1.3) нанести по 1 µl каждого из контрольных растворов, описанных выше 9 пунктами, расположенных приблизительно на 1,5 см друг от друга вдоль линии, расположенной примерно на 1,5 см от края пластинки.

Пятна контрольных растворов распределены следующим образом:

Кроме того, согласно пунктам 10 и 11, нанести по 2 µl из раствора пробы, полученного в соответствии с разделом 5.1 настоящей главы.

Пластинка содержится в среде азота (3.8) до момента, пока она хроматографируется.

5.2.2. Проявление

Пластинку поместить в камеру, предварительно заполненную азотом (3.8), насыщенную одним из четырех растворителей (3.22), и оставить для проявления при комнатной температуре (от 20 до 25°С) в темноте пока передний край растворителя продвинется примерно на 15 см от линии старта.

Пластинку вынуть и сушить в среде азота (3.8) при комнатной температуре.

5.2.3. Распыление

Пластинку сразу же опрыскать одним из четырех растворов, указанных в пункте 3.23.

5.2.4. Идентификация

Сравнить значение R_f и цвет, полученный для пробы, с данными, полученными при хроматографировании контрольных растворов.

В таблице 1 приведены в качестве примера значения R_f и цвета для каждого вещества в зависимости от растворителя и использованного индикатора.

В случае неопределенной идентификации подтверждение может быть достигнуто методом фиксации, добавив к экстракту пробы соответствующий раствор контрольного вещества.

5.2.5. Полуколичественная оценка

Визуально сравнить интенсивность пятен для каждого идентифицированного вещества, согласно пункту 5.2.4, с соответствующим диапазоном концентраций контрольных веществ.

В случае если концентрация одного или нескольких веществ, содержащихся в пробе, избыточная, экстракт пробы разводят и повторяют измерение.

Таблица 1

Значения R_f и цвета полученные сразу после распыления

6. ИССЛЕДОВАНИЕ ПУТЕМ ДВУМЕРНОЙ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Процедура двумерной тонкослойной хроматографии требует использования дополнительных стандартов и реагентов.

6.1. Дополнительные вещества и контрольные растворы

6.1.1. β-нафтол (β-N).

6.1.2. 2-аминофенол (ОАР).

6.1.3. 3-аминофенол (МАР).

6.1.4. 4-аминофенол (РAР).

6.1.5. 2-нитро-1,4-фенилендиамин (2-NPPD).

6.1.6. 4-нитро-1,2-фенилендиамин (4-NOPD).

Из каждого дополнительного контрольного вещества приготовить

0,5% раствор (m/v), согласно пункту 3.21.

6.2. Дополнительный растворитель

6.2.1. Этилацетат–циклогексан ─25% раствор аммиака (объемное соотношение 65:30:0,5)

6.3. Дополнительная индикаторная система

Стеклянный сосуд поместить в проявляющую камеру для тонкослойной хроматографии, добавить примерно 2 г кристаллизованного йода и закрыть сосуд адекватной крышкой.

6.4. Хроматографирование

6.4.1. На впитывающей поверхности пластинки для тонкослойной хроматографии (4.1.3) нарисовать две линии, как показано на рис. 1.

6.4.2. В среде азота (4.1.1) нанести от 1 до 4 µl экстракта (5.1) на исходную точку 1 (рис. 1), которая находится в 2 см от тех двух линий. Количество экстракта зависит от интенсивности пятен на хроматограммах (5.2).

6.4.3.Идентифицированные окислительные красители или те, которые предполагается определить в соответствии с пунктом 5.2, разделить между точками 2 и 3 (рис. 1), расстояние между точками 1,5 см. Нанести 2 µl из каждого контрольного раствора, за исключением DАР, из которого наносят 6 µl. Эти операции произвести в среде азота (6.4.2).

6.4.4. Повторить процедуру, описанную в пункте 6.4.3, в исходных точках 4 и 5 (рис. 1) и пластинку сохранять в среде азота до момента ее хроматографирования (расстояние между точками 1,5 см).

6.4.5. Хроматографическую камеру (3.8) наполнить азотом и залить в него соответственное количество проявляющего растворителя. Поместить пластинку (6.4.4.) в камеру и проявить в первом направлении элюирования (рисунок 1) в темноте.

Элюировать пока фронт растворителя достигнет линии отметки на пластинке (примерно 13 см).

6.4.6. Вынуть пластинку из резервуара и поместить в хроматографическую камеру, предварительно заполненную азотом, для испарения элюированного растворителя не менее чем на 60 минут.

6.4.7. С помощью градуированной пробирки внести соответствующее количество растворителя для элюирования (6.2.) в камеру, заполненную азотом (3.8), поместить пластинку, повернутую на 90° в камеру (6.4.6), и хроматографировать во втором направлении (также в темноте) пока фронт растворителя достигнет линии, проведенной на абсорбирующей поверхности. Удалить пластинку из камеры и выпарить элюированный растворитель на воздухе.

6.4.8. Поместить пластинку на 10 минут в резервуар для хроматографии с парами йода (6.3) и определить двумерную хроматограмму, используя значения R_f и цвета для хроматографированных контрольных веществ в одно и то же время (таблица 2 является руководством для значений R_f и цветов).

Примечание. Для достижения максимальной окраски пятен хроматограмму оставить на открытом воздухе в течение 30 минут после ее проявления.

6.4.9. Наличие окислительных красителей, указанных в пункте 6.4.8 настоящей главы, может быть окончательно подтверждено путем повторения действий, описанных в пунктах 6.4.1 ─ 6.4.8, с добавлением в исходной точке 1 в центре количества экстракта, указанного в пункте 6.4.2, 1 µl контрольных веществ, идентифицированных в пункте 6.4.8. Если не обнаруживается другая точка в сравнении с хроматограммой ,полученной согласно пункту 6.4.8, интерпретация хроматограммы в пункте 6.4.8 является правильной.

Таблица 2

Цвета контрольных веществ после хроматографии

и проявления с парами йода

Рис. 1

III. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ НИТРИТА

А. ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Настоящий метод подходит для идентификации нитрита в косметических продуктах, в частности, в кремах и пастах.

2. ПРИНЦИП

На наличие нитрита указывает образование цветных производных с 2-аминобензальдегид фенилгидразином (Nitrin®).

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Приготовление разбавленного раствора серной кислоты: 2 мл концентрированной серной кислоты (d₄²⁰ = 1.84) разбавить c 11 мл дистиллированной воды.

3.2. Приготовление разбавленного раствора соляной кислоты: 1 мл концентрированной соляной кислоты (d₄²⁰ = 1.84) разбавить 11 мл дистиллированной воды.

3.3. Метанол

3.4. Раствор 2-аминобензальдегид фенилгидразин (реагент Nitrin®) в метаноле.

Взвесить 2,0 г Nitrin® и количественно перенести в мерную колбу на 100 мл. Каплями добавить 4 мл разбавленной соляной кислоты (3.2) и перемешать. Наполнить метанолом до метки и перемешать до полного осветления раствора. Хранить раствор в коричневом стеклянном флаконе (4.3.).

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Лабораторные стаканы на 50 мл.

4.2. Мерная колба на 100 мл.

4.3. Коричневая стеклянная бутылка на 125 мл.

4.4. Стеклянная пластина 10 × 10 см.

4.5. Пластиковые шпатели.

4.6. Фильтровальная бумага 10 × 10 см.

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. Часть пробы, подлежащей анализу, равномерно распределить по стеклянной пластине (4.4), слоем толщины, не превышающей 1 см.

5.2. Лист фильтровальной бумаги (4.6) пропитать дистиллированной водой. Наложить его на пробу и придавить фильтровальную бумагу пластмассовым шпателем (4.5).

5.3. Оставить на одну минуту и по середине фильтровальной бумаги нанести:

- две капли разбавленной серной кислоты (3.1),

- затем две капли раствора Nitrin ® (3.4).

5.4. После 5 до 10 секунд удалить фильтровальную бумагу и изучить при дневном свете. Наличие нитрита обозначено появлением красновато-фиолетовой окраски.

Если содержание нитрита низкое, красновато-фиолетовая окраска меняется на желтую окраску после 5 до 15 секунд. Такое же изменение окраски происходит после 1-2 минут, когда присутствует большое количество нитрита.

6. ПРИМЕЧАНИЕ

Интенсивность красновато-фиолетовой окраски и время, прошедшее до изменения в желтый цвет, дают представление о содержании нитритов в пробе.

B. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Метод описывает способ определения нитрита в косметической продукции.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание нитрита в образце, определяемого в соответствии с настоящим методом, выражается в процентах ( % ) к массе нитрита натрия.

3. ПРИНЦИП

После разбавления образца с водой и его осветления присутствующий нитрит подвергнуть взаимодействию с сульфаниламидом и N-1-нафталиндиамином и измерить оптическую плотность полученного цвета при 538 nm.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

Осветляющие реагенты: эти реагенты не могут использоваться более чем в течение одной недели после приготовления.

4.1.1. Реагент Каррез I:

Растворить 106 г цианоферрата калия (II), К₄ Fe(CN)₆ · 3H₂O, в дистиллированной воде и разбавить водой до 1000 мл.

4.1.2. Реагент Каррез II:

Растворить 299,5 г ацетата цинка, Zn (CH₃COO)₂ · 2H₂O и 30 мл ледяной уксусной кислоты в дистиллированной воде и разбавить водой до 1000 мл.

4.2. Раствор нитрита натрия

В мерной колбе на 1000 мл растворить 0,500 г нитрита натрия в дистиллированной воде и разбавить водой до метки. Разбавить 10,0 мл из исходного стандартного раствора до 500 мл; 1 мл из последнего раствора = 10 µg NaNO₂.

4.3. Раствор гидроксида натрия 1 n

4.4. Раствор гидрохлорид сульфаниламида 0,2%

Растворить 2,0 г сульфаниламида в 800 мл воды при нагревании. Охладить и добавить 100 мл концентрированной соляной кислоты и постоянно перемешать. Добавить воду до 1 000 мл.

4.5. Соляная кислота 5 n

4.6. Реагент N-1-нафтил:

Этот раствор должен быть приготовлен в день использования. Растворить 0,1 г дигидрохлорида N-1- нафтил этилендиамина в воде и разбавить водой до 100 мл.

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Аналитические весы

5.2. Мерные колбы на 100, 250, 500 и 1000 мл

5.3. Градуированные или газовые пипетки

5.4. Мерные цилиндры из 100 мл

5.5. Складчатая фильтровальная бумага без нитрита диаметром 15 см

5.6. Водяная баня

5.7. Спектрофотометр с оптической кюветой длиной пути 1 см

5.8. Измеритель кислотности

5.9. Микробюретки на 10 мл

5.10. Лабораторные стаканы на 250 мл

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Взвесить с точностью до 0,1 мг примерно 0,5 г (m граммы) из гомогенизированной пробы; количественно перенести с горячей дистиллированной водой в химический стакан объемом 250 мл (5.10) и довести объем до 150 мл горячей дистиллированной водой. Стакан (5.10) поставить на водяную баню (5.6) при 80°С в течение получаса. В этот период содержимое периодически встряхивать.

6.2. Содержимое охладить при комнатной температуре и последовательно, при перемешивании, добавить 2 мл реагента Каррез I (4.1.1) и 2 мл реагента Каррез II (4.1.2).

6.3. Добавить раствор гидроксида натрия 1n (4.3), чтобы довести рН до 8,3 (использовать измеритель рН (5.8). Перенести количественно содержимое в мерную колбу на 250 мл (5.2) и довести до метки дистиллированной водой.

6.4. Перемешать содержимое и профильтровать через складчатую фильтровальную бумагу (5.5).

6.5. С помощью пипетки (5.3) в мерную колбу на 100 мл (5.2) перенести подходящее количество (Vml) прозрачного фильтрата, но не более 25 мл, и добавить дистиллированную воду до объема в 60 мл.

6.6. После перемешивания добавить 10,0 мл раствора гидрохлорида сульфаниламида (4.4) и 6,0 мл соляной кислоты 5 n (4.5). Смесь перемешать и выдержать в течение 5 минут. Добавить 2,0 мл реагента N-1-нафтил (4.6), перемешать и выдержать раствор в течение 3 минут. Разбавить водой до метки и перемешать.

6.7. Приготовить контрольную пробу путем повторения операций 6.5 и 6.6 ,без добавления реагента N-1-нафтил (4.6).

6.8. Измерить (5.7) оптическую плотность при 538 nm полученного раствора, согласно пункту 6.6, данного раздела, используя контрольную пробу (6.7) для сравнения.

6.9. Рассчитать из калибровочного графика (6.10) содержание нитрита натрия в микрограммах на 100 мл раствора (m₁ микрограммы), что соответствует оптической плотности, измеренной в соответствии с пунктом 6.8.

6.10. Используя 10 µg на 1 мл раствора нитрита натрия (4.2) получить калибровочный график для концентрации 0, 20, 40, 60, 80 и 100µg нитрита натрия на 100 мл.

7. РАСЧЕТ

Содержание нитрита натрия в образце рассчитать в процентах к массе с помощью следующей формулы:

где:

m – масса исследуемого образца, в граммах (6.1);

m₁ – содержание нитрита натрия, определенного в пункте 6.9, в микрограммах;

V- количество миллилитров фильтрата, используемого для измерения (6.5).

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

Для содержимого нитрита натрия примерно в 0,2% m/m, разница между результатами двух параллельных определений, проведенных на одной и той же пробе, не должна превышать абсолютное значение в 0,005%.

IV. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ СВОБОДНОГО ФОРМАЛЬДЕГИДА

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Настоящий метод применяется для идентификации и определения свободного формальдегида. Метод применим ко всем косметическим продуктам:

1.1. Идентификация

1.2. Колориметрическое определение с помощью пентана-2,4-диона.

Настоящий метод применяется, когда формальдегид используется один или в сочетании с другими консервантами, которые не являются донорами формальдегида. В других случаях и если результат превышает предельно допустимую концентрацию, необходимо использовать для подтверждения следующий метод.

1.3. Определение в присутствии доноров формальдегида

В изложенном выше методе (1.2) во время образования производных формальдегида доноры формальдегида делятся и приводят к результатам, которые слишком высоки (комбинированный и полимеризованный формальдегид). Необходимо отделить свободный формальдегид с помощью жидкостной хроматографии.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание свободного формальдегида в пробе, определяемой в соответствии с настоящим методом, выражается в процентах массы.

3. ИДЕНТИФИКАЦИЯ

3.1. ПРИНЦИП

В среде серной кислоты формальдегид изменяет цвет реагента Шиффа в розовый или лиловый.

3.2. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.2.1. Фуксин.

3.2.2. Сульфит натрия гидратированный с 7- молекулами воды H2O.

3.2.3. Концентрированная соляная кислота ( d =1,19 ).

3.2.4. Серная кислота, около 1 М.

3.2.5. Реагент Шиффа:

Взвесить в колбе 100 мг фуксина (3.2.1) и растворить в 75 мл воды при 80°С. После охлаждения добавить 2,5 г сульфита натрия (3.2.2). Довести до объема 100 мл.

Использовать в течение двух недель.

3.3. ПРОЦЕДУРА

3.3.1. В химический стакан объемом в10 мл взвесить 2 г образца.

3.3.2. Добавить две капли серной кислоты (3.2.4) и 2 мл реактива Шиффа (3.2.5). При использовании, реагент должен быть абсолютно бесцветным.

Раствор взболтать и выдерживать в течение пяти минут.

3.3.3. Если в течение пяти минут раствор становится розовым или лиловым, тогда содержание формальдегида превышает 0,01% и должно быть определено в соответствии со свободным или комбинированным методом, указанном в пункте 4 и, при необходимости, в соответствии с процедурой 1, описанной пунктом 5 настоящей главы .

4. ОБЩИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТОДОМ КОЛОРИМЕТРИИ С ПЕНТАН-2,4-ДИОНОМ

4.1. Принцип

Формальдегид реагирует с пентан-2,4-дионом в присутствии ацетата аммония с образованием 3,5-диацетил-1,4-дигидролутидина. Последнее вещество экстрагирует с помощью 1-бутанола и измеряет абсорбцию экстракта при 410 nm.

4.2. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты, а вода должна быть деминерализованная.

4.2.1. Ацетат аммония безводный .

4.2.2. Концентрированная уксусная кислота d₄²⁰ = 1,05.

4.2.3. Пентан-2,4-дион свежедистиллированный при пониженном давлении 25 mm ртутного столба 25° не должен поглощать при 410 nm.

4.2.4. 1-Бутанол.

4.2.5. Соляная кислота 0,1 М.

4.2.6. Соляная кислота, приблизительно 0,1 М.

4.2.7. Гидроксид натрия 1 М.

4.2.8. Крахмал, свежеприготовленный раствор согласно Европейской Фармакопеи (1 г / 50 мл воды), второе издание, 1980, части I-VII-1-1.

4.2.9. Формальдегид 37 – 40% м/д.

4.2.10. Стандартный раствор йода 0,05 М.

4.2.11. Стандартный раствор тиосульфата натрия 0,1 М.

4.2.12. Реагент пентан-2,4-дион.

В мерной колбе объемом в 1000 мл растворить:

- 150 г ацетата аммония (4.2.1).

- 2 мл пентан-2,4-диона (4.2.3).

- 3 мл уксусной кислоты (4.2.2).

Добавить воду до отметки (рН около 6,4).

Этот реагент должен быть свежеприготовленным.

4.2.13. Реагент (4.2.12) без пентан-2,4-диона.

4.2.14. Формальдегид стандарт, основной раствор:

В мерную колбу перенести 5 г формальдегида (4.2.9) и добавить воды до отметки в 1 000 мл.

Концентрация раствора определяется следующим образом:

Удалить 10,00 мл; добавить 25,00 мл стандартного раствора йода (4.2.10) и 10,00 мл гидроксида натрия (4.2.7). Дать постоять 5 минут. Подкислить 11,00 мл HCl (4.2.5) и определить избыток йода стандартным раствором тиосульфата натрия (4.2.11), используя как индикатор раствор крахмала (4.2.8).

1 мл йода 0,05 М (4.2.10) эквивалентен 1,5 мг формальдегида.

4.2.15. Формальдегид стандарт, разбавленный раствор

Разбавить последовательно водой основной раствор формальдегида до 1/20 и ,соответственно, 1/100.

1 мл этого раствора содержит около 1 µg формальдегида.

Рассчитать точное содержание.

4.3. Оборудование

4.3.1. Стандартное лабораторное оборудование.

4.3.2. Фаза – разделительный фильтр, Whatman 1 PS (или эквивалент) .

4.3.3. Центрифуга.

4.3.4. Водяная баня, отрегулированная при 60°С.

4.3.5. Спектрофотометр.

4.3.6. Стеклянные кюветы с оптической длиной 1 см.

4.4. Процедура

4.4.1. Раствор образца

В 100 мл колбе взвесить с точностью до 0,001 г количество (в граммах) испытуемой пробы соответствующего количества формальдегида, около 150 µg.

Довести до метки 100 мл воды и перемешать (раствор S).

[Проверить рН, который должен быть приближен к 6, если нет, разбавить раствором соляной кислоты (4.2.6)].

В колбу Эрленмейера 50 мл поместить:

- 10,00 мл раствора S;

- 5,00 мл реагента, пентан-2,4-диона (4.2.12);

- деминерализованную воду до конечного объема 30 мл.

4.4.2. Эталонный раствор

Возможные помехи из-за фонового цвета в тестируемой пробе устраняют за счет использования этого контрольного раствора:

В колбу Эрленмейера 50 мл поместить:

- 10,00 мл раствора S;

- 5,00 мл реагента (4.2.13);

- деминерализованную воду до конечного объема 30 мл.

4.4.3. Контрольный тест

В колбу Эрленмейера 50 мл поместить:

- 5,00 мл реагента пентан-2,4-диона (4.2.12);

- деминерализованную воду до конечного объема 30 мл.

4.4.4. Определение

4.4.4.1. Смеси, указанные в пунктах 4.4.1, 4.4.2 и 4.4.3, встряхнуть и погрузить в водяную баню при 60° С ровно на 10 минут. Растворам дать остыть в течение двух минут на водяной бане со льдом.

4.4.4.2. Перенести в делительные воронки на 50 мл, содержащие 10,0 мл 1-бутанола (4.2.4). Каждую колбу промыть 3-5 мл воды. Смесь энергично встряхивать ровно 30 секунд и оставить для разделения.

4.4.4.3. Профильтровать фазу 1-бутанол через фильтр для разделения фаз (4.3.2). Также можно использовать центрифугирование (3000 g_n, в течение пяти минут).

4.4.4.4. Измерить оптическую плотность А₁ экстракта раствора при 410 nm, представленного пунктом 4.4.1, в сравнении с экстрактом контрольного раствора из пункта 4.4.2 настоящей главы.

4.4.4.5. Аналогично измерить абсорбент А₂ экстракта раствора этанола, указанного в пункте 4.4.3 настоящей главы, в сравнении с 1-бутанолом.

Все операции должны проводиться в течение 25 минут с момента помещения колб Эрленмейера на водяную баню при 60°С.

4.4.5. Калибровочная кривая

4.4.5.1. В колбу Эрленмейера на 50 мл заливают:

- 5,0 мл разбавленного стандартного раствора (4.2.15);

- 5,0 мл реагента пентан-2,4-диона (4.2.12);

- деминерализованную воду до конечного объема в 30 мл.

4.4.5.2. Продолжить, согласно действиям, описанным в пункте 4.4.4 настоящей главы, и измерить оптическую плотность в сравнении с 1-бутанолом (4.2.4).

4.4.5.3. Процедуру повторить с 10, 15, 20 и 25 мл разбавленного стандартного раствора.

4.4.5.4. Чтобы получить нулевое значение необходимо действовать согласно пункту 4.4.4.5.

4.4.5.5. Калибровочную кривую вывести после вычитания нулевого значения каждого из оптических плотностей, полученных в пунктах 4.4.5.1 и 4.4.5.3. Закон Beer действует до максимального значения формальдегида в 30 µl.

4.5. Расчет

4.5.1. Вычесть А₂ из А₁ и выделить на калибровочной кривой (4.4.5.5) количество С формальдегида в микрограммах в испытуемом растворе (4.4.1).

4.5.2. Содержание формальдегида в пробе рассчитать в процентах массы (% m/m), согласно следующей формуле:

где:

m – масса части пробы, указанной в пункте 4.4.1.

4.6. Воспроизводимость ⁽¹⁾

При содержании формальдегида в 0,2% разница между результатами двух параллельных определений, проведенных с той же пробой, не должна превышать 0,005% в колориметрическом методе с пентан-2,4-дионом.

Например, если определение свободного формальдегида приводит к большим результатам, чем максимальная концентрация, установленная Директивой 76/768 / ЕЕС:

а) от 0,05% до 0,2% в немаркированном продукте;

b) если больше, чем 0,2% в продукте, маркированном или немаркированном, следует применять процедуру, описанную в пункте 5 настоящей главы.

5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ В НАЛИЧИИ ДОНОРОВ ФОРМАЛЬДЕГИДА

5.1. Принцип

Отдельный формальдегид преобразован в производный желтый лутидин путем реакции с пентан-2,4-дионом в реакторе с пост-колонкой и полученный производный обнаруживается путем поглощения при 420 nm.

5.2. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты и вода должна быть деминерализованная.

5.2.1. Вода чистоты ВЭЖХ или эквивалент качества.

5.2.2. Безводный ацетат аммония.

5.2.3. Концентрированная уксусная кислота.

5.2.4. Пентан-2,4-диона (хранившийся при 4 ° С).

5.2.5. Безводный динатрий фосфат.

5.2.6. Ортофосфорная кислота 85% (d = 1,7).

5.2.7. Метанол чистоты ВЭЖХ.

5.2.8. Дихлорметан.

5.2.9. Формальдегид 37 – 40% m/v.

5.2.10. Гидроксид натрия 1 М.

5.2.11. Соляная кислота 1 М.

5.2.12. Соляная кислота 0,002 М.

5.2.13.Свежеприготовленный раствор крахмала согласно Европейской Фармакопеи (см. 4.2.8).

5.2.14. Стандартный раствор йода 0,05 М.

5.2.15. Стандартный раствор тиосульфата натрия 0,1М.

5.2.16. Подвижная фаза:

Водный раствор динатрий фосфата (5.2.5) 0,006 М, корректируемый ортофосфорной кислотой (5.2.6) до рН 2,1.

5.2.17. Реагент пост-колонки

В мерной колбе объемом 1000 мл растворить:

- 62,5 г ацетата аммония (5.2.2);

- 7,5 мл уксусной кислоты (5.2.3);

- 5 мл пентан-2,4-диона (5.2.4).

Довести до объема в 1000 мл водой (5.2.1).

Этот реагент хранить вдали от света.

Время хранения: не более трех суток при 25° С.

Не должно наблюдаться изменения цвета.

5.2.18. Формальдегид стандарт: основной раствор

В 1 000 мл мерную колбу залить 10 г формальдегида (5.2.9) и довести до 1 000 мл водой.

Определить концентрацию раствора следующим образом:

Удалить 5,00 мл, добавить 25,00 мл стандартного раствора йода (5.2.14) и 10,00 мл гидроксида натрия (5.2.10).

Дать постоять в течение пяти минут.

Подкислить 11,00 мл HCl (5.2.11) и титровать избыток йода со стандартным раствором тиосульфата натрия (5.2.15), используя крахмал в качестве индикатора.

1 мл раствора йода (5.2.14) эквивалентен 1,5 мг формальдегида.

5.2.19. Формальдегид стандарт, разбавленный раствор:

Развести основной раствор до 1/100 от его исходной концентрации в подвижной фазе (5.2.16).

1 мл этого раствора содержит около 37 мг формальдегида.

Рассчитать точное содержание.

5.3. Оборудование

5.3.1. Стандартное лабораторное оборудование

5.3.2. Насос ВЭЖХ непульсирующий.

5.3.3. Непульсирующий насос низкого давления для реагента (или второй ВЭЖХ насос).

5.3.4. Инжектор с впрыском в10 µl.

5.3.5. Реактор пост-колонны со следующими компонентами:

- 1-литровая колба с тремя отверстиями;

- 1 л реторта;

- два столбца Vigreux, минимум 10 лотков, два из которых охлажденные воздухом;

- стальная трубка из нержавеющей стали на 1,6 мм (для теплового обмена), внутренний диаметр – 0,23 мм, длина – 400 мм;

- тефлоновая трубка на 1,6 мм, внутренний диаметр – 0,30 мм, длина 5 м, " трикотин "; см. приложение 1;

- Т-образный адаптор (тип valco или эквивалент);

- три адаптора;

Или: модуль пост-колонка Applied Biosystems PCRS 520 или эквивалент, снабженный реактором в 1 мл.

5.3.6. Мембранный фильтр с размером пор 0,45 µm.

5.3.7. SEP-PAKR С 18 картридж или эквивалент.

5.3.8. Заранее приготовленные колонны :

- Bishoff hipersil RP 18 (тип NCссылка C 25.46 1805);

- (5 µm, длина = 250 мм, внутренний диаметр = 4,6 мм);

- или Dupont Zorbax ODS;

- (5 µm, длина = 250 мм, внутренний диаметр = 4,6 мм);

- или Phase SEP, spherisorb ОРВ 2;

- (5 µm, длина = 250 мм, внутренний диаметр = 4,6 мм).

5.3.9. Пре-колонка

Bisсhoff К₁ hypersil RP 18 (ссылка К1 G 6301 1805) (5 µm, длина =-10 мм или эквивалент).

5.3.10. Колонка и пре-колонка соединена с помощью системы Ecotube (ссылка А 15020508 Bischoff) или эквивалент.

5.3.11.Собрать аппарат (5.3.5) в соответствии с блок-схемой, описанной в приложении 2.

Разъемы инжектора должны быть как можно короче. В этом случае трубка из нержавеющей стали между выходом реактора и входом детектора предназначена для охлаждения смеси до обнаружения, а температура в детекторе неизвестная, но постоянная.

5.3.12. УФ – детектор с видимым спектром.

5.3.13. Устройство для записи.

5.3.14. Центрифуга.

5.3.15. Ультразвуковая ванна.

5.3.16. Вибрационный шейкер (Vortex или эквивалент).

5.4. Процедура

5.4.1. Эталонная кривая

Достигается путем построения высот пиков в зависимости от концентрации стандарта формальдегида: разбавленного.

Стандартные растворы приготовить путем разбавления раствора – эталона формальдегида (5.2.19) с подвижной фазой (5.2.16):

- 1,00 мл раствора (5.2.19) разбавить до 20,00 мл (примерно 185 µg / 100 мл);

- 2,00 мл раствора (5.2.19) разбавить до 20,00 мл (приблизительно 370 µg / 100 мл);

- 5,00 мл раствора (5.2.19 разбавить до 20,00 мл (около 740 µg / 100 мл);

- 5,00 мл раствора (5.2.19) разбавить до 20,00 мл (приблизительно 925 µg / 100 мл).

Стандартные растворы хранятся в течение одного часа при лабораторной температуре и должны быть свежеприготовленными.

Линейность калибровочной кривой хороша для концентрации между 1,00 и 15,00 µg / мл.

5.4.2. Подготовка проб

5.4.2.1. Эмульсии (кремы, тональный крем, туш для ресниц)

В емкости с пробкой объемом в 100 мл взвесить с точностью до 0,001 г количество анализируемого вещества (m, граммы), соответствующее предполагаемому количеству 100 µg формальдегида. Добавить 20,00 мл дихлорметана (5.2.8) и 20,00 мл соляной кислоты (5.2.12), взвешенных с точностью. Смешать с помощью вибрационного шейкера (5.3.16) и ультразвуковой бани (5.3.15). Фазы разделить центрифугированием (3000 gⁿ в течение двух минут). Между тем промыть картридж (5.3.7) с 2 мл метанола (5.2.7) и затем кондиционировать с 5 мл воды (5.2.1).

Провести 4 мл экстракта из водной фазы через приготовленный картридж, удалить первые 2 мл и восстановить следующую фракцию.

5.4.2.2. Лосьоны, шампуни

В емкости с пробкой объемом в 100 мл взвесить с точностью до 0,001 г количество анализируемого вещества (m, граммы), соответствующего предполагаемому количеству 500 µg формальдегида.

Довести до 100 мл с подвижной фазой (5.2.16).

Раствор профильтровать через фильтр (5.3.6) и впрыснуть или провести через картридж (5.3.7), промытый как и раньше (5.4.2.1). Все растворы должны быть впрыснуты сразу после приготовления.

5.4.3. Хроматографические условия

- скорость потока подвижной фазы 1 мл / мин;

- поток реагента 0,5 мл / мин;

- общий расход на выходе из детектора 1,5 мл / мин;

- объем впрыска 10 мл;

- температура элюирования: в случае сложных разделений, погрузить колонну в ванну с растопленным льдом: ждать стабилизации температуры (15-20 мин);

- температура реакции пост- колонки: 100°С;

- обнаружение: 420 nm.

Примечание. Всю хроматографическую систему и пост-колонку необходимо обильно промыть водой после использования. Если система не используется в течение более чем двух дней, за этой процедурой должна последовать промывка метанолом (5.2.7). Перед восстановлением необходимо пропускать воду через систему 1, чтобы избежать рекристаллизации.

5.5. Расчет

Эмульсии (5.4.2.1):

Содержание формальдегида в % (m/m):

Лосьоны, шампуни:

В этом случае формула:

где:

m – масса анализируемого образца в г (5.4.2.1);

c – концентрация формальдегида в µg /100 мл, считываемая из калибровочной кривой (5.4.1).

5.6. Повторяемость⁽¹⁾

Для содержания формальдегида 0,05% разница между результатами двух параллельных измерений одной и той же пробы не должна превышать 0,001%.

Для содержания формальдегида 0,2% разница между результатами двух параллельных измерений одной и той же пробы не должна превышать 0,005%.

V. ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗОРЦИНА В ШАМПУНЯХ

И ЛОСЬОНАХ ДЛЯ ВОЛОС

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Настоящий метод позволяет определить резорцин путем газовой хроматографии в шампунях и лосьонах для волос. Метод пригоден для концентрации в пробе от 0,1 до 2,0% к массе.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание резорцина в пробе, определяемое в соответствии с настоящим методом, выражено в процентах массы.

3. ПРИНЦИП

Резорцин и 3,5-дигидрокситолуол (5-метилрезорцин), добавленный как внутренний стандарт, выделить из пробы с помощью тонкослойной хроматографии. Оба соединения изолируют путем вырезания их пятен с тонкослойной пластинки и экстракции метанолом. Затем извлеченные соединения высушивают, силилируют и определяют с помощью газовой хроматографии.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. Соляная кислота 25% (m/m).

4.2. Метанол.

4.3. Этанол 96% (v/v).

4.4. Пластины с силикагелем для тонкослойной хроматографии (пластиковые или алюминиевые), покрытые флуоресцентным индикатором. Дезактивируют следующим образом: предварительно покрытые диоксидом кремния пластины опрыскивать водой до появления глазури. Опрысканные пластины оставить высыхать на воздухе при комнатной температуре от одного до трех часов.

Примечание. Если пластины не дезактивированы, возможны потери резорцина в результате необратимой адсорбции кремния.

4.5. Проявляющий растворитель: ацетон – хлороформ – уксусная кислота (объемное соотношение 20:75:5).

4.6. Стандартный раствор резорцина: растворить 400 мг резорцина в 100 мл 96% этилового спирта (4.3) (1 мл соответствует 4000 µl резорцина).

4.7 Внутренний стандартный раствор: растворить 400 мг 3,5-дигидрокситолуола (ДНТ) в 100 мл 96% этилового спирта (4.3) (1 мл соответствует 4000 µl (ДНТ).

4.8. Стандартная смесь: в мерной колбе на 100 мл смешать 10 мл раствора, указанного в пункте 4.6 настоящей главы, и 10 мл раствора, указанного в пункте 4.7 настоящей главы, довести до метки 96% этанолом (4.3) и перемешать (1 мл соответствует 400 µg резорцина и 400 µg ДНТ).

4.9. Силилирующие агенты:

4.9.1. N, O-д (триметилсилил) трифторацетамид (BSTFA).

4.9.2. Гексаметилдисилазан (HMDS).

4.9.3. Триметилхлорсилан (TMCS).

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Стандартное лабораторное оборудование для тонкослойной хроматографии и газовой хроматографии.

5.2.Лабораторные изделия из стекла.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Приготовление пробы

6.1.1. В химическом стакане на 150 мл взвесить с точностью пробу продукта (m, граммы), который содержит примерно от 20 до 50 мг резорцина.

6.1.2. Подкислить соляной кислотой (4.1) пока смесь не станет кислотой (необходимо примерно от 2 до 4 мл), добавить 10 мл (40 мг ДНT) внутреннего стандартного раствора (4.7) и перемешать. Перенести с этанолом (4.3) в мерную колбу на 100 мл, довести до метки этанолом и перемешать.

6.1.3. Нанести 250 µl раствора (6.1.2) на дезактивированную пластинку, покрытую диоксидом кремния (4.4), в виде непрерывной линии длиной примерно 8 см. Линия должна быть максимально тонкой.

6.1.4. Нанести 250 µl стандартной смеси (4.8) на ту же пластинку и таким же образом (6.1.3).

6.1.5. В двух точках на исходной линии закапать по 5 µl каждого из растворов, указанных в пунктах 4.6 и 4.7 настоящей главы, для локализации после проявления пластинки.

6.1.6. Пластинку проявить в ненасыщенной ванне, заполненной проявляющим растворителем, указанным в пункте 4.5, пока фронт растворителя не достигнет 12 см от линии старта; как правило, это занимает примерно 45 минут. Пластинку просушить на воздухе и локализовать зону резорцина ДНТ коротковолновыми ультрафиолетовыми лучами (254 nm). Оба ингредиента имеют примерно одинаковые значения R_f. Отметить полосы карандашом на расстоянии 2 мм от внешнего темного края полос. Эти зоны удалить, а адсорбент каждой полосы собрать в бутылку на 10 мл.

6.1.7. Экстрагировать адсорбент, содержащий пробу и стандартную смесь, следующим образом:

Добавить 2 мл метанола (4.2) и экстрагировать в течение одного часа при непрерывном перемешивании. Смесь профильтровать и повторить экстракцию еще 2 мл метанола в течение 15 минут.

6.1.8. Полученные экстракты объединить и выпарить растворитель путем просушки в течение ночи в вакуумном эксикаторе, заполненном соответствующим осушителем. Не нагревать.

6.1.9.Осадок (пункт 6.1.8) силилировать, согласно пунктам 6.1.9.1 или 6.1.9.2 настоящей главы.

6.1.9.1. Микрошприцем добавить в смесь 200 µl BSTFA (4.9.1) и выдерживать в закрытом сосуде в течение 12 часов при комнатной температуре.

6.1.9.2. Микрошприцем добавить 200 µl HMDS (4.9.2) и 100 µl TMCS (4.9.3), смесь нагревать в закрытом сосуде в течение 30 минут при 60°С и охладить.

6.2. Газовая хроматография

6.2.1. Условия для хроматографирования

Колонка должна иметь разрешение R, равное или больше 1,5:

где:

Адекватными для газовой хроматографии и колонки являются следующие условия:

Для настройки потоков водорода и воздуха следовать инструкциям производителя.

6.2.2. В газовый хроматограф впрыснуть от 1 до 3 µl растворов, полученных в соответствии с пунктом 6.1.9 настоящей главы. Осуществить по пять впрысков для каждого раствора (6.1.9), измерить площади пиков, рассчитать их среднее значение и соотношение между площадями пиков: S – площадь пика резорцина/площадь пика ДНT.

7. РАСЧЕТ

Концентрация резорцина в пробе, выраженная в % массы (% m/m), рассчитывается по следующей формуле:

где:

М – масса исследуемой пробы в граммах (6.1.1);

S_пробы - среднее соотношение площадей пиков, согласно пункту 6.2.2 настоящей главы, для пробы;

S_{стандартная смесь} – среднее соотношение площадей пиков, согласно пункту 6.2.2 настоящей главы, для стандартной смеси.

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ⁽¹⁾

Для содержания резорцина примерно в 0,5% разница между результатами двух параллельных определений, проведенных на одной и той же пробе, не должна превышать абсолютную величину в 0,025%.

VI. ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕТАНОЛА

ПО ОТНОШЕНИЮ К ЭТАНОЛУ ИЛИ 2-ПРОПАНОЛУ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Настоящий метод описывает анализ путем газовой хроматографии метанола во всех видах косметических продуктов (в том числе в виде аэрозолей).

Могут быть определены относительные пределы от 0 до 10%.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание метанола, определенное в соответствии с настоящим методом, выражается в процентах к массе метанола по отношению к этанолу или 2-пропанолу.

3. ПРИНЦИП

Определение осуществлять путем газовой хроматографии.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. Метанол

4.2. Абсолютный этанол

4.3. 2-пропанол

4.4. Хлороформ, свободный от спиртов путем промывки водой

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Газовый хроматограф:

- с детектором катарометра для аэрозольных проб,

- с пламенно-ионизационным детектором для неаэрозольных проб.

5.2. Мерные колбы на 100 мл

5.3. Пипетки на 2 мл, 20 мл, от 0 до 1 мл

5.4. Микрошприцы от 0 до 100 µl и от 0 до 5 µl

(только для аэрозольных проб), специальные газонепроницаемые шприцы с запорным клапаном (см. процедуру отбора проб на рис. 5) (¹).

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Приготовление пробы

6.1.1. Отбор проб аэрозольных продуктов произвести в соответствии с главой II приложения № 1 к настоящему Регламенту и исследовать с помощью газовой хроматографии при условиях 1, описанных пунктом 6.2.1 настоящей главы.

6.1.2. Отбор проб неаэрозольных продуктов произвести в соответствии с вышеуказанной главой II, разбавить водой до концентрации 1-2% этанола или 2-пропанола, а затем исследовать с помощью газовой хроматографии при условиях, описанных пунктом 6.2. 2 настоящей главы.

6.2. Газовая хроматография

6.2.1.Для аэрозольных проб использовать детектор ( катарометр ).

6.2.1.1. Колонку наполнить 10% Hallcomid M18 на Chromosorb WAW с 100 – 200 ячеек.

6.2.1.2. Колонка должна обеспечить разрешение R, равное или больше 1,5:

где:

r₁ и r₂ – время удержания двух пиков в минутах;

w₁ и w₂ – ширина тех же пиков на половине высоты в мм;

d ‚- скорость вращения бумаги мм в минуту.

6.2.1.3. Условия, позволяющие достигнуть это разрешение:

Измерение площадей пиков можно улучшить путем электронной интеграции.

6.2.2. Для неаэрозольных образцов:

6.2.2.1. Колонку наполнить Chromosorb 105 или Porapak QS и использовать пламенно-ионизационный детектор.

6.2.2.2. Колонка должна обеспечить разрешение R, равное или больше 1,5:

где:

6.2.2.3. Условия, позволяющие достигнуть это разрешение:

7. Стандартный график

7.1. Для процедуры газовой хроматографии 6.2.1 (колонка Hallcomid M18) используют следующие стандартные смеси. Приготовить эти смеси путем измерения пипеткой, но точное количество определить путем немедленного взвешивания пипетки или колбы после каждого добавления.

В хроматограф впрыснуть от 2 до 3μl, согласно условиям, описанным в пункте 6.2.1.

Рассчитать соотношение площадей пиков (метанол/этанол) или (метанол/2-пропанол) для каждой смеси. Нарисовать стандартный график, используя:

7.2. Для процедуры газовой хроматографии (Porapak QS или Chromosorb 105), указанной в пункте 6.2.2, использовать следующие стандартные смеси. Приготовить эти смеси путем измерения пипеткой, но точное количество определить путем немедленного взвешивания пипетки или колбы после каждого добавления.

В хроматограф впрыскивают от 2 до 3 μl согласно условиям, описанным в пункте 6.2.2 настоящей главы.

Рассчитать соотношение площадей пиков (метанол/этанол) или (метанол/2-пропанол) для каждой смеси. нарисовать стандартный график, используя:

7.3. Калибровочный график должен представлять прямую линию.

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ (¹)

Для содержания метанола в 5% по отношению к этанолу или 2-пропанолу разница между результатами двух параллельных определений не должна превышать 0,25%.

Приложение 1

ИНСТРУКЦИЯ ПО "ТРИКОТИНУ"

НЕОБХОДИМЫЕ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ

- деревянная катушка:

- наружный диаметр 5 см с отверстием 1,5 см в диаметре, проведенном через центр. Поместить 4 стальных гвоздя (как показано на рисунках 1 и 2). Расстояние между двумя гвоздями должно быть 1,8 см и они должны быть 0,5 см от отверстия;

- одна жесткая игла (типа крючок) для того, чтобы связать тефлоновую трубку;

- тефлоновая трубка 1,6 мм с внутренним диаметром в 0,3 мм и длиной 5 м.

ПРОЦЕДУРА

Чтобы начать "трикотин" тефлоновую трубку надо расположить с верхней части катушки в сторону нижней части, через центральное отверстие, таким образом, чтобы трубка вышла через нижнюю часть катушки на 10 см, позволяя вытягивать цепочку во время процесса, а затем обернуть трубку вокруг четырех гвоздей, как показано на рис. 3.

Верхние и нижние части "трикотина" защищены металлическими кольцами и сжимающими винтами; следует позаботиться, чтобы не сломать тефлон при плотном натяжении. Обернуть трубку вокруг каждого гвоздя во второй раз и сделать " стежки " следующим образом:

- с помощью крючка поднимается нижняя трубка над верхней трубкой (рис.4). Повторить этот процесс на каждом из 4 гвоздей в порядке (1, 2, 3, 4 в направлении против часовой стрелки), до 5 м или на нужную длину "трикотина".

Оставить около 10 см от трубки, чтобы закрыть цепочку.

Позиционировать трубку через каждые из четырех петель и осторожно протянуть, чтобы закрыть цепочку.

Примечание. Трикотин, созданный для реактора пост-колонки, доступен и на рынке (Supelco).

Схема катушки

Приложение 2

1 = ВЭЖХ насос

2 = Инжектор

3 = Колонка с предварительной колонкой

4 = Насос для реагента

5 = Тройник без объема

5 '= Тройник (Vortex)

6-6 ' = Соединение без объема

7 = "Трикотин"

7 '. = Реактор

8 = Трехгорловую колбу с горячей водой

9 = Реторта

10 = Хладагент

11 = Труба теплообменника из нержавеющей стали

11 ' = Теплообменник

12 = Детектор видимого УФ - спектра

13. = Модуль пост - колонки ГКДЗ = 520

5.3.5

5.3.6

___________________________

( ¹ ) JO L 262, 27.9.1976, p. 169.

( ² ) JO L 192, 31.7.1979, p. 35.

( ³ ) JO L 383, 31.12.1980, p. 27.

( ⁴ ) Посмотреть стандарт ISO 5725.

( ⁶ ) ISO 5725.

( ⁹ ) JO L 383, 31.12.1980, p. 27.

Приложение № 12

к Санитарному Регламенту

о косметических продуктах

МЕТОДЫ АНАЛИЗА,

необходимые для проверки состава косметической продукции (III)

Методы анализа, необходимые для проверки состава косметической продукции (далее – методы), приведены полностью в соответствие с положениями третьей Директивы от 27 сентября 1983 года о сближении законов государств – членов, относящихся к методам анализа, необходимого для проверки состава косметической продукции (83/514/ЕЕС), опубликованной в Официальном Журнале Европейского Сообщества (JOCE) № L 291/9 от 24 октября 1983 г.

I. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДИХЛОРМЕТАНА

И 1,1,1–ТРИХЛОРЭТАНА

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает определение дихлорметана (метиленхлорид) и 1,1,1–трихлорэтана (метилхлороформ) во всех косметических продуктах, которые могут содержать эти растворители.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание дихлорметана и 1,1,1-трихлорэтана, присутствующих в пробе, определенных с помощью этого метода, выражается в процентах массы продукта.

3. ПРИНЦИП

Метод использует газовую хроматографию с хлороформом в качестве внутреннего стандарта.

4. РЕАКТИВЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. Хлороформ (CHCl₃).

4.2. Четыреххлористый углерод (CCl₄).

4.3. Дихлорметан (CH₂Cl₂).

4.4. 1,1,1-трихлорэтан (CH₃ CCl₃).

4.5. Ацетон.

4.6. Азот.

5. АППАРАТУРА

5.1. Стандартное лабораторное оборудование.

5.2. Газовый хроматограф, оснащенный детектором по теплопроводности.

5.3. Мерные колбы от 50 до 100 мл (метод отбора проб, согласно приложению № 1 к данному Регламенту)

5.4. Шприц со сжатым газом объемом от 25 до 50 (см. метод отбора проб, согласно пункту 5.4.2.2 приложения № 1 к данному Регламенту.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Проба, которая не находится под давлением: взвесить с точностью в конической колбе с пробкой. Ввести точно взвешенное количество хлороформа (4.1) в качестве внутреннего стандарта, эквивалентное предполагаемому количеству дихлорметана и 1,1,1-трихлорэтана, присутствующих в пробе. Тщательно перемешать.

6.2. Сжатая проба: использовать метод отбора проб, описанный в соответствующей главе, но со следующими уточнениями:

6.2.1. После переноса пробы в мерную колбу (5.3) ввести дополнительный объем хлороформа (4.1) в качестве внутреннего стандарта, эквивалентный предполагаемому количеству дихлорметана и 1,1,1–трихлорэтана, присутствующих в пробе. Тщательно перемешать. Промыть объем шприца (инжектора) с 0,5 мл четыреххлористого углерода (4.2). После просушки по разнице точно определить массу введенного внутреннего стандарта.

6.2.2. После заполнения шприца пробой сопло шприца продувается азотом (4.6) так, чтобы не осталось никакого остатка перед инъекцией в хроматограф.

6.2.3. После каждого отбора проб шприц несколько раз промыть ацетоном (4.5) (с помощью шприца для подкожных инъекций), а затем тщательно высушить в потоке азота (4.6).

6.2.4. Для каждого анализа использовать две параллельные пробы и в каждой провести по пять измерений.

7. ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ УСЛОВИЯ

7.1. Предколонка

Трубка из нержавеющей стали.

-длина 300 мм;

-диаметр 3 или 6 мм;

-упаковка из материала, что используется для наполнения аналитической колонки.

7.2. Колонка

Неподвижная (стационарная) фаза состоит из Hallcomid M 18 на хромосорбе. Колонка должна обеспечивать разрешение R, равно или больше 1,5.

,

где:

r ₁ и r₂ - время удерживания (в минутах);

W ₁ и W ₂ - ширина пика на половине высоты (в миллиметрах);

d ‚ – скорость вращения (в миллиметрах в минуту).

Примеры колонок, которые обеспечивают требуемые результаты:

Температурные условия могут отличаться в зависимости от типа оборудования. Например, следующие условия:

8.СМЕСЬ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФАКТОРОВ ОТКЛИКА

В закупоренной конической колбе взвесить с точностью следующую смесь:

Дихлорметан (4,3), 30% (m/m).

1,1,1-трихлорэтан (4,4), 35% (m/m ).

Хлороформ (4,1), 35% (m/m).

9. РАСЧЕТ

9.1. Расчет фактора отклика вещества "р" по отношению к веществу "а", выбранному в качестве внутреннего стандарта,

первое вещество представляет собой "р",

где:

к _р – коэффициент отклика;

m _р - масса в смеси;

А _р - площадь пика.

Второе вещество представляет собой "а", где:

к_а - коэффициент отклика (приравнивается к единице);

М_а - масса в смеси;

A_a - площадь пика;

тогда:

В качестве примера, были получены следующие факторы отклика (для хлороформа: к = 1):

9.2. Расчет % (m/m) дихлорметана и 1,1,1-трихлорэтана, присутствующих в анализируемой пробе:

где:

m_a - масса введенного хлороформа (в граммах) ;

М _s - масса анализируемой пробы (в граммах);

A_a – площадь пика хлороформа;

A₁ - площадь пика дихлорметана;

A₂ - площадь пика 1,1,1-трихлорэтана,

тогда:

10. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ^(²)

При содержании дихлорметана и/или 1,1,1-трихлорэтана 25 % (m/m), разница между результатами двух определений, проведенных параллельно с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютного значения 2,5 % (m/m).

II. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ХИНОЛИН-8-ОЛА

И BIS(8-HYDROXYQUINOLINIUM) СУЛЬФАТ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает идентификацию и количественное определение хинолин-8-ола и его сульфата

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение хинолин-8-ола и бис (8-гидрокси хинолин) сульфата в пробе этим методом выражается в процентах массы хинолин-8-ола.

3. ПРИНЦИП

3.1. Идентификация

Идентификация выполняется с помощью тонкослойной хроматографии.

3.2. Определение

Определение осуществляется с помощью анализа спектрофотометрии комплекса, полученного в результате реакции с раствором Фелинга при 410 nm.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. Хинолин-8-ол.

4.2. Бензол. Учитывая токсичность продукта при работе с бензолом необходимо действовать крайне осторожно.

4.3. Хлороформ.

4.4. Раствор гидроксида натрия, 5% (m/m).

4.5. Пентагидрат сульфата меди.

4.6. Калий- натрия тартрат .

4.7. Соляная кислота 1 М.

4.8. Серная кислота 0,5 М.

4.9. Раствор гидроксида натрия М.

4:10. Этанол.

4:11. Бутан-1-ол.

4:12. Ледяная уксусная кислота.

4.13. Соляная кислота 0,1 М.

4:14. "Целит 545" или эквивалент.

4.15. Стандартные растворы

4.15.1. В 100 мл мерной колбе взвесить 100 мg хинолин-8-ола (4.1). Растворить в небольшом количестве серной кислоты (4.8). Довести до метки серной кислотой (4.8) и перемешать.

4.15.2. В 100 мл мерной колбе взвесить 100 мg хинолин-8-ола. Растворить в этаноле (4.10). Довести до метки этанолом (4.10) и перемешать.

4.16. Раствор Фелинга

Раствор А

В 100 мл мерной колбе взвесить 7 г пентагидрата сульфата меди (4.5). Растворить в небольшом количестве воды. Довести до метки водой и перемешать.

Раствор B

В 100 мл мерной колбе взвесить 35 г натриевого тартрата калия (4.6). Растворить в 50 мл воды. Добавить 20 мл раствора гидроксида натрия (4.4). Довести до метки водой и перемешать. Непосредственно перед использованием в 100 мл мерную колбу добавить пипеткой 10 мл раствора А и 10 мл раствора В, довести до метки 100 мл и перемешать.

4.17. Элюирующие растворители для тонкослойной хроматографии

I: бутан-1-ол (4.11)/уксусная кислота (4.12)/вода (80:20:20; v/v/v);

II: хлороформ (4.13)/уксусная кислота (4.12) (95: 5; v/v).

4.18. 2,6-дихлор-4-(хлоромино) циклогексил-2,5-dienol, 1% (m/v) раствор в этаноле (4.10).

4.19. Карбонат натрия, 1% раствор в воде (m/v).

4.20. Этанол (4.10), 30% раствор в воде (v/v).

4.21. Динатрия дигидрофосфат этилендиаминтетрауксусной кислоты, 5% раствор в воде (m/v).

4.22. Буферный раствор, рН 7

В мерной колбе объемом один литр взвесить 27 г безводного калия дигидрофосфата 70 г тригидрата дигидрофосфата калия (однозамещенного). Довести до метки водой.

4.23. Пластины для тонкослойной хроматографии

Готовые пластины толщиной 0,25 мм (например, Merck Kieselgel 60 или эквивалент). Перед использованием пластины опрыскать 10 мл реагента (4.21) и сушить при 80°С

5. АППАРАТУРА

5.1. 100 мл круглодонная колба с матовым стеклом.

5.2. Мерные колбы.

5.3. Пипетки градуированные, 10 и 5 мл.

5.4. Пипетки, 20, 15, 10 и 5 мл.

5.5. Делительные воронки, 100, 50 и 25 мл.

5.6. Гофрированная фильтровальная бумага, диаметр 90 мм.

5.7. Роторный испаритель.

5.8. Нагревание с обратным холодильником со шлифом.

5.9. Спектрофотометр.

5.10. Оптические кюветы, длина пути 10 мм.

5:11. Мешалка.

5.12. Размеры стеклянной колонки для хроматографии: длина 160 мм и диаметр 8 мм, сужение в нижней части, заполненное пробкой из стекловаты и верхний адаптер для приложения давления.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Идентификация

6.1.1. Жидкие пробы

6.1.1.1. Довести рН испытуемой пробы до 7,5 и 10 µl и нанести на стартовую линию предварительно подготовленной пластинки (4.23).

6.1.1.2. Пипеткой нанести по 10 и 30 µl стандартного раствора (4.15.2) на две точки исходной линии, после чего пластинку развивать в одном из двух элюентов (4.17).

6.1.1.3. Когда фронт растворителя достигнет высоты верхнего края на 150 mm, извлечь пластинку и сушить при 110°С (более 15 мин). В УФ-свете (366 nm) пятнa хинолин-8-ола светятся желтым цветом.

6.1.1.4. Пластинку опрыскать раствором карбоната натрия (4.19). Сушить и опрыскать раствором 2,6-дихлор-4- (хлоримино) циклогексил-2,5-dienol (4.18). Хинолин-8-ол становится видимым в виде синего пятна.

6.1.2. Твердые пробы или кремы

6.1.2.1. 1г пробы диспергировать в 5 мл буферного раствора (4.22). Затем перевести с 10 мл хлороформа (4.3) в делительную воронку и встряхнуть. После отделения слоя водный слой экстрагировать еще два раза с 10 мл хлороформа (4.3). Экстракты комбинированного и фильтрованного хлороформа. Выпарить почти досуха в 100 мл круглодонной колбе (5.1) на роторном испарителе (5.7). Осадок растворить в 2 мл хлороформа (4.3) и полученный раствор нанести на тонкослойную пластину силикагеля по 10 и 30 µl (4.23) в соответствии с методом, описанным пунктом 6.1.1.1 настоящей главы.

6.1.2.2. Нанести на пластину 10 и 30 µl стандартного раствора (4.15.2) и продолжить, как описано в пунктах 6.1.1.2 – 6.1.1.4 настоящей главы.

6.2. Определение

6.2.1. Жидкие пробы

6.2.1.1. В круглодонной колбе на 100 мл взвесить 5 г пробы. Добавить 1 мл раствора серной кислоты (4.8), и выпарить смесь почти досуха при пониженном давлении и температуре 50°С.

6.2.1.2. Этот остаток растворить в 20 мл теплой воды. Раствор перенести в мерную колбу на 100 мл. Промыть три раза с 20 мл воды. Довести до 100 мл водой и перемешать.

6.2.1.3.Добавить пипеткой 5 мл данного раствора в делительную воронку на 50 мл (5.5). Добавить 10 мл раствора Фелинга (4.16). Экстрагировать комплекс хинолин-8-ол-Сupru[оксин меди (ISO)], полученный частями по 8 мл хлороформа (4.3).

6.2.1.4. Отфильтрованные фазы хлороформа объединить в мерной колбе на 25 мл (5.2). Довести до метки хлороформом(4.3) и перемешать. Измерить оптическую плотность желтого раствора в сравнении с хлороформом при длине волны 410 nm.

6.2.2. Твердые пробы или кремы

6.2.2.1. В 100 мл круглодонной колбе (5.1) взвесить 0,500 г пробы. Добавить 30 мл бензола (4.2) и 20 мл соляной кислоты (4.7). Содержимое колбы кипятить до рефлюкса, перемешивая в течение 30 мин.

6.2.2.2. Содержимое колбы перенести в 100 мл делительную воронку (5.5). Промыть HCl 5мл раствора соляной кислоты (4.7). Водную фазу перенести в круглодонную колбу (5.1), фазу бензола промыть 5 мл соляной кислоты (4.7).

6.2.2.3. В случае эмульсий, которые затрудняют продолжение анализа, добавить 0,500г пробы, смешанной с 2 г Celite 545 (4.14), для получения свободно текучего порошка. Смесь перенести небольшими порциями в стеклянную хроматографическую колонку (5.12).

После каждого добавления утрамбовать содержимое колонки. Сразу после ввода смеси в колонку элюирование проводят с соляной кислотой (4.13) так , чтобы 10 мл элюата было получено примерно через 10 минут (при необходимости, данная смесь может быть элюирована в атмосфере азота под небольшим давлением). Во время элюации необходимо обеспечить постоянное наличие поверх колонки некоторого количества соляной кислоты. Первые 10 мл элюата подвергнуть дальнейшей обработке, как описано в пункте 6.2.2.4 настоящей главы.

6.2.2.4. Собранные водные фазы (6.2.2.2) или элюат (6.2.2.3) испарять почти досуха на роторном испарителе при пониженном давлении.

6.2.2.5. Остаток растворить в 6 мл раствора гидроксида натрия (4.9). Добавить 20 мл раствора Фелинга (4.16) и содержимое колбы перенести в 50 мл делительную воронку (5.5). Колбу промыть 8 мл хлороформа (4.3). Встряхнуть и профильтровать слой хлороформа в мерной колбе на 50 мл (5.2).

6.2.2.6. Повторить экстрагирование три раза с 8 мл хлороформа (4.3). Слой хлороформа профильтровать и собрать в колбу на 50 мл. Довести до метки хлороформом (4.3) и перемешать. Провести измерение оптической плотности желтого раствора при длине волны 410 nm в сравнении с хлороформом (4.3).

7. СТАНДАРТНАЯ КРИВАЯ

В четыре 100 мл круглодонные колбы (5.1), каждая из которых содержит 3 мл 30% водного раствора этанола (4.20), добавить по 5, 10, 15 и 20 мл стандартного раствора (4.15.1), что соответствует 5, 10, 15 и 20 мг хинолин-8-ола. Анализ провести в соответствии с описанием в пункте 6.2.1 настоящей главы.

8. РАСЧЕТ

8.1. Жидкие пробы

Содержание 8-хинолин-ола

где:

a – количество в миллиграммах 8-хинолин-ола на стандартной кривой (7);

m – масса (в миллиграммах) испытуемой пробы (6.2.1.1).

8.2. Твердые пробы или кремы

Содержание 8-хинолин-ол (в % m/m),

где:

a – количество в миллиграммах 8-хинолин-ола на стандартной кривой (7);

m – масса (в миллиграммах) испытуемого образца (6.2.1.1).

9. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

При содержании около 0,3% 8-хинолинола разность между результатами двух измерений, выполненных с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютного значения 0,02 %.

III. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АММИАКА

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает определение свободного аммиака в косметических продуктах.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание аммиака в пробе, определенное в соответствии с этим методом, выражено в процентах массы аммиака.

3. ПРИНЦИП

Раствор хлорида бария добавить к части испытуемого косметического средства, растворенного в водной среде метанола. Любой осадок, который может образоваться, следует профильтровать или центрифугировать. С помощью этой процедуры, в ходе перегонки с паром, можно избежать потери аммиака из некоторых аммониевых солей, таких как карбонат и бикарбонат, гидрокарбонат и соли жирных кислот, за исключением ацетата аммония.

Аммиак из фильтрата или надосадочной жидкости перегнать с водяным паром и определить потенциометрическим титрованием или другим путем.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. Метанол.

4.2. Барий хлорид дигидрат, 25% (m/v) раствор.

4.3. Орто-борная кислота, 4% (m/v) раствор.

4.4. Серная кислота, 0,25 М стандартный раствор.

4.5. Пеногаситель жидкости.

4.6. Гидроксид натрия, 0,5 М стандартный раствор.

4.7. Индикатор, если необходимо, смешать 5 мл 0,1% (m/v) раствора метил красного в этаноле с 2 мл 0,1% (m/v) водного раствора метиленовой синьки.

5. АППАРАТУРА

5.1. Стандартное лабораторное оборудование.

5.2. Центрифуга с пробирками на 100 мл.

5.3. Аппарат для паровой дистилляции.

5.4. Потенциометр.

5.5. Индикаторный стеклянный электрод и электрод сравнения хлорида ртути (каломельный).

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. В 100 мл колбе взвесить массу (m) пробы, соответствующей как максимум 150 mg аммиака.

6.2. Добавить 10 мл воды, 10 мл метанола (4.1) и 10 мл раствора хлорида бария (4.2). Довести до 100 мл метанолом (4.1).

6.3. Смешать и оставить на ночь в холодильнике (5 ° С).

6.4. Профильтровать или центрифугировать еще холодный раствор в закрытой пробирке в течение 10 минут, чтобы получить прозрачный фильтрат или надосадочную жидкость.

6.5. В паровой перегонный аппарат (5.3) добавить пипеткой 40 мл прозрачного раствора, а затем 0,5 мл пеногасителя жидкости (4.5).

6.6. Дистиллировать и собирать 200 мл дистиллята в 250 мл стакане, содержащем 10 мл стандартного раствора серной кислоты (4.4) и 0,1 мл индикатора (4.7).

6.7. Избыток кислоты титровать повторно стандартным раствором гидроксида натрия (4.6).

Примечание: для потенциометрического определения 200 мл дистиллята собрать в 250 мл стакан, содержащий 25 мл раствора ортоборной кислоты (4.3), и титровать стандартным раствором серной кислоты (4.4).

7. РАСЧЕТ

7.1. Расчет в случае повторного титрования

где:

V ₁ - объем (в миллилитрах) в растворе едкого натрия(4.6);

М ₁ - его фактическая молярность (4.6);

М ₂ - фактический коэффициент молярности раствора серной кислоты (4.4);

m – масса (в миллиграммах) в пробе, взятой для анализа (6.1),

где:

7.2. Расчет в случае прямого потенциометрического титрования

где:

V ₂ - объем (в миллилитрах) раствора серной кислоты (4.4);

М ₂ - его фактическая молярность (4.4);

m – масса (в миллиграммах) испытуемой взятой пробы (6.1),

где:

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

При содержании аммиака около 6% разница между результатами двух параллельных испытаний, проведенных с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютного значения 0,6%.

IV. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ НИТРОМЕТАНА

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод применяется для идентификации и определения ниже или равной 0,3% содержания нитрометана в косметических продуктах в аэрозольных баллонах.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание нитрометана в пробе, определенное в соответствии с этим способом, выражено в процентах массы нитрометана из общего содержания аэрозольного распылителя.

3. ПРИНЦИП

Нитрометан идентифицируется цветной реакцией. Нитрометан определяется с помощью газовой хроматографии после добавления внутреннего стандарта.

4. ИДЕНТИФИКАЦИЯ

4.1. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1.1. Гидроксид натрия, 0,5 М раствор.

4.1.2. Реагент Фолина.

Растворить 0,1г 3,4-дигидро-3,4-диоксинафталин-1-сульфонат натрия в воде и разбавить до 100 мл.

4.2. Процедура

К 1 мл пробы добавить 10 мл раствора, указанного в пункте 4.1.1, и 1 м раствора, указанного в пункте 4.1.2 настоящей главы. На присутствие нитрометана указывает окрашивание в фиолетовый цвет.

5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

5.1. Реактивы

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

5.1.1. Хлороформ (внутренний стандарт 1).

5.1.2. 2,4-диметилгептан (внутренний стандарт 2).

5.1.3. Этанол 95%.

5.1.4. Нитрометан.

5.1.5. Стандартный раствор хлороформа

В мерную колбу на 25 мл поместить 650 мг хлороформа (5.1.1). Колбу и ее содержимое повторно с точностью взвесить. Довести до 25 мл 95% этанолом (5.1.3). Взвесить и рассчитать содержание хлороформа в этом растворе в % массы.

5.1.6. Стандартный раствор 2,4-диметилгептана

Приготовить такой же стандартный раствор хлороформа, но в 25 мл мерной колбе взвесить 270 мг 2,4-диметилгептана (5.1.2).

5.2. Оборудование

5.2.1. Газовый хроматограф с пламенно-ионизационным детектором.

5.2.2. Устройство для отбора проб аэрозолей (мерные колбы, разъемы к микрошприцам и т.д.), как описано в главе III приложения № 1 к настоящему Регламенту.

5.2.3. Стандартное лабораторное оборудование.

5.3. Процедура

5.3.1. Подготовка пробы

В 100 мл мерной колбе взвесить или перенести в соответствии с процедурой, описанной в пункте 5 главы III приложения № 10 к настоящему Регламенту, примерно 5 мл любого из внутренних стандартных растворов (5.1.5 или 5.1.6). Использовать стеклянный шприц объемом 10 или 20 мл, без иглы, приспособленный к передаче по методу, описанному в пункте 5 главы III настоящего Регламента.

Повторно взвесить, чтобы определить количество введенного раствора. Используя ту же самую методику, в колбу добавить около 50 г содержимого аэрозольного распылителя. Повторно взвесить для определения количество перенесенной пробы и хорошо перемешать.

Ввести около 10 µl специальным микрошприцем (5.2.2).Сделать пять впрысков.

5.3.2. Приготовление стандарта

В мерной колбе объемом 50 мл взвесить с точностью около 500 мг нитрометана (5.1.4) или 500 мг хлороформа (5.1.1) или 210 мг 2,4-диметилхептана (5.1.2). Довести до метки 95% этанолом (5.1.3) и хорошо перемешать. Переместить 5 мл этого раствора в мерную колбу объемом 20 мл. Довести до метки 95% этанола (5.1.3).

Микрошприцем (5.2.2) ввести около 10 µl и сделать пять впрысков.

5.3.3. Условия хроматографирования

5.3.3.1. Колонка

Колонка состоит из двух частей, первая заполнена дидецилфталатом на газе Chrom Q, а вторая – UCON 50 HB 280Х на газе Chrom Q как наполнителе, подготовленная таким образом колонка должна дать разрешение R, равное или больше 1,5, где:

где:

r₁ и r₂ - время удерживания (в минутах);

W₁ и W₂ - ширина пика на половине высоты (в миллиметрах);

d ‚ – скорость вращения (в миллиметрах в минуту);

Например, следующие две части дают требуемое разрешение:

Колонка A:

Колонка B:

5.3.3.2. Детектор

Адекватная настройка чувствительности электрометра детектора с ионизацией пламенем составляет 8 × 10 ^-10 А.

5.3.3.3. Температурные условия

адекватные условия:

5.3.3.4. Заправка соответствующим газом

Газ-носитель: азот.

6. РАСЧЕТ

6.1. Коэффициент чувствительности нитрометана, рассчитанный по отношению к использованному внутреннему стандарту

Если "n " представляет нитрометан,

где:

k_n - коэффициент его отклика;

m′_n - его масса (в граммах) в смеси;

S′_n - его площадь пика.

Если "с" представляет собой внутренний стандарт, хлороформ или 2,4 диметилгептан,

где:

m′_c - его масса (в граммах) в смеси,

S _‚с - его площадь пика,

где:

(kr_n зависит от функции камеры).

6.2. Концентрация нитрометана в пробе

Если "n" представляет нитрометан,

где:

к _n - его коэффициент отклика,

S _n - его площадь пика.

Если "с" представляет собой внутренний стандарт, хлороформ или 2,4 диметилгептан,

где:

m _с - его масса (в граммах) в смеси,

S _с - его площадь пика,

М – масса (в граммах) перенесенного аэрозоля, тогда процент (m/m) нитрометана в пробе равен:

7. ПОВТОРЯЕМОСТЬ (¹)

При содержании нитрометана приблизительно 0,3% (m/m) разница между результатами двух параллельных испытаний, проведенных c одной и той же пробой, не должна превышать абсолютного значения 0,03% (m/m).

V. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕРКАПТОУКСУСНОЙ

КИСЛОТЫ В ПРОДУКТАХ ДЛЯ ЗАВИВКИ, ВЫПРЯМЛЕНИЯ ВОЛОС

И СРЕДСТВАХ ДЕПИЛЯЦИИ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Данный метод описывает идентификацию и определение меркаптоуксусной кислоты в продуктах для завивки, выпрямления и удаления волос, которые могут содержать и другие восстановители.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание меркаптоуксусной кислоты в пробе, определяемой в соответствии с этим способом, выражено в процентах массы меркаптоуксусной кислоты.

3. ПРИНЦИП

Меркаптоуксусная кислота идентифицируется путем анализа тонкослойной хроматографии и определяется йодометрией или газовой хроматографией.

4. ИДЕНТИФИКАЦИЯ

4.1. Идентификация капельным титом

4.1.1. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1.1.1. Индикаторная бумага с диацетатом свинца.

4.1.1.2. Раствор соляной кислоты (один объем концентрированной соляной кислоты плюс один объем воды).

4.1.2. ПРОЦЕДУРА

4.1.2.1. Идентификация меркаптоуксусной кислоты по цветной реакции с диацетатом свинца.

Одну каплю пробы нанести на бумагу с диацетатом свинца (4.1.1.1). Если появляется интенсивный желтый цвет, то возможно наличие меркаптоуксусной кислоты.

Чувствительность: 0,5%.

4.1.2.2. Характеристика неорганических сульфидов с образованием сероводорода при подкислении

В пробирку внести несколько миллиграммов пробы для анализа. Добавить 2 мл дистиллированной воды и 1 мл соляной кислоты (4.1.1.2). Освобождается сульфид, узнаваемый по запаху, а на бумаге с диацетатом свинца (4.1.1.1) образовывается сульфид свинца в виде осадка черного цвета.

Чувствительность: 50 ppm.

4.1.2.3. Характеристика сульфитов посредством образования диоксида серы при подкислении

Процедура протекает в соответствии с пунктом 4.1.2.2. Довести до кипения. Диоксид серы можно распознать по запаху и его восстановительным свойствам, например, по отношению к ионам перманганата.

4.2. Идентификация с помощью тонкослойной хроматографии

4.2.1. Реагенты

Все реагенты, за исключением тех, для которых указано иное, должны быть аналитической чистоты.

4.2.1.1. Меркаптоуксусная кислота (тиогликолевая кислота), минимум 98% чистоты, определяется йодометрически.

4.2.1.2. 2,2′-дитиодиацетат (уксусной) кислоты, минимум 99% чистоты определяется йодометрическим методом.

4.2.1.3. 2-меркаптопропионовая кислота (тиомолочная кислота), минимум 95% чистоты, определяется йодометрией.

4.2.1.4. 3-меркаптопропионовая кислота, минимум 98% чистоты, определяется йодометрией.

4.2.1.5. 3-меркаптопропил-1,2-диол(1-тиоглицерин), минимум 98% чистоты, определяется йодометрией.

4.2.1.6. Готовые тонкослойные пластины на силикагеле толщиной 0,25 мм.

4.2.1.7. Тонкослойные пластины с оксидом алюминия, Меrck F254 Е или эквивалент.

4.2.1.8. Соляная кислота, концентрированная d²⁰₄ = 1,19 г / мл.

4.2.1.9. Этилацетат.

4.2.1.10. Хлороформ.

4.2.1.11. Диизопропиловый эфир.

4.2.1.12. Четыреххлористый углерод.

4.2.1.13. Ледяная уксусная кислота.

4.2.1.14. Йодид калия, 1% (m/v) раствор в воде.

4.2.1.15. Четыреххлористая платина, 0,1% (m/v) раствор в воде.

4.2.1.16. Подвижные фазы

4.2.1.16.1. Этилацетат (4.2.1.9), хлороформ (4.2.1.10), диизопропиловый эфир (4.2.1.11), уксусная кислота (4.2.1.13) (20: 20: 10: 10 объемов).

4.2.1.16.2. Хлороформ (4.2.1.10), уксусная кислота (4.2.1.13) (90:20 объемов).

4.2.1.17. Реагенты для обнаружения

4.2.1.17.1. Непосредственно перед использованием смешать равные объемы раствора (4.2.1.14) и раствора (4.2.1.15).

4.2.1.17.2. Раствор брома, 5% (m/v):

5 г брома растворить в 100 мл четыреххлористого углерода (4.2.1.12).

4.2.1.17.3. Раствор флуоресцеина, 0,1% (m/v):

100 мл флуоресцеина растворить в 100 мл этанола.

4.2.1.17.4. Гексааммония гептамолибдат, 10% (m/v) раствор в воде.

4.2.1.18. Стандартные растворы

4.2.1.18.1. Меркаптоуксусная кислота (4.2.1.1), 0,4% (m/v) раствор в воде.

4.2.1.18.2. 2,2′-дитиоди(уксусная кислота) (4.2.1.2), 0,4% (m/v) раствор в воде.

4.2.1.18.3. 2-меркаптопропионовая кислота (4.2.1.3), 0,4% (m/v) раствор в воде.

4.2.1.18.4. 3-меркаптопропионовая кислота (4.2.1.4), 0,4% (m/v) раствор в воде.

4.2.1.18.5. 3-меркаптопропил-1,2-диол (4.2.1.5), 0,4% (m/v) раствор в воде.

4.2.2. Оборудование

Стандартное оборудование для тонкослойной хроматографии.

4.2.3. Процедура

4.2.3.1. Обработка проб

Подкислить до рН 1 добавлением нескольких капель соляной кислоты (4.2.1.8) и при необходимости профильтровать.

В некоторых случаях желательно разбавить пробу. Для этого, перед разбавлением, подкислить хлористоводородной кислотой.

4.2.3.2. Хроматография

Нанести на пластинку 1 µl раствора пробы (4.2.3.1) и по 1 µl каждого из пяти стандартных растворов (4.2.1.18). Тщательно просушить в легком потоке азот элюировать пластину растворителями (4.2.1.16.1 или 4.2.1.16.2). Просушить пластину как можно быстрее, чтобы минимизировать окисление тиолов.

4.2.3.3. Обнаружение

Опрыскать пластину одним из трех реагентов (4.2.1.17.1, 4.2.1.17.3 или 4.2.1.17.4). Если пластину опрыскать реагентом (4.2.1.17.3), затем ее необходимо обрабатывать парами брома (например, в емкости с небольшим стаканом реагента (4.2.1.17.2) до тех пор, пока появятся пятна. Обнаружение посредством распыления реагента (4.2.1.17.4) будет удовлетворительным только если время высыхания слоя пленки составит не более 30 минут.

4.2.3.4. ИНТЕРПРЕТАЦИЯ

Сравнивать R_f значения и цвет стандартных растворов со значениями пробы. Средние R_f значения, представленные ниже для информации, имеют смысл только для сравнения. Они зависят от:

- степени активации тонкого слоя на момент хроматографии;

- температуры хроматографического термостата.

Примеры R _f значений, полученных на слое силикагеля

5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ⁽¹⁾

Определение всегда должно начинаться с йодометрической процедуры.

5.1. Йодометрия

5.1.1. Принцип

Определение выполняется путем окисления группы "-SH" йодом в кислой среде в соответствии с уравнением:

2HOOC – CH₂SH + I₂ → (HOOC – CH₂ – S)₂ + 2I^– + 2H⁺

5.1.2. Реагенты

Йод, 0,05 М стандартный раствор.

5.1.3. Оборудование

Стандартное лабораторное оборудование.

5.1.4. Процедура

В 150 мл конической колбе с притертой пробкой, содержащей 50 мл дистиллированной воды, взвесить точно от 0,5 до 1 г образца. Добавить 5 мл соляной кислоты (4.1.1.2) (рН раствора около 0) и титровать раствором йода (5.1.2) до желтого цвета в присутствии индикатора крахмала.

5.1.5. Расчет

Содержание меркаптоуксусной кислоты рассчитывается по формуле:

где:

m – масса (в граммах) пробы,

n – объем раствора йода (5.1.2).

5.1.6. Примечание

Если результат рассчитан для меркаптоуксусной кислоты с содержанием 0,1% или ниже минимальной концентрации, проведение дальнейших определений не является необходимым. Если результат равен или больше, чем минимально допустимая концентрация, и определение показало наличие нескольких восстановителей, необходимо провести определение газовой хроматографией.

5.2. Газовая хроматография

5.2.1. Принцип

Меркаптоуксусную кислоту отделить от наполнителя путем осаждения диацетатом кадмия. После метилирования с диазометаном полученное на месте или заранее в растворе диэтилового эфира метил производное меркаптоуксусной кислоты измеряют газожидкостной хроматографией, используя в качестве внутреннего стандарта метиловый октаноат.

5.2.2. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

5.2.2.1. Меркаптоуксусная кислота, 98%.

5.2.2.2. Соляная кислота, d²⁰₄ = 1,19 г / мл.

5.2.2.3. Метанол.

5.2.2.4. Кадмий ди(ацетат) дигидрат, 10% (m/v) раствор в воде.

5.2.2.5. Метил октаноат, 2% (m/v) раствор в метаноле.

5.2.2.6. Ацетатный буфер (рН 5)

Ацетат натрия тригидрат, 77 г.

Ледяная уксусная кислота, 27,5 г.

Деминерализованная вода для получения конечного объема в один литр.

5.2.2.7. Соляная кислота, 3 М раствор в метаноле (5.2.2.3), свежеприготовленный.

5.2.2.8. 1-метил-3-нитро-1-нитрозогуанидин.

5.2.2.9. Гидроксид натрия, 5 М раствор.

5.2.2.10. Йод, 0,05 М стандартный раствор.

5.2.2.11. Диэтиловый эфир.

5.2.2.12. Раствор диазометана, полученный из N-метил-N-nitrosotoluen-4-сульфонамида [Физер, реагенты для органического синтеза (Wiley), 1967]

Полученный раствор содержит около 1,5 г диазометана в 100 мл диэтилового эфира. Диазометан очень токсичный и неустойчивый газ, поэтому все эксперименты должны быть выполнены под вытяжным шкафом, избегая использования оборудования из стекла с притертой пробкой (для этого существуют специальные наборы).

5.2.3. Оборудование

5.2.3.1. Стандартное лабораторное оборудование.

5.2.3.2. Оборудование для подготовки диазометана метилированием на месте (см Фалес, NM, Jaouni, TM и Babashak, JF, Аnalyt. Chem 1973, 45, 2302).

5.2.3.3. Аппаратура для заблаговременной подготовки диазометана (Fieser).

5.2.4. Подготовка пробы

В центрифужной пробирке на 50 мл взвесить достаточное количество пробы, чтобы получить намеченное количество от 50 до 70 мг меркаптоуксусной кислоты. Подкислить несколькими каплями соляной кислоты (5.2.2.2) с получением рН около 3.

Добавить 5 мл деминерализованной воды и 10 мл ацетатного буферного раствора (5.2.2.6).

Использовать индикаторную бумагу, подтверждающую значение рН (должно быть 5). Затем добавить 5 мл ди(ацетата) кадмия (5.2.2.4).

Ждать 10 минут, затем центрифугировать не менее 15 минут при 4000 г.

Жидкость супернатант, которая может содержать нерастворимый жир (в случае кремовых изделий), удаляется. Эти жиры не следует путать с тиолами, которые осаждаются в компактную массу на дне пробирки. Убедитесь, что осаждение не происходит при добавлении нескольких капель ди(ацетата) кадмия (5.2.2.4) в надосадочную жидкость.

Если раньше идентификация не выявила образования других компонентов, кроме тиолов, их идентифицируют йодометрическим методом, содержание в поверхностном слое тиолов не должно превышать от 6 до 8% от первоначальной суммы.

В центрифужную пробирку, содержащую осадок, вводят 10 мл метанола (5.2.2.3) и мелкодисперсируют осадок мешалкой. Центрифугировать снова в течение минимум 15 минут на 4000 г. Слить надосадочную жидкость и проверить на отсутствие тиолов.

Осадок промыть второй раз тем же способом.

В ту же центрифужную пробирку добавить:

- 2 мл метилового октаноата (5.2.2.5);

- 5 мл соляной кислоты в метаноле (5.2.2.7).

Полностью растворить тиолы, может остаться немного нерастворимых веществ из наполнителя. Этот раствор пометить "S".

С частью этого раствора проверить йодометрически, если полученное содержание тиолов составляет по меньшей мере 90%, согласно пункту 5.1 настоящей главы.

5.2.5. Метилирование

Метилирование осуществить либо на месте (5.2.5.1), или с предварительно приготовленным раствором диазометана (5.2.5.2).

5.2.5.1.Метилирование на месте

В аппарат для метилирования (5.2.3.2), содержащий 1 мл эфира (5.2.2.11), внести 50 µl раствора "S" и метилировать примерно 300 мг 1-метил-3-нитро- 1-нитрозогуанидина (5.2.2.8). Через 15 минут (эфирный раствор должен быть желтым, что указывает на наличие избытка диазометана) раствор пробы перенести в 2 мл флакон с воздухонепроницаемой пробкой. Оставить на ночь в холодильнике. Метилировать две пробы одновременно.

5.2.5.2. Метилирование с предварительно приготовленным раствором диазометана

В 5 мл колбу с пробкой поместить 1 мл раствора диазометана (5.2.2.12), а затем добавить 50 µl раствора "S". Оставить на ночь в холодильнике.

5.2.6. Приготовление стандарта

Приготовить стандартный раствор меркаптоуксусной кислоты (5.2.2.1) с известной концентрацией, содержащей около 60 мг чистой меркаптоуксусной кислоты (5.2.2.1) в 2 мл.

Этот раствор пометить как "Е".

Осадить, проверить и метилировать, как описано в пунктах 5.2.4 и 5.2.5 настоящей главы.

5.2.7.Условия газовой хроматографии

5.2.7.1. Колонка

Тип: из нержавеющей стали;

длина: 2 м;

диаметр: 3 мм

5.2.7.2. Наполнение

2% децилфталат сhromosorb, WAW 80 до 100 ячеек.

5.2.7.3. Детектор

Пламенная ионизация. Соответствующая настройка чувствительности для электрометра детектора пламенной ионизации равна: 8 × 10 ^-10 А.

5.2.7.4. Используемые газы

газ-носитель: азот;

давление: 2,2 бар.

скорость потока: 35 мл / мин.

Вспомогательный газ: водород;

давление: 1,8 бар.

скорость потока: 15 мл / мин.

Детектор мощности, как указано производителем устройства.

5.2.7.5. Температурные условия

Инжектор: 200 ° С.

Детектор: 200 ° С.

Колонка: 90 ° С.

5.2.7.6. Диаграмма скорости записи

5 мм/мин.

5.2.7.7. Количество впрыскиваний

3 µl.Произвести 5 впрыскиваний.

5.2.7.8. Хроматографические условия приведены в руководстве. Они позволяют получить разрешение "R" ≥ 1,5, где:

где:

r₂ и r_l -время удерживания (в минутах);

W ₁и W₂ -ширина пика на половине высоты (в миллиметрах);

d ‚ -скорость (в миллиметрах в минуту).

Рекомендуется, чтобы процесс хроматографии был прекращен при регулировании температуры от 90 до 150 ° С при 10 ° С в минуту, чтобы исключить возможность влияния лабильных веществ на последующие измерения.

5.2.8. Расчет

5.2.8.1. Коэффициент пропорциональности для меркаптоуксусной кислоты

Данный коэффициент рассчитывается в отношении метилоктаноата на основе стандартной смеси.

Если "t" представляет меркаптоуксусную кислоту,

где:

Если "c" метилоктаноат,

где:

тогда:

.

Этот коэффициент варьируется в зависимости от используемой аппаратуры.

5.2.8.2. Концентрация меркаптоуксусной кислоты в пробе

Если "t" представляет меркаптоуксусную кислоту,

где:

к _t - коэффициент его отклика;

S _t - его площадь пика.

Если "c" метилоктаноат;

где:

m_c - его масса (в миллиграммах) в смеси;

S _с - площадь его пика,

М – масса (в миллиграммах) в начальной части пробы, тогда % (m/m) меркаптоуксусной кислоты в пробе:

6. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

При содержании меркаптоуксусной кислоты 8% (m/m) разница между результатами двух параллельных определений, проведенных с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютного значения 0,8% (m/m).

VI. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕКСАХЛОРОФЕНА

А. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод подходит для всех косметических продуктов.

2. ПРИНЦИП

Содержащийся в пробе гексахлорофен экстрагируется этилацетатом и определяется с помощью тонкослойной хроматографии.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Серная кислота, 4 М раствор.

3.2. Целит AW.

3.3. Этилацетат.

3.4. Подвижная фаза: бензол, содержащий 1% (v/v) ледяной уксусной кислоты.

3.5. Реагент для окрашивания I:

Раствор родамина B: 100 мг родамина B растворить в смеси 150 мл диэтилового эфира, 70 мл абсолютного этанола и 16 мл воды.

3.6. Реагент для окрашивания II:

Раствор 2,6-дибром-4- (хлорамин) циклогексил-2,5-dienol: 400 мг 2,6-дибром-4- (хлорамин) циклогексил-2,5-dienol растворить в 100 мл метанола (ежедневно готовить свежим).

Раствор карбоната натрия: 10г карбоната натрия растворить в 100 мл деминерализованной воды.

3.7. Стандартный раствор:

Гексахлорофен, 0,05% (m/v) в этилацетате.

4. АППАРАТУРА

4.1. 254 nm УФ пластинки на силикагеле, 200 × 200 мм (или эквивалент).

4.2. Стандартное оборудование для тонкослойной хроматографии.

4.3. Терморегулирующая баня на 26 ° С для хроматографической камеры.

5. ПОДГОТОВКА ТЕСТИРУЕМОЙ ПРОБЫ

5.1. Хорошо перемешать 1 г гомогенизированной пробы с 1 г целита AW (3.2) и 1 мл серной кислоты (3.1).

5.2. Сушить два часа при 100 ° С

5.3. Высушенный остаток охладить и измельчить в мелкий порошок.

5.4. Экстрагировать дважды по 10 мл этилацетата (3.3) после каждой экстракции центрифугировать и этилацетатные слои объединить.

5.5. Испарять при 60 ° С.

5.6. Осадок растворить в 2 мл этилацетата (3.3).

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. На пластину ТСХ (4.1) нанести 2 µl раствора тестируемой пробы (5.6) и 2 µl стандартного раствора (3.7).

6.2. Камеру (4.3) насыщать подвижной фазой (3.4).

6.3. Поставить пластину в камеру и элюировать до 150 mm.

6.4.Вынуть пластину и сушить в вентилируемой печи при температуре около 105^ºС

6.5. Окрашивание

Пятна гексахлорофена на пластине ТСХ проявляются как указано в пунктах 6.5.1 или 6.5.2 настоящей главы.

6.5.1. Опрыскать равномерно пластину визуализируемым агентом I (3.5). Через 30 минут пластину рассмотреть при УФ-свете в 254 nm.

6.5.2. Пластину равномерно опрыскать раствором реагента II (3,6) 2,6-дибром-4- (хлоримино) циклогексил-2,5-диенол. Затем пластину опрыскать раствором карбоната натрия (3.6). Проанализировать пластину при дневном свете через 10 минут после сушки при комнатной температуре.

7. ИНТЕРПРЕТАЦИЯ

7.1. Обнаружение реагентом I (3.5):

Гексахлорофен определяется голубоватыми пятнами на желто-оранжевом флюоресцентном фоне и имеет R_f-значение приблизительно 0,5.

7.2. Обнаружение реагентом II (3.6):

Гексахлорофен определяется небесно-голубыми бирюзовыми пятнами на белом фоне и имеет R_f-значение приблизительно 0,5.

В. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод применяется для всех косметических продуктов.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание гексахлорофена в пробе, определенное этим способом, выражается в процентах массы гексахлорофена.

3. ПРИНЦИП

Гексахлорофен определяется после превращения в метиловое производное, газовой хроматографией с детектором электронного захвата.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. Этилацетат.

4.2. N-метил-N-нитрозо-p-толуолсульфонамид (диазалд).

4.3. Диэтиловый эфир.

4.4. Метанол.

4.5. 2- (2-этоксиэтокси) этанол (карбитол).

4.6. Муравьиная кислота.

4.7. Гидроксид калия, 50% (m/m) водный раствор (свежеприготовленный ежедневно).

4.8. Гексан для спектроскопии.

4.9. Бромхлорофен (стандарт № 1).

4.10. 4,4 ‚, 6,6′-тетрахлор-2,2′-тиодифенол (стандарт № 2).

4.11. 2,4,4′-трихлор-2-гидрокси-дифениловый эфир (стандарт № 3).

4.12. Ацетон.

4.13. Серная кислота, 4 М.

4.14. Целит AW.

4.15. Муравьиная кислота/этилацетат, 10% (v/v) раствор.

4.16. Гексахлорофен.

5. АППАРАТУРА

5.1. Стандартное лабораторное оборудование.

5.2. Мини-аппарат для приготовления диазометана (Аnalyt. Chem., 1973, 45, 2302-2).

5.3. Газовый хроматограф, оснащенный детектором электронного захвата 63 Ni.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Подготовка стандартных растворов

Стандарт выбирается так, чтобы он не мешал любому веществу, которое содержится в наполнителе анализируемого продукта. Как правило, наиболее подходящим является стандарт № 1 (4.9).

6.1.1. В мерной колбе объемом 100 мл взвесить точно 50 мг стандартного р-ра № 1, 2 или 3 (4.9, 4.10 или 4.11) и 50 мг гексахлорофена (4.16). Довести до метки этилацетатом (4.1) (раствор А). 10 мл раствора А разбавить до 100 мл этилацетатом (4.1) (раствор В).

6.1.2. В мерной колбе объемом 100 мл взвесить точно около 50 мг стандартного раствора № 1, 2 или 3 (4.9, 4.10 или 4.11). Полученный объем довести до метки этилацетатом (4.1) (раствор В).

6.2. Подготовка пробы ⁽⁴⁾

Точно взвесить 1г гомогенизированной пробы и тщательно перемешать с 1 мл серной кислоты (4.13), 15 мл ацетона (4.12) и 8 г целита AW (4.14). Смесь сушить на воздухе на паровой бане в течение 30 минут, затем сушить 30 мин. в вентилируемой печи. Остаток охладить, измельчить на мелкие кусочки и перенести в стеклянную колонку. Элюировать этилацетатом (4.1) и собрать 100 мл. Добавить 2 мл внутреннего стандарта (раствор C) (6.1.2).

6.3. Метилирование пробы

Все реагенты устройство охладить до 0 – 4°С в течение двух часов. Во внешний отсек аппарата для приготовления диазометана внести 1,2 мл полученного раствора ( 6.2) и 0,1 мл метанола (4.4). В центральный резервуар ввести около 200 мг diazald (4.2), добавить 1 мл карбитола (4.5) и 1 мл диэтилового эфира (4.3) и растворить. Устройство подключить и наполовину погрузить в баню при 0 ° С и с помощью шприца в центральный резервуар ввести около 1 мл охлажденного раствора гидроксида калия (4.7). Убедиться, что соединение образовавшегося диазометана желтого цвета является прочным. Если желтый цвет не сохраняется, повторить метилирование с другими 200 мг diazald (4.2) (5).

Через 15 минут устройство вынуть из ванны и затем в закрытом виде держать в течение 12 часов при комнатной температуре. Устройство открыть, обработать избыток диазометана добавлением нескольких капель 10% (v/v) раствора муравьиной кислоты в этилацетате (4.15) и перенести органический раствор в 25 мл мерную колбу. Довести до метки гексаном (4.8).

Впрыснуть в хроматограф 1,5 µl этого раствора.

6.4. Метилирование стандарта

Все реагенты и устройство охладить до температуры 0-4 ° С в течение двух часов. В наружный отсек аппарата для диазометана ввести:

- 0,2 мл раствора В (6.1.1);

- 1 мл этилацетата (4.1);

- 0,1 мл метанола (4,4).

Продолжить метилирование, как описано в 6.3. В хроматограф ввести 1,5 µl полученного раствора.

7. ГАЗОВАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Колонна должна дать разрешение "R", по крайней мере равное или больше 1,5, где:

,

где:

r ₁ и r ₂ - время удерживания (в минутах);

W ₁ и W ₂ -ширина пика на половине высоты (в миллиметрах);

d ‚ – скорость (в миллиметрах в минуту).

Установлены следующие условия газовой хроматографии:

колонка: нержавеющая сталь;

-длина: 1,7 м;

-диаметр: 3 мм;

Наполнитель сhromosorb: WAW

- сито анализ: 80 – 100 ячеек;

- стационарная фаза: 10% OV 17;

- температура:

- газ-носитель: азот, не содержащий кислорода;

- давление: 2,3 бар;

- скорость потока: 30 мл / мин.

8. РАСЧЕТ

8.1. Коэффициент пропорциональности гексахлорофена

Данный коэффициент рассчитывается относительно выбранного стандарта в отношении к стандартной смеси,

где:

тогда:

8.2. Количество гексахлорофена в пробе

где:

h – Гексахлорофен;

к _h - коэффициент его пропорциональности;

A_h - площадь его пика;

s – выбранный стандарт;

m_s - его масса (в граммах) в смеси;

A_s - площадь его пика;

М – масса (в граммах) пробы;

тогда % (m/m) гексахлорофена в пробе:

9. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

При содержании гексахлорофена 0,1% (m/m) разница между результатами двух параллельных определений, проведенных с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютное значение % 0,005% (m/m).

VII. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ TOSYLCHLORAMIDЕ НАТРИЯ (ХЛОРАМИН-Т)

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод применяется для количественного определения tosylchloramide натрия (хлорамин-Т) в косметических продуктах с помощью тонкослойной хроматографии.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание хлорамина-T в пробе, определяемое этим методом, выражается в процентах массы (m/m).

3. ПРИНЦИП

Хлорамин-Т полностью гидролизуется с 4-toluenesulphonamide кипячением с хлористоводородной кислотой.

Количество полученного 4-toluenesulphonamide определяется с помощью тонкослойной хроматографии.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. Тосилхлорамид натрия (хлорамин-Т).

4.2. Стандартный раствор 4-toluenesulphonamide: 50 мг 4-toluenesulphonamide в 100 мл этанола (4.5).

4.3. Соляная кислота, 37% (m/m), d²⁰₄ = 1,18 г / мл.

4.4. Диэтиловый эфир.

4.5. Этанол, 96% (v/v).

4.6. Подвижная фаза

4.6.1. 1-бутанол/ этанол (4.5)/ вода (40: 4: 9; v / v / v); или

4.6.2. Хлороформ ацетон (6: 4; v/v).

4.7. Готовые ТСХ пластины на силикагеле 60, без флюоресцентного индикатора.

4.8. Перманганат калия.

4.9. Соляная кислота, 15% (m/m).

4.10. Реагент для распыления: 2-толуидин, 1% (m /v) раствор в этаноле (4.5).

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Стандартное лабораторное оборудование.

5.2. Стандартное оборудование для тонкослойной хроматографии.

5.3. Фотоденсиметр.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Гидролиз

В 50 мл круглодонной колбе точно взвесить около 1 г пробы ("m") . Добавить 5 мл воды и 5 мл соляной кислоты (4.3) и кипятить в течение одного часа, используя дефлегматор. Горячий pаствор немедленно перенести в 50 мл флакон. Дать остыть и довести до метки водой. Центрифугировать, по крайней мере 5 минут при 3000 оборотах в минуту и пропустить жидкость супенатант через фильтр.

6.2. Экстракция

6.2.1. Взять по 30 мл фильтрата и экстрагировать трижды с 15 мл диэтилового эфира (4.4). При необходимости высушить эфирные фазы и собрать в склянку на 50 мл. Довести до метки диэтиловым эфиром (4.4).

6.2.2. Взять 25 мл высушенного эфирного экстракта и выпарить досуха в потоке азота. Остаток повторно растворить в 1 мл этанола (4.5).

6.3. Тонкослойная хроматография

6.3.1. На пластину для тонкослойной хроматографии (4.7) нанести 20 µl этанольного остатка (6.2).

Таким же образом нанести 8, 12, 16 и 20 µl стандартного раствора 4-toluenesulphonamide (4.2).

6.3.2. Затем погрузить пластину в растворитель на высоту 150 mm (4.6.1 или 4.6.2).

6.3.3. После полного испарения растворителя с поверхности поместить пластину на 2-3 минуты в атмосферу паров хлора, которая производится путем заливки около 100 мл соляной кислоты (4.9) в примерно 2 г перманганата калия (4.8) в закрытом контейнере. Избыток хлора удалить нагреванием пластинки до 100°С в течение 5 минут, затем опрыскать пластинку реагентом 4.10.

6.4. Измерение

Примерно через час измерить фиолетовые пятна с помощью фотоденситометра на 525 nm.

6.5. Рисование эталонных кривых

Определить значения максимальной высоты пиков, установленных для четырех 4-toluenesulphonamide пятен, соответствующих количествам 4-toluenesulphonamide (т.е. 4, 6, 8, 10 µl 4-toluenesulphonamide на пятне).

7. ПРИМЕЧАНИЕ

Способ может контролироваться с помощью раствора 0,1% или 0,2 (m/v) хлорамина-T (4.1), обработанного таким же образом, как и проба (6).

8. РАСЧЕТ

Содержание хлорамина-T в пробе, выраженное в процентах массы, вычислить следующим образом:

где:

1.33 – фактор преобразования 4-toluenesulphonamide хлорамина-Т;

а – величина (в µg) 4-toluenesulphonamide в пробе, из калибровочных кривых;

m – масса (в граммах) анализируемой пробы.

9. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

При содержании хлорамина-T около 0,2% (m/m) разница между результатами двух параллельных определений, проведенных с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютное значение 0,03% (m/m).

VIII. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО ФТОРА В ЗУБНОЙ ПАСТЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод используется для определения общего фтора в зубной пасте. Способ пригоден для концентраций, не превышающих 0,25%.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание фтора в пробе, определенное этим методом, выражается в процентах массы.

3. ПРИНЦИП

Определение осуществляется с помощью газовой хроматографии. Фтор из фторсодержащих соединений преобразуется в кислой среде с хлортриэтилсиланом (TECS) в triethylfluorosilane (ТEFS) и одновременно экстрагируется ксилолом, содержащим циклогексан в качестве внутреннего стандарта.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. Фторид натрия сушить при 120 ° С до постоянного веса.

4.2. Вода дважды дистиллированная или эквивалент качества.

4.3. Соляная кислота, d²⁰₄ = 1,19 г / мл.

4.4. Циклогексан (СН).

4.5. Ксилол без каких-либо пиков на хроматограмме при хроматографии в тех же условиях, что и проба (6.1). Если необходимо, очистить перегонкой (5.8).

4.6. Хлортриэтилсилан (TECS Меrck или эквивалент).

4.7. Стандартные растворы фтора

4.7.1. Исходный раствор, 0,250 мг F/мл. Точно взвесить 138,1 мг фторида натрия (4.1) и растворить в воде (4.2). Количественно перенести раствор в склянку на 250 мл (5.5). Довести до метки водой (4.2) и перемешать.

4.7.2. Разведенный исходный раствор, 0,050 мг F \мл. Перенести 20 мл исходного раствора (4.7.1) в 100 мл мерную колбу (5.5). Разбавить до метки водой и перемешать.

4.8. Внутренний стандартный раствор

Смешать 1 мл циклогексана (4.4) и 5 мл ксилола (4.5).

4.9. Хлортриэтилсилан внутренний стандартный раствор

В 10 мл флакон пипеткой (5.7) внести 0,6 мл TECS (4.6) и 0,12 мл раствора внутреннего стандарта (4.8). Разбавить ксилолом (4.5) до метки и перемешать. Готовить свежий раствор ежедневно.

4.10. Хлорная кислота, 70% (m/v).

4.11. Хлорная кислота, 20% (m/v) в воде (4.2).

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Стандартное лабораторное оборудование.

5.2. Газовый хроматограф, снабженный пламенно-ионизационным детектором.

5.3. Гомогенизатор Vortex или эквивалент.

5.4. Шейкер Бюлер, тип SMB1 или эквивалент.

5.5. Пикнометр, 100 и 250 мл, из полипропилена.

5.6. Пробирки центрифужные (из стекла); 20 мл, с винтовой крышкой с тефлоновым покрытием типа Sovirel 611-56 или эквивалент. Трубы и колпачки очистить поместив в течение нескольких часов в хлорную кислоту (4.11), пять раз промыть водой (4.2) и сушить при 100 ° С

5.7. Дозирующие пипетки, которые могут предоставить объемы от 50 до 200 µl, с пластиковыми наконечниками.

5.8. Аппарат для перегонки, оснащенный колонкой Schneider с тремя полями или эквивалентной колонкой Vigreux.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Анализ пробы

6.1.1. Выбрать неоткрытый ранее тюбик зубной пасты, открыть и все содержимое перевести в пластиковый контейнер, хорошо перемешать смесь и хранить в условиях, которые исключают ухудшение его качества.

6.1.2. В центрифужной пробирке (5.6) точно взвесить 150 мг ("m") пробы, добавить 5 мл воды (4.2) и гомогенизировать (5.3).

6.1.3. Добавить 1 мл ксилола (4.5).

6.1.4. По каплям добавить 5 мл соляной кислоты (4.3) и гомогенизировать (5.3).

6.1.5. В центрифужную пробирку (5.6) пипеткой внести 0,5 мл внутреннего стандарта хлортриэтилсилана (4.9).

6.1.6. Пробирку закрыть винтовой крышкой (5.6) и гомогенизировать в течение 45 минут в шейкере (5.4) при 150 оборотах в минуту.

6.1.7. Центрифугировать в течение 10 минут при такой скорости, чтобы получить четкое разделение фаз, колпачок трубки отвинтить, органический слой удалить и в колонку газового хроматографа (5.2) ввести 3 µl органической фазы.

Примечание: Элюирование всех компонентов занимает около 20 минут.

6.1.8. Повторить впрыскивания, вычислив среднее соотношение площадей пиков (A _ТEFS / A _CH) и калибровочной кривой (6.3), записать соответствующее количество фтора в [миллиграммах("m")] .

6.1.9. Общее содержание фтора в пробе выражается (в процентах массы фтора), как указано в пункте 7 настоящей главы.

6.2. Хроматографические условия

6.2.1. Колонка: нержавеющая сталь;

длина: 1,8;

диаметр: 3 мм;

носитель: Gaschrom Q 80 – 100 ячеек.

Стационарная фаза: силиконовое масло DC 200 или эквивалент, 20%. Кондиционировать колонку в течение ночи при 100 °C (скорость потока газа-носителя: 25 мл азота в минуту). Повторять эту операцию каждый вечер. После каждого четвертого или пятого впрыскивания кондиционировать колонку путем нагревания при 100 °C в течение 30 минут.

Температура:

- колонка: 70 °С;

- инжектор: 150 °С;

– детектор: 250 °С.

Носитель потока газа: 35 мл азота в минуту.

6.3. Эталонная кривая

6.3.1. В шесть центрифужных пробирок (5.6) внести пипеткой 0, 1, 2, 3, 4 и 5 мл стандартного разбавленного раствора фторида (4.7.2). Объем в каждой пробирке довести до 5 мл водой (4.2).

6.3.2. Действовать по схеме, изложенной в пунктах 6.1.3 – 6.1.6 настоящей главы.

6.3.3. В колонку газового хроматографа ввести 3 µl органической фазы (5.2).

6.3.4. Повторить инжектирование и рассчитать среднее соотношение между площадями пиков (A _ТEFS / A _CH).

6.3.5. Построить эталонный график корреляции массы фтора (в миллиграммах) в стандартных растворах (6.3.1) и площадей пиков (A _ТEFS / A _CH), измеренный в соответствии с 6.3.4. Точки на графике соединить с интерполированной прямой, рассчитанной регрессионным анализом.

7. РАСЧЕТ

Общее содержание фтора в образце (в процентах массы фтора), (% (m/m/F)) определяется по формуле:

где:

m – часть образца (в миллиграммах) (6.1.2);

m ₁ - количество F (в миллиграммах) считанное из эталонной кривой (6.1.8).

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

При содержании фтора около 0,15% (m/m) разница между результатами двух параллельных испытаний, проведенных с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютное значение 0,012% (m/m).

IХ. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ

РТУТЬСОДЕРЖАЩИХ СОЕДИНЕНИЙ

ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод может быть использован для идентификации и определения производных ртутьсодержащих органических соединений, используемых в качестве консервантов в косметической продукции для глаз. Он применим к тиомерсалу (INN) (2- (этилмеркуриотио) бензойной кислоты) фенилртути и ее соли.

А. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРИНЦИП

Ртутьсодержащие органические соединения в виде комплекса с 1,5-дифенил-3-тиокарбазоном. После экстракции тетрахлорида дитизона проводят определение на силикагеле тонкослойной хроматографии. Дитизоновые пятна оранжевого цвета.

2. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

2.1. Серная кислота, 25% (v/v).

2.2. 1,5-дифенил-3-тиокарбазон (дитизон): 0,8мг в 100мл четыреххлористого углерода (2.4).

2.3. Азот.

2.4. Четыреххлористый углерод.

2.5. Подвижная фаза: гексан / ацетон, 90:10 (v/v).

2.6. Стандартный раствор 0,001% в воде:

-2- (этилмеркуриотио) бензойной кислоты;

-этилмеркурхлорид или метилмеркурхлорид;

-фенил ртути или ацетат ртути;

- дихлорид ртути или ацетат ртути(II).

2.7. Готовые TCХ пластины с силикагелем (Меrck 5721, например, или эквивалент).

2.8. Хлорид натрия.

3. ОБОРУДОВАНИЕ

3.1. Стандартное лабораторное оборудование.

3.2. Стандартное оборудование для тонкослойной хроматографии.

3.3. Фильтр для разделения фаз.

4. ПРОЦЕДУРА

4.1. Экстракция

4.1.1. 1 г пробы развести титрованием в 20 мл дистиллированной воды в центрифужной пробирке. Получить максимальную дисперсию и нагреть до 60°С на водяной бане. Добавить 4 г хлорида натрия (2.8). Встряхнуть и дать остыть.

4.1.2. Центрифугировать по крайней мере 20 минут при 4500 оборотах в минуту для отделения твердого вещества из жидкости. Фильтраты перенести в делительную воронку и добавить 0,25 мл раствора серной кислоты (2.1).

4.1.3. Экстрагировать несколько раз с 2 или 3 мл раствора дитизона (2.2), пока органическая фаза остается зеленой.

4.1.4. Затем каждую органическую фазу профильтровать через фильтр для разделения фаз (3.3).

4.1.5. Выпаривать досуха в потоке азота (2.3).

4.1.6. Растворить с 0,5 мл четыреххлористого углерода (2.4). Этот раствор нанести немедленно, как указано в пункте 4.2.1 данного раздела.

4.2. Разделение и идентификация

4.2.1. На пластину, покрытую силикагелем (2.7), немедленно нанести 50 µl раствора четыреххлористого углерода, указанного в пункте 4.1.6 настоящего раздела. В то же время обработать 10 мл стандартного раствора (2.6), как в пункте 4.1 настоящего раздела, и нанести на те же пластинки 50 µl раствора, указанного в пункте 4.1.6 настоящего раздела.

4.2.2. Поместить пластинку в растворитель (2.5) и оставить растворитель до увеличения объема до 150 mm. Ртутьорганические соединения появляются в виде цветных пятен, цвет которых является стабильным, если сразу после испарения растворителя пластину покрыть стеклянной пластиной.

В качестве примера, получаются следующие R_f -значения:

В. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание ртутьорганических соединений, определенное этим методом, выражается в процентах массы (m/m) ртути в пробе.

2. ПРИНЦИП

Метод заключается в измерении общего количества ртути. Поэтому, в первую очередь, необходимо установить, что проба не содержит ртути в неорганическом состоянии и определить органическую ртуть, содержащуюся в пробе. После минерализации, освобожденную ртуть измерить беспламенной атомной абсорбцией.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Концентрированная азотная кислота, d²⁰₄ = 1,41 г / мл.

3.2. Концентрированная серная кислота, d²⁰₄ = 1,84 г / мл.

3.3. Дважды дистиллированная вода.

3.4. Перманганат калия, 7% раствор (m/v).

3.5. Гидроксиламмоний хлорид, 1,5% раствор (m/v).

3.6. Дикалия пероксодисульфат, 5% раствор (m/v).

3.7. Дихлорид олова, 10% раствор (m/v).

3.8. Концентрированная соляная кислота, d²⁰₄ = 1,18 г / мл

3.9. Палладий дихлорид для пропитки стекловаты, 1% (m/m).

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное лабораторное оборудование.

4.2. Аппарат для определения ртути атомным беспламенным поглощением (техника холодного пара), в том числе необходимая посуда. Длина пути в кюве должна быть не менее 100 мм.

5. ПРОЦЕДУРА

В лаборатории должны принять все меры предосторожности, касающиеся анализа следов ртути.

5.1. Разделение

5.1.1. Точно взвесить 150 мг пробы ("m"). Добавить 10 мл азотной кислоты (3.1) и нагревать раствор в течение трех часов в герметичной колбе на водяной бане при 55°С, встряхивая через регулярные промежутки времени. В то же время провести слепой тест на реагенты.

5.1.2. После охлаждения добавить 10 мл серной кислоты (3.2) и оставить раствор на водяной бане при 55 °С в течение 30 минут.

5.1.3. Колбу поместить в баню со льдом и осторожно добавить 20 мл воды (3.3).

5.1.4. Добавлять часть в 2 мл 7% раствора перманганата калия (3.4), пока раствор не окрасится. Оставить на водяной бане при 55 °С в течение еще 15 минут.

5.1.5. Добавить 4 мл раствора дикалиевого пероксодисульфата (3.6). Прогревать на водяной бане при 55 ° С в течение 30 минут.

5.1.6. Дать остыть и содержимое колбы перенести в мерную 100 мл колбу. Колбу промыть 5 мл хлористого гидроксиламмония (3.5), а затем промыть еще четыре раза с 10 мл воды (3.3). Раствор должен полностью обесцветиться. Довести до метки водой (3.3).

5.2. Определение

5.2.1. 10 мл раствора для анализа (5.1.6) перенести в стеклянный сосуд для определения ртути с холодным паром (4.2). Разбавить 100 мл воды (3.3), а затем с 5 мл серной кислоты (3.2) и 5 мл раствора дихлорида олова (3.7). После каждого добавления перемешать. Оставить на 30 секунд, чтобы перевести все ионы ртути в металлическое состояние и считать показания ("n").

5.2.2. Пропитать стекловату дихлоридом палладия и поставить между сосудом для восстановления ртути и ячейкой прибора. Повторить действия из пункта 5.2.1 и записать показания. Если показания не равны нулю, минерализация была неполной и анализ необходимо повторить.

6. РАСЧЕТ

Содержание ртути, выраженное в процентах, рассчитать по следующей формуле:

где:

m – масса (в миллиграммах) испытуемой пробы;

n – количество ртути в ( µg), считываемой на приборе.

7. ПРИМЕЧАНИЯ

7.1. Для улучшения минерализации необходимо начинать с разведения пробы.

7.2. Если есть подозрение на поглощение ртути субстратом, необходимо сделать определение методом стандартных добавок.

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ (¹)

При концентрации ртути 0,007% разница между результатами двух параллельных испытаний, проведенных с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютное значение 0,00035%.

Х. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЩЕЛОЧНЫХ

И ЩЕЛОЧОЗЕМЕЛЬНЫХ СУЛЬФИДОВ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает определение сульфидов, присутствующих в косметической продукции. Наличие тиолов или других восстановителей (в том числе сульфитов) не мешает.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Концентрация сульфидов, определенная данным методом, выражается как содержание серы в процентах массы.

3. ПРИНЦИП

После подкисления среды, сероводород извлечь потоком азота и затем зафиксировать в виде сульфида кадмия. Последнее вещество отфильтровать и промыть, а затем его содержание определить йодометрически.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. Концентрированная соляная кислота, d²⁰₄ = 1,19 г / мл.

4.2. Натрий тиосульфат, 0,1 М стандартный раствор

4.3. Йод, 0,05 М стандартный раствор

4.4. Сульфид натрия.

4.5. Кадмий ди(ацетат).

4.6. Концентрированный аммиак, d²⁰₄ = 0,90 г / мл.

4.7. Раствор аммиачный кадмия ди(ацетат): 10 г кадмия ди(ацетат) (4.5) растворить в примерно 50 мл воды. Добавить аммиак (4.6) до растворения осадка (около 20 мл). Довести водой до 100 мл.

4.8. Азот.

4.9. Раствор аммиака М.

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Стандартное лабораторное оборудование.

5.2. 100 мл круглодонная колба с притертым горлом.

5.3. Две 150 мл конические колбы с притертым горлом, оснащенные устройством, содержащим погружную трубку и выходную трубку сбоку для освобождения газа.

5.4. Воронка с длинным стволом.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Извлечение сульфидов

6.1.1. Взять упаковку, которая ранее не была открыта. В колбе (5.2) точно взвесить массу (M) (выраженную в граммах) продукта, соответствующего не более 30 мг сульфидных ионов. Добавить 60 мл воды и две капли пеногасителя.

6.1.2. В каждую из двух конических колб (5.3) добавить по 50 мл раствора (4.7).

6.1.3.Зафиксировать на круглодонной колбе (5.2) капельную воронку, погружную трубку и выходную трубку. Отверстие выходящей трубки соединить с коническими колбами (5.3), соединенными последовательно с помощью трубки из поливинилхлорида.

Примечание. Блок всасываемого газа должен быть подвергнут тесту на прочность в условиях имитации анализа продукт заменяется 10 мл раствора сульфида (полученного согласно пункту 4.4), содержащего "X" мг сульфида (определяется йодометрически). Пусть "Y" составляет количество миллиграммов сульфида, обнаруженного в конце этой операции. Разница между количеством "X" и количеством "Y" не должна превышать 3%.

6.1.4. Пропустить поток азота (4.8) в течение 15 минут со скоростью два пузырька в секунду, чтобы изгнать воздух, заключенный в колбе (5.2).

6.1.5. Колбу нагревать до 85 ± 5 ° С

6.1.6.Остановить поток азота (4.8) и по капле добавить 40 мл соляной кислоты (4.1).

6.1.7. Пропустить поток азота (4.8) повторно, когда почти вся кислота была переведена, оставив минимальное жидкостное уплотнение для предотвращения утечки сероводорода.

6.1.8. Прекратить нагревание после 30 минут. Дать остыть колбе (5.2) и пропускать азот (4.8) по меньшей мере в течение полутора часов.

6.2. Титрование

6.2.1. Сульфид кадмия профильтровать с помощью воронки с длинным сужением (5.4).

6.2.2. Конические колбы (5.3) промыть раствором аммиака (4.9) и вылить на фильтр. Затем промыть дистиллированной водой и использовать эту воду для промыва осадка на фильтре.

6.2.3. Промыть осадок с 100 мл воды.

6.2.4. Поместить бумажный фильтр в первую коническую колбу, которая содержит осадок. Добавить 25 мл ("n₁") раствора йода (4.3), примерно 20 мл соляной кислоты(4.1) и 50 мл дистиллированной воды.

6.2.5. Определить избыток йода с использованием раствора тиосульфата натрия ("n₂")(4.2).

7. РАСЧЕТ

Содержание сульфида в пробе, выраженное в процентах серы, рассчитывается по следующей формуле:

где:

n₁ - количество миллилитров используемого стандартного раствора йода (4.3);

х₁ - молярность данного раствора;

n₂ - количество миллилитров стандартного раствора тиосульфата натрия (4.2);

х₂ - молярность данного раствора;

m – масса (в граммах) анализируемой пробы.

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ (¹)

При содержании сульфида около 2% (m/m) разница между результатами двух испытаний, проведенных с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютного значения 0,2% (m/m).

_____________________________________

⁽²⁾ Стандарт ISO 5725.

⁽³⁾ Nota bene: Определение меркаптоуксусной кислоты должно быть проведено на неиспользованном продукте из только что открытого контейнера, чтобы предотвратить окисление.

⁽⁴⁾ Из-за большого разнообразия видов продукции, которые могут содержать гексахлорофен, важно прежде всего проконтролировать восстановление гексахлорофена в пробе этим методом перед записью результатов. Если извлеченные суммы малы, с согласия заинтересованных сторон, можно внести изменения, такие как изменение растворителя (бензол вместо этилацетата и т.д.).

⁽⁵⁾ Устойчивость желтого цвета доказывает наличие избытка диазометана, необходимого для обеспечения полного метилирования пробы.

Приложение № 13

к Санитарному Регламенту

о косметических продуктах

МЕТОДЫ АНАЛИЗА,

необходимые для проверки состава косметической продукции (IV)

Методы анализа, необходимые для проверки состава косметической продукции (далее – Методы) приведены полностью в соответствие с положениями Чeтвертой Директивы от 11 октября 1985 года о сближении законов государств-членов, относящихся к методам анализа, необходимым для проверки состава косметической продукции (85/490/ ЕЕС), опубликованной в Официальном Журнале Европейских Сообществ (JOCE) L 295/30 от 7 ноября 1985 года.

I. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1-(4-АМИНОБЕНЗОАТА) ГЛИЦЕРИНА

А. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1.ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Данный метод предназначен для обнаружения альфа-моноглицерола 4-аминобензойной кислоты (глицерин 1- (4-аминобензойной кислоты). Метод также позволяет идентифицировать и этил-4-аминобензойную кислоту (бензокаин I NN), которая может содержаться в виде примеси.

2. ПРИНЦИП

Идентификация проводится с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле в присутствии флуоресцентного индикатора и при обнаружении свободной первичной аминогруппы путем образования диазо красителя на пластине.

3. РЕАКТИВЫ

Все реактивы должны быть аналитической чистоты.

3.1. Стабильная смесь растворителей: циклогексан/изопропанол/ дихлорметан 48/64/9 (v / v / v).

3.2. Проявляющий растворитель: петролейный эфир (40-60)/бензол/ ацетон/гидроксид аммония (минимум 25% аммиака): 35/35/35/1 (v / v / v / v).

3.4. Стандартные растворы:

- альфа-моноглицерол 4-аминобензойной кислоты: 0,05 г в 100 мл смешанного растворителя, указанного в пункте 3.1 настоящего раздела;

- этил-4-аминобензойной кислоты: 0,05г в 100мл смешанного растворителя, указанного в пункте 3.1 настоящего раздела;

3.5. Пластины, покрытые силикагелем 60 F254, толщиной 0,25 мм и размером 200 мм х 200 мм.

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное оборудование для тонкослойной хроматографии.

4.2. Ультразвуковая баня.

4.3. Микропористый фильтр FH 0,5 µm или эквивалент.

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. Приготовление пробы

В мерную колбу на 10 мл внести 1,5 г тестируемого продукта. Довести до метки растворителем 3.1. Закрыть пробкой и оставить колбу на один час при комнатной температуре в ультразвуковой бане (4.2). Раствор профильтровать через микропористый фильтр (4.3) и использовать фильтрат для хроматографического анализа.

5.2. ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

На пластины (3.5) нанести 10 μl раствора пробы (5.1) и по 10 μl из каждого стандартного раствора (3.4).

Хроматограммy развить до высоты 150 мм в камерах, ранее насыщенных растворителем 3.2. Пластины оставить сохнуть при комнатной температуре.

5.3. Обнаружение

5.3.1. Пластину исследовать при УФ-свете при 254 nm.

5.3.2. Высушеную пластину опрыскать раствором, указанным в пункте 3.3(а).

Пластину оставить сохнуть при комнатной температуре в течение 1 минуты, затем сразу опрыскать раствором 3.3(b).

Пластину сушить в сушильном шкафу при 60°С. Появляются оранжевые цветные пятна альфа-моноглицерола 4-аминобензойной кислоты: R _F 0,07; этил-4-аминобензойной кислоты: R _F 0,55.

B. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Данный метод определяет альфа-моноглицерол 4-аминобензойной кислоты. Метод также определяет содержание этилового эфира 4-аминобензойной кислоты. Метод определяет не более 5% (m/m) альфа-моноглицерола 4-аминобензойной кислоты и 1% (m/m) этилового эфира 4-аминобензойной кислоты.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание альфа-моноглицерола 4-аминобензойной кислоты и этил-4-аминобензойной кислоты, определенное этим методом, выражается в процентах массы (m/m) продукта.

3. ПРИНЦИП

Исследуемый материал суспендировать в метаноле и после соответствующей обработки образца, проанализировать методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты и должны быть пригодны для ВЭЖХ.

4.1. Метанол.

4.2. Калий фосфат однозамещенный (KH ₂ PO 4).

4.3. Ацетат цинка (Zn (CH ₃ COO) ₂ · 2H₂O).

4.4. Уксусная кислота (d = 1,05).

4.5. Калия гексацианоферрат (К ₄ (Fe (CN) ₆₎ 3H₂O ).

4.6. Этил-4-гидроксибензоат.

4.7. Альфа-моноглицерол 4-аминобензойной кислоты.

4.8. Этил-4-аминобензойной кислоты.

4.9. Фосфатный буферный раствор (0,02 М): 2,72 г ортофосфата калия (4.2) растворить в одном литре воды.

4:10. Элюирующий растворитель: фосфатный буферный раствор (4.9) / метанол (4.1) 61/39 (v/v).

Состав подвижной фазы можно менять для достижения разрешения R ^ 1,5.

где:

R₁ и R₂ - время удержания пиков в минутах;

Вт₁ и W₂ - ширина пика на половине высоты в миллиметрах;

d‚ – скорость вращения в миллиметрах в минуту.

4.11 Исходный раствор альфа-моноглицерола 4-аминобензойной кислоты: взвесить с точностью около 40 мг альфа-моноглицерола 4-аминобензойной кислоты и поместить в 100-мл мерную колбу. Растворить в 40 мл метанола (4.1), довести до метки буферным раствором (4.9) и перемешать.

4.12. Исходный раствор этилового эфира 4-аминобензойной кислоты: взвесить с точностью около 40 мг этилового эфира 4-аминобензойной кислоты и поместить в 100-мл мерную колбу. Растворить в 40 мл метанола (4.1). Довести до метки буферным раствором (4.9) и перемешать.

4.13. Внутренний стандартный раствор: взвесить с точностью около 50 мг этилового эфира 4-гидроксибензоата (4.6), перенести в мерную колбу на 100 мл, растворить в 40 мл метанола (4.1) довести до метки буферным раствором (4.9) и перемешать.

Стандартные растворы: приготовить четыре стандартных раствора растворением в 100 мл элюента (4.10), в соответствии с приведенной ниже таблицей:

4.15. Раствор Карреза I: 26,5 г гексацианофферата калия (4.5) растворить в воде и довести до 250 мл.

4.16. Раствор Карреза II: 54,9 г ацетата цинка (4.3) и 7,5 мл уксусной кислоты (4.4) растворить в воде и довести до 250 мл.

4.17. Merck Lichrosorb RP-18 или эквивалент со средним размером частиц 5 µm.

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Обычное лабораторное оборудование.

5.2. Высокоэффективный жидкостной хроматограф с УФ-детектором с переменной длиной волны и термостатом до 45 ° С

5.3. Колонка из нержавеющей стали, 250 мм; внутренний диаметр 4,6 мм с наполнением Lichrosorb RP-18 (4.17).

5.4. Ультразвуковая баня.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Подготовка пробы

6.1.1. В 100-мл химическом стакане взвесить с точностью около 1 г пробы и добавить 10 мл метанола (4.1).

6.1.2. Поместить стакан в ультразвуковую баню (5.4) на 20 минут для получения суспензии. Полученную суспензию количественно перенести в 100 мл мерную колбу с не более 75 мл элюента (4.10).

Последовательно добавить 1 мл раствора Карреза I (4.15) и 1 мл раствора Карреза II (4.16), после каждого добавления перемешать. Довести до метки элюентом (4.10), перемешать и профильтровать через складчатый бумажный фильтр.

6.1.3. С помощью пипетки перенести 3,0 мл фильтрата, полученного в соответствии с пунктом 6.1.2, и 5,0 мл раствора внутреннего стандарта (4.13) в мерную колбу на 50 мл. Довести до метки элюентом (4.10) и перемешать. Полученный таким образом раствор использовать для хроматографического анализа, описанного в пункте 6.2 настоящего раздела.

6.2. Условия хроматографии

6.2.1. Урегулировать поток подвижной фазы (4.10) до 1,2 мл/мин и температуру колонки – до 45ºС.

6.2.2. Настроить длину волны детектора (5.2) на 274 nm.

6.2.3. С помощью микрошприца ввести в хроматограф по меньшей мере дважды 20 μl раствора (6.1.3) и измерить площади пиков.

6.3. Эталонная кривая

6.3.1. Ввести по 20 μl каждого из стандартных растворов (4.14) и измерить площади пиков.

6.3.2. Для каждой концентрации рассчитать соотношение между площадями пиков альфа-моноглицерола 4-аминобензойной кислоты и площадями пиков внутреннего стандарта. Это соотношение нанести на ось абсцисс, а соотношение соответствующих масс – на ось ординат.

6.3.3. Ту же процедуру повторить в отношении этил-4-гидроксибензоата.

7. РАСЧЕТ

7.1. Из эталонной кривой, полученной в пункте 6.3, определить соотношения масс (RP1, RP2), соответствующие соотношениям пиков их площадей, рассчитанных в пункте 6.2.3 настоящего раздела, где:

RP1 – масса альфа-моноглицерола 4-аминобензойной кислоты / масса этилового эфира 4-гидроксибензойной кислоты;

RP2 – масса этилового эфира 4-аминобензойной кислоты / масса этил 4-гидроксибензоата.

7.2. Из полученных таким образом соотношений масс, используя следующие формулы, рассчитывается содержимое альфа-моноглицерола 4-аминобензойной кислоты и этилового эфира 4-аминобензойной кислоты в процентах массы (% m/m):

где:

q - количество диэтилового 4-гидроксибензоата (внутренний стандарт), в миллиграммах (4.12);

р – количество пробы в граммах, взвешенное согласно пункту (6.1.1) настоящего раздела.

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ (¹)

8.1. При содержании альфа-моноглицерола 4-аминобензойной кислоты 5% (m/m) разница между результатами двух определений, выполненных с одной и той же пробы, не должна превышать 0,25%.

8.2. При содержании этилового эфира 4-аминобензойной кислоты 1% (m/m) разница между результатами двух определений, выполненных с одной и той же пробы, не должна превышать 0,10 %.

9. ПРИМЕЧАНИЕ

9.1. Перед проведением анализа проверить содержание веществ, которые могут перекрыть пик внутреннего стандарта (этил-4-аминобензойной кислоты) на хроматограмме.

9.2. Для проверки отсутствия этих веществ повторить определение после изменения содержания метанола в подвижной фазе 10%.

II. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ХЛОРБУТАНОЛА

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Данный метод пригоден для определения хлорбутанола (NN) до максимальной концентрации 0,5% (m/m) в любом косметическом продукте, за исключением аэрозолей.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание хлорбутанола, измеренное с помощью этого метода, выражается в процентах массы (% m/m) продукта.

3. ПРИНЦИП

После соответствующей обработки тестируемого продукта определение проводится с помощью газовой хроматографии с использованием в качестве внутреннего стандарта 2,2,2-трихлорэтанола.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. Хлорбутанол (1,1,1-трихлор-2-метилпропанол-2).

4.2. 2,2,2-трихлорэтанол.

4.3. Абсолютный этанол.

4.4. Стандартный раствор хлорбутанола: 0,025 г в 100 мл этанола (4.3) (m/v).

4.5. Стандартный раствор 2,2,2-трихлорэтанола: 4 мг в 100 мл этанола (4.3) (m/v).

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5,1. Стандартное лабораторное оборудование.

5.2. Газовый хроматограф с электронным детектором, Ni63.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Приготовление пробы

Взвесить с точностью от 0,1 до 0,3 г ("p"g) пробы, перенести в мерную колбу на 100 мл и растворить в этаноле (4.3), добавить 1 мл раствора внутреннего стандарта (4.5) и довести до метки этанолом (4.3).

6.2. Условия газовой хроматографии

6.2.1. Рабочие условия должны обеспечить разрешение R ≥ 1,5.

где:

R₁ и R₂ - время удержания пиков в минутах;

Вт₁ и W₂ -ширина пика на половине высоты в миллиметрах;

d‚ – скорость графика в миллиметрах в минуту.

В качестве примера, требуемое разрешение представляется в следующих условиях:

6.3. Калибровочная кривая

Поместить в мерные колбы на 100 мл по 1 мл стандартного раствора, указанного в пункте (4.5) настоящей главы и, соответственно: 0,20;0,30; 0,40; 0,50 и 0,60 мл раствора (4.4), довести до метки этанолом (4.3) и перемешать. В хроматограф ввести 1μl каждого из этих растворов в соответствии с условиями, указанными в пункте 6.2.2 настоящего раздела, и построить калибровочную кривую, откладывая по оси абсцисс соотношение массы хлорбутанола и 2,2,2-трихлорэтанола, а по оси ординат – соотношение соответствующих площадей пиков.

6.4. Ввести 1μl раствора, полученного в соответствии с условиями, указанными в пункте 6.1, и действовать в соответствии с процедурами, описанными в пункте 6.2.2 настоящего раздела.

7. РАСЧЕТ

7.1. Из калибровочной кривой (6.3) вычислить количество "а", выраженное в μg хлорбутанола, в растворе, указанном в пункте 6.1 настоящей главы.

7.2. Содержание хлорбутанола в пробе рассчитать по следующей формуле:

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

При содержании хлорбутанола 0,5% (m/m) разница, между результатами двух параллельных определений, проводимых с одной и той же пробой, не должна превышать 0,01%.

Примечание

Если результат равен или больше, чем максимальная допустимая концентрация, необходимо проверить отсутствие помех.

III. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ХИНИНА

А. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод предназначен для обнаружения присутствия хинина в шампуни и лосьонах для волос.

2. ПРИНЦИП

Определение выполняется с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле. Наличие хинина определяется по синей флуоресценции хинина в кислых условиях при 360 nm.

Для подтверждения результата синяя флуоресценция может быть устранена парами брома, а пары аммиака определяют флуоресценцию желтоватого цвета.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Пластины, покрытые силикагелем, без индикатора флуоресценции, толщиной 0,25 мм и форматом 200 mm x 200 mm.

3.2. Проявляющийся растворитель: толуол / диэтиловый эфир / дихлорметан / диэтиламин / 20/20/20/8 (v/v/v/v).

3.3. Метанол.

3.4. Серная кислота (96%; d = 1,84).

3.5. Диэтиловый эфир.

3.6. Проявляющий растворитель: в охлажденную колбу добавить с осторожностью 5 мл серной кислоты (3.4) к 95 мл диэтилового эфира (3.5)

3.7. Бром.

3.8. Раствор гидроксида аммония (28%; d = 0,90).

3.9. Хинин безводный.

3.10. Стандартный раствор: в мерной колбе точно взвесить 100,0 мг безводного хинина (3.9) и растворить в 100 мл метанола (3.3).

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное оборудование для тонкослойной хроматографии.

4.2. Ультразвуковая баня.

4.3. Микропористый фильтр, FH 0,5 fm или эквивалент с подходящим устройством фильтрации.

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. Приготовление пробы

В мерной колбе на 100 мл взвесить с точностью количество пробы, которое содержит примерно 100 мг хинина, растворить и довести до метки с метанолом (3.3).

Колбу герметично закрыть и выдержать в течение одного часа при комнатной температуре в ультразвуковой бане (4.2). Содержимое (4.3) профильтровать, а фильтрат использовать для хроматографического анализа.

5.2. Тонкослойная хроматография

На пластину, покрытую силикагелем (3.1), нанести 1,0 μl стандартного раствора (3.10) и 1,0 μl раствора пробы (5.1). Хроматограмму развить до 150 mm с помощью растворителя, указанного в пункте 3.2 настоящего раздела, в ранее насыщенной растворителем (3.2) камере.

5.3. Развитие

5.3.1. Пластину просушить при комнатной температуре.

5.3.2. Опрыскать проявляющим реагентом, указанным в пункте (3.6) настоящего раздела.

5.3.3. Пластину просушить в течение одного часа при комнатной температуре.

5.3.4. Пластину рассмотреть при УФ-свете, длина волны 360 nm. Хинин проявляется интенсивной синей флуоресценцией.

В качестве примера в нижеприведенной таблице представлены R _F значения основных алкалоидов производных хинина, проявляемых растворителем 3.2.

5.3.5. Для дальнейшей идентификации присутствия хинина пластину обработать парами брома (3.7) в течение приблизительно одного часа. Флуоресценция исчезает. Когда ту же пластину обработать парами аммиака (3.8), появляются пятна коричневого цвета, при исследовании пластины в ультрафиолетовом свете при 360 nm может появиться желтоватая флуоресценция.

Предел обнаружения: 0,1 мг хинина.

B. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Данный метод описывает определение хинина. Он может быть использован для определения предельно допустимой концентрации 0,5% (m/m) в шампунях и 0,2% в лосьонах для волос.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание хинина при помощи этого метода выражается в процентах массы (% m/m) продукта.

3. ПРИНЦИП

После соответствующей обработки определение тестируемого продукта проводится методом высокоэффективной жидкостной хроматографии(ВЭЖХ).

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты и подходить для ВЭЖХ.

4.1. Ацетонитрил.

4.2. Ортофосфат калия (KH ₂ PO 4).

4.3. Ортофосфорная кислота  

4.4. Тетраметиламмония бромид.

4.5. Хинин, безводный.

4.6. Метанол.

4.7. Раствор ортофосфорной кислоты (0,1 М) : в мерной колбе на 1 л взвесить 11,53 г ортофосфорной кислоты (4.3) и растворить в 1 л дистиллированной воды.

4.8. Раствор ортофосфата калия (0,1 М): в мерной колбе на 1 л взвесить 13,6 г ортофосфата калия (4.2) и растворить в 1 л дистиллированной воды.

4.9. Раствор бромида тетрабутиламмония: в мерной колбе на 1 л взвесить 15,40 г бромида тетраметиламмония (4.4) и растворить в 1 л дистиллированной воды.

4.10. Элюент: ортофосфорная кислота (4.7) / ортофосфат калия (4.8) / бромид тетрабутиламмония (4.9) / вода/ацетонитрил (4.1) 10/50/100/340/90 (v/v/v/v/v).

Состав этой подвижной фазы может быть изменен для достижения разрешения R ≥ 1,5:

где:

R₁ и R₂ - время удержания пиков в минутах;

W₁ и W₂ - ширина пика на половине высоты в миллиметрах;

d‚ – cкорость графика в миллиметрах в минуту.

4.11. Кремнезем, обработанный октадецилсиланом, 10 µm.

4.12. Стандартные растворы: в серию мерных колб на 100 мл взвесить 5,0; 10.0; 15,0 и 20,0 мг безводного хинина (4.5). Довести до метки метанолом (4.6), содержание колб встряхивать до растворения хинина. Каждый из образцов профильтровать через фильтр 0,5 µm.

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Стандартное лабораторное оборудование.

5.2. Ультразвуковая баня.

5.3. Высокоэффективная жидкостная хроматография с детектором с переменной длиной волны.

5.4. Колонка из нержавеющей стали 250 мм, внутренний диаметр 4,6 мм, заполнение: кремнезем (4.11).

5.5. Микропористый фильтр FH 0,5 мкм или эквивалент, с подходящим устройством для фильтрации.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Приготовление пробы

В 100-мл мерной колбе взвесить с точностью количество пробы, которое содержит 10,0 мг безводного хинина. Добавить 20 мл метанола (4.6) и поместить колбу в ультразвуковую баню (5.2) на 20 минут. Довести до метки метанолом (4.6). Раствор перемешать, затем профильтровать часть (5.5).

6.2. Хроматографический анализ

Расход подвижной фазы: 1,0 мл / мин.

Длина волны детектора (5.3): 332 nm.

Объем впрыскивания: 10 μl отфильтрованного раствора (6.1).

Измерение: площадь пика.

6.3. Калибровочная кривая

Не меньше трех раз ввести 10,0 μl каждого из стандартных растворов (4.12), измерить площадь пиков и рассчитать среднюю площадь для каждой из концентраций.

Получить калибровочную кривую и проверить, имеет ли она прямое направление.

7. РАСЧЕТ

7.1. Из калибровочной кривой (6.3) вычислить количество безводного хинина, содержащееся во введенном объеме, выраженное в микрограммах (6.2).

7.2. Концентрацию безводного хинина в пробе, в процентах массы (% m/m), получить, используя следующую формулу:

где:

В – количество безводного хинина в микрограммах, определенное в 10 микролитрах фильтрата (6.1);

А – масса пробы в граммах (6.1).

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ⁽¹⁾

При содержании безводного хинина 0,5% (m/m) разница между результатами двух измерений, выполненных с одной и той же пробой, не должна превышать 0,02%.

При содержании безводного хинина 0,2% (m/m) разница между результатами двух параллельных определений, проведенных с одной и той же пробой, не должна превышать 0,01%.

IV. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ НЕОРГАНИЧЕСКИХ СУЛЬФИТОВ

И СУЛЬФИТИРОВАННЫХ КИСЛОТ

ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Метод описывает идентификацию и определение неорганических сульфитов и сульфитированных кислот в косметических продуктах. Он применим только к продуктам, которые содержат воду или спиртовую фазу и концентрацию диоксида серы до 0,2%.

А. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРИНЦИП

При нагревании образца в соляной кислоте выделяется двуокись серы, которая определяется по запаху или по индикаторной бумаге.

2. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

2.1. Соляная кислота (4 М).

2.2. Йодкрахмальная индикаторная бумага

3. ОБОРУДОВАНИЕ

3.1. Стандартное лабораторное оборудование.

3.2. Колба (25 мл), снабженная конденсатором рефлюкс.

4. ПРОЦЕДУРА

4.1. В колбу (3.2) поместить около 2,5 г образца вместе с 10 мл соляной кислоты (2.1).

4.2. Раствор перемешать и нагреть до кипения.

4.3. Проверить выделение диоксида серы по запаху или индикаторной бумаге (2.2).

В. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ВЫРАЖЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ

Содержание сульфитов или гидросульфита в пробе, определенное в соответствии с этим методом, выражается в процентах массы диоксида серы.

2. ПРИНЦИП

После подкисления образца выделяющийся диоксид серы подвергнуть перегонке с раствором перекиси водорода. Образующуюся серную кислоту титровать стандартным раствором гидроксида натрия.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Перекись водорода 0,2% (m/v), свежеприготовленный раствор.

3.2. Ортофосфорная кислота (d₄²⁵= 1,75).

3.3. Метанол.

3.4. Стандартный раствор гидроксида натрия (0,01 М).

3.5. Азот.

3.6. Индикатор: смесь 1: 1 (v/v) метилового-красного (0,03% m/v в этаноле) и метиленового синего (0,05% m/v в этаноле). Раствор профильтровать.

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное лабораторное оборудование.

4.2. Аппарат для дистилляции (см. рисунок).

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. В перегонной колбе А (см. рисунок) взвесить около 2,5 г образца.

5.2. Добавить 60 мл воды и 50 мл метанола (3.3) и перемешать.

5.3. В дистилляционный приемник D (см. рисунок) внести 10 мл перекиси водорода (3.1), 60 мл воды и несколько капель индикатора (3.6). Добавить несколько капель гидроксида натрия (3.4), пока цвет индикатора не станет зеленым.

5.4. Повторить действия, указанные в пункте 5.3 настоящего раздела, для мытья бутылок E (см. рисунок)

5.5. После установки прибора регулируется поток азота (3,5) до примерно 60 пузырьков в минуту.

5.6. Через воронку в перегонной колбе добавить 15 мл ортофосфорной кислоты (3.2).

5.7. Колбу быстро нагреть до кипения, а затем кипятить на слабом огне в течение 30 минут.

5.8. Снять дистилляционный приемник D, промыть трубки и титровать раствором гидроксида натрия (3.4), до изменения цвета индикатора на зеленый (3.6).

6. РАСЧЕТ

Содержание сульфитов или гидросульфита в пробе, в процентах массы рассчитывается по следующей формуле:

где:

М – молярная концентрация раствора гидроксида натрия (3.4),

V – объем гидроксида натрия (3.4), необходимый для титрования (5.8), в миллилитрах,

м – масса пробы (5.1) в граммах.

7. ПОВТОРЯЕМОСТЬ (¹)

При содержании диоксида серы 0,2% m/m разница между результатами двух измерений, выполненных в одном и том же образце, не должна быть больше 0,006%.

Аппараты для дистилляции диоксида серы, согласно Таннеру

(Все размеры приведены в миллиметрах)

V. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ХЛОРАТОВ ЩЕЛОЧНЫХ МЕТАЛЛОВ

ЦЕЛЬ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает идентификацию и определение хлоратов в зубных пастах и других косметических продуктах.

А. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРИНЦИП

Хлораты отделяются от прочих галогенов с помощью тонкослойной хроматографии и определяются путем окисления йодида калия с образованием йода.

2. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

2.1. Стандартные растворы: водные растворы хлората, бромата и йодата калия (0,2% m / v), свежеприготовленные.

2.2. Проявляющий растворитель: раствор аммиака (28% m / v,) в смеси ацетон / бутанол (60/130/30 v / v / v).

2.3. Иодид калия, водный раствор (5% m / v).

2.4. Раствор крахмала (от 1 до 5% m / v).

2.5. Соляная кислота (1 М).

2.6. Подготовленные пластинки для ТСХ с целлюлозой (0,25mm).

3. УСТРОЙСТВО

Стандартное оборудование для тонкослойной хроматографии.

4. ПОРЯДОК

4.1. С водой экстрагируют около 1 г образца, фильтруют и разбавляют до 25 мл.

4.2. На пластину (2.6) наносят около 2 µl раствора (4.1) и по 2 µl каждого из трех эталонных растворов (2.1).

4.3. Помещают пластину в камеру для хроматографии с использованием растворителя 2.2 и разгоняют на три четверти длины пластины (2.6).

4.4. Вынимают пластину из камеры и оставляют ее для испарения растворителя. (Примечание: Это может занять до двух часов).

4.5. Опрыскивают пластину йодидом калия (2.3) и дают высохнуть в течение примерно пяти минут.

4.6. Опрыскивают пластину раствором крахмала (2.4) и дают высохнуть в течение примерно пяти минут.

4.7. Опрыскивают пластину соляной кислотой (2.5).

5. ОЦЕНКА

Если есть наличие хлората, примерно через полчаса появляется синее пятно (или коричневое) с R _F около 0,7-0,8.

Следует отметить, что броматы и йодаты могут вызвать немедленную реакцию. Будьте осторожны, чтобы не перепутать пятна броматов и хлоратов.

В. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ВЫРАЖЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ

Содержание хлоратов в образце, определенное этим способом, выражается в процентах хлората.

2. ПРИНЦИП

Хлораты удаляют цинковой пылью в кислой среде. Образовавшийся хлорид определяют потенциометрическим титрованием раствором нитрата серебра. Аналогичное определение до удаления позволяет определить возможное содержание галогенидов.

3. Реактивы

Все реактивы должны быть аналитической чистоты.

3.1. Уксусная кислота, 80% (m / m).

3.2. Цинковая пыль.

3.3. Стандартный раствор нитрата серебра (0,1 М).

4. УСТРОЙСТВО

4.1. Стандартное лабораторное оборудование.

4.2. Потенциометр, оснащенный индикатором серебряного электрода.

5. ПОРЯДОК

5.1. Подготовка пробы

В центрифужную пробирку взвешивают около 2 г пробы, добавляют около 15 мл уксусной кислоты (3.1) и перемешивают. Через 30 минут центрифугируют при 2000 оборотовв минуту в течение 15 минут. Верхний слой жидкости переносят в мерную колбу на 50 мл. Центрифугирование повторяют дважды, добавляя к остатку 15 мл уксусной кислоты (3.1). Раствор, содержащий хлор, собирают в одну и ту же колбу. Доводят до метки с уксусной кислотой (3.1).

5.2. Удаление хлората

К 20 мл раствора 5.1 добавляют 0,6 г порошка цинка (3.2). Раствор нагревают с обратным холодильником. После кипячения в течение 30 минут раствор охлаждают и фильтруют. Колбу промывают водой. Объединяют фильтрат с промывными водами.

5.3. Определение хлоридов

20 мл раствора 5.2 титруют нитратом серебра (3.3) с помощью потенциометра (4.2). Аналогично титруют 20 мл раствора 5.1.

Примечание. Если продукт содержит производные брома или йода, которые могут выделять бромиды или иодиды после удаления, титрование будет иметь несколько точек эквивалентности. В этом случае объем титрованного раствора(3.3), соответствующего хлоридам будет разницей между последней и предпоследней точками эквивалентности.

6. РАСЧЕТ

Содержание хлоридов в образце (% m / m) рассчитывают по следующей формуле:

где:

В = объем раствора нитрата серебра (3.3), пошедший на титрование раствора 5.2, в мл,

V = объем раствора нитрата серебра (3.3), пошедший на титрование 20 мл раствора 5.1, в мл,

М = молярность стандартного раствора нитрата серебра (3.3)

м = вес образца в граммах.

7. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽²⁾

При содержании хлора от 3 до 5% m / m разница между результатами двух измерений, выполненных в одном и том же образце, должна быть не больше, чем 0,07% m / m.

VI. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЙОДАТА НАТРИЯ.

ЦЕЛЬ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает идентификацию и определение иодата натрия в косметической продукции.

А. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРИНЦИП

Йодат натрия отделяют от других производных галогенов с помощью тонкослойной хроматографии и идентифицируют путем окисления йодида с образованием йода.

2. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

2.1. Стандартные растворы: водные растворы хлората, бромата и йодата калия (0,01% m / v), свежеприготовленные.

2.2. Смесь растворителей для хроматографической камеры.

Раствор аммиака (28% m / v) / ацетон / бутанол (60/130/30 v / v / v).

2.3. Водный раствор йодида калия (5% m / v).

2.4. Раствор крахмала (от 1 до 5% m / v).

2.5. Соляная кислота (1 М).

3. ОБАРУДОВАНИЕ

3.1. Пластины для тонкослойной хроматографии (0,25 mm) с целлюлозой.

3.2. Стандартное оборудование для тонкослойной хроматографии.

4. ПОРЯДОК

4.1. Водой извлекают около 1 г образца, раствор фильтруют и разбавляют до 10 мл.

4.2. На линию старта пластины (3.1) наносят 2 µl этого раствора и по 2 µl каждого из трех эталонных растворов (2.1).

4.3. Пластину помещают в хроматографическую камеру, и разгоняют на три четверти длины пластины с помощью растворителя 2.2.

4.4. Вынимают пластину из камеры и оставляют для испарения растворителя при комнатной температуре. (Примечание: это может занять до двух часов).

4.5. Опрыскивают пластину йодидом калия (2.3) и дают высохнуть в течение примерно пяти минут.

4.6. Опрыскивают пластину раствором крахмала (2.4) и дают высохнуть в течение примерно пяти минут.

4.7. Затем пластины опрыскивают соляной кислотой (2.5).

5. ОЦЕНКА

При наличии йодата сразу появляется синее пятно (цвет может быть коричневым или становится коричневым при стоянии) с R _F примерно от 0 до 0,2.

Следует отметить, что броматы вызывают немедленную реакцию с R _F значением примерно от 0,5 до 0,6 , а хлориды – примерно через 30 минут при R _F значении от 0,7 до 0,8.

В. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ВЫРАЖЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ

Содержание йодата натрия, определенное этим методом, выражается в процентах.

2. ПРИНЦИП

Йодат натрия растворяют в воде и определяют количественно методом ВЭЖХ с использованием колонки C18 с обращенной фазой и колонки с анионным обменом.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты и подходить для высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

3.1. Соляная кислота (4 М).

3.2. Натрий сульфит, водный раствор, 5% m / v.

3.3. Йодат натрия.

Готовят раствор, содержащий 50 мг йодата натрия в 100 мл воды.

3.4. Ортофосфат калия.

3.5. Динатриевая соль ортофосфорной кислоты • 2H ₂ O.

3.6. Подвижная фаза для ВЭЖХ: 3,88 г дигидрогенофосфата калия (3.4) и 1,19 г динатриевой соли ортофосфорной кислоты • 2H ₂ O (3,5) растворяют в 1 л воды.

рН полученного таким образом раствора 6,2.

3.7. Универсальная индикаторная бумага, рН 1-11.

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное лабораторное оборудование.

4.2. Бумажный фильтр с диаметром 110 mm, Шлейхер и Скулл № 575, или эквивалент.

4.3. Высокоэффективная жидкостная хроматография с детектором с переменной длиной волны.

4.4. Длина 120 mm, внутренний диаметр 4,6 mm колонки, две колонки соединенных последовательно: первая колонка – Нуклеосил ^® 5 С18 или эквивалент, вторая колонка – Vydac^TM -301-SB или эквивалент.

5. ПОРЯДОК

5.1. Подготовка образца

5.1.1. Образцы жидкости (шампуни)

В мерную колбу на 10 мл, снабженную притертой пробкой, взвешивают массу пробы 1,0 г ,доводят до метки водой и перемешивают.

При необходимости раствор фильтруют.

Определяют йодат методом ВЭЖХ, как описано в разделе 5.2.

5.1.2. Твердые образцы (мыла)

Осторожно отделяют часть образца и взвешивают из нее 1,0 г в мерный цилиндр на 100 мл, снабженный стеклянной пробкой и доводят до 50 мл водой, энергично встряхивают в течение одной минуты.

Смесь центрифугируют и фильтруют через фильтровальную бумагу (4.1) или выдерживают в течение ночи.

Желеобразный раствор энергично встряхивают и фильтруют через фильтровальную бумагу (4.1).

Определяют йодат методом ВЭЖХ, как описано в разделе 5.2.

5.2. Хроматография

Скорость потока: 1 мл / мин.

Детектор с длиной волны (4.2): 210 nm.

Объем вкола: 10 µl.

Измерение: площадь пика.

5.3. Калибровка

Вносят в мерную колбу на 50 мл 1,0; 2.0; 5,0; 10,0 и 20,0 мл раствора йодата натрия (3.3). Доводят до метки и перемешивают.

Полученные растворы содержат 0,01; 0.02; 0,05; 0,10 и 0,20 мг йодида натрия на мл.

В жидкостный хроматограф (4.2) вводят 10 µl каждого стандартного раствора йодата и получают хроматограмму. Определяют площадь пиков йодата и строят кривую зависимости площадей пиков от концентрации йодата натрия.

6. РАСЧЕТ

Содержание йодата натрия, в процентах к массе (% m/m) вычисляется по следующей формуле:

где:

m = масса образца (5.1) в граммах,

V = общий объем раствора образца, полученного по 5.1, в мл,

C = концентрация, определенная по калибровочной кривой (5.3) в мг йодата натрия на миллилитр.

7. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽²⁾

При содержании йодата натрия 0,1% (m / m) разница между результатами двух измерений, выполненных в одном и том же образце, не должна быть больше, чем 0,002%.

8. Подтверждение результатов

8.1. Принцип

В подкисленном растворе косметического продукта содержание йодата (IO₃-) востанавливают до йода (I-) сульфитом, и полученный таким образом раствор анализируют методом ВЭЖХ. Если пик, время удерживания которого соответствует времени удерживания йодата, исчезает после обработки сульфитом, начальный пик может быть с высокой вероятностью пик йодата.

8.2. Процедура

С помощью пипетки в коническую колбу вносят 5 мл раствора образца, полученного в соответствии с 5.1.

Значение рН раствора регулируют до 3 или менее соляной кислотой (3.1) с помощью универсальной индикаторной бумаги (3.7).

Добавляют три капли раствора сульфита натрия (3.2) и перемешивают.

Вводят 10 µl раствора в жидкостный хроматограф (4.2)

Полученную хроматограмму сравнивают с хроматограммой по отношению к той же пробе, как описано в разделе 5.

____________________________________

(¹) ISO 5725

(²) Эти значения приведены для информации и соответствуют точным массам 4.11 4.12, 4.13 .

Примечание. Эти растворы могут быть получены другим способом

Приложение № 14

к Санитарному Регламенту

о косметических продуктах

МЕТОДЫ АНАЛИЗА,

необходимые для проверки состава косметической продукции (V)

Методы анализа, необходимые для проверки состава косметической продукции (далее – Методы), приведены полностью в соответствие с положениями Пятой Директивы от 9 сентября 1993 года о сближении законов государств-членов, относящихся к методам анализа, необходимым для проверки состава косметической продукции (93/73/ ЕЕС), опубликованной в Официальном Журнале Европейских Сообществ (JOCE) L 231/34 от 14 сентября1993 г.

I. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ НИТРАТА

СЕРЕБРА В КОСМЕТИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ

А. ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Данный метод описывает определение нитрата серебра в составе водных косметических продуктов.

2. ПРИНЦИП

Серебро идентифицируется характерным белым осадком хлорид-ионов.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Раствор соляной кислоты, 2 М

3.2. Аммиак: концентрированный раствор гидроксида аммония (d₂₀= 0,88 г/мл, разбавить равным объемом воды и перемешать.

3.3. Раствор азотной кислоты, 2 М

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное лабораторное оборудование.

4.2. Центрифуга.

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. В центрифужную пробирку добавить примерно 1 г пробы и пипеткой несколько капель 2 М раствора соляной кислоты (3.1), до полного осаждения. Смешать и центрифугировать.

5.2. Супернатант удалить и осадок промыть один раз пятью каплями холодной воды. При этом воду слить.

5.3. В центрифужную пробирку добавить количество воды, равное объему осадка. Нагреть до кипения и перемешать.

5.4. Горячую смесь центрифугировать и удалить прозрачный раствор.

5.5. К осадку добавить несколько капель раствора аммиака (3.2), смешать и центрифугировать

5.6. На стекло нанести каплю раствора супернатанта и добавить несколько капель азотной кислоты (3.3).

5.7. Белый осадок указывает на присутствие серебра.

В. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Данный метод описывает определение нитрата серебра в качестве серебра в косметических продуктах, предназначенных для окрашивания ресниц и бровей.

2. ПРИНЦИП

Серебро в продукте определяется атомно-абсорбционной спектрометрией.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитического качества.

3.1. Раствор азотной кислоты, 0,02 М.

Стандартные растворы серебра.

3.2.1. Стандартный раствор серебра: 1000 µg/мл в 0,5 М раствора азотной кислоты ("SpectrosoL" или эквивалент).

3.2.2. Разбавленный стандартный раствор серебра: 100 µg/мл; пипеткой перенести 10 мл основного стандартного раствора серебра (3.2.1) в колбу на 100 мл. Довести до метки 0,02 М раствором азотной кислоты (3.1) и перемешать. Этот стандартный раствор должен быть свежеприготовленным и храниться в стеклянной темной бутылке.

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное лабораторное оборудование

4.2. Атомный спектрофотометр поглощения, оснащеный лампой (с полым катодом из серебра)

5. ПРОЦЕДУРА

5.1.Приготовление пробы

Взвесить 0,1 г (грамм) с точностью до 0,001г однородной пробы продукта. Перевести количественно в колбу на 1 л 0,02 М и довести до метки раствором азотной кислоты (3.1) и перемешать.

5.2. Условия атомно-абсорбционной спектрометрии

5.3.Эталонирование

5.3.1. В набор мерных колб на 100 мл внести 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 и 5,0 мл разбавленного стандартного раствора серебра (3.2.2).Каждую колбу довести до метки при помощи 0,02 М раствора азотной кислоты (3.1) и перемешать. Эти растворы содержат 1,0, 2.0; 3.0; 4,0 и 5,0 µg серебра на миллилитр.

5.3.2. Измерить поглощение раствора 0,02 М азотной кислоты (3.1), полученное значение использовать в качестве нулевой концентрации серебра для эталонной кривой. Измерить поглощение каждого стандартного раствора серебра (5.3.1) Построить эталонную кривую определением соотношения между оптической плотностью и концентрацией серебра

5.4. Определение

Измерить оптическую плотность образца (5.1). С эталонной кривой считать концентрацию серебра, соответствующую значению оптической плотности, полученной для раствора пробы.

6. РАСЧЕТ

Содержание нитрата серебра в образце в % массы (m/m) рассчитать по формуле:

где:

m – масса в граммах пробы, отобранной для анализа (5.1);

с – концентрация серебра в растворе образца (5.1),в мг/мл, полученная на эталонной кривой.

7. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

При содержании нитрата серебра 4% (m/m) разница между результатами двух параллельных определений, проводимых с одной и той же пробой, не должна превышать 0,05% (m/m).

II. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДИСУЛЬФИДА

СЕЛЕНА В ШАМПУНЯХ ПРОТИВ ПЕРХОТИ

А. ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает идентификацию дисульфида селена в шампуни против перхоти

2. ПРИНЦИП

Селен идентифицируется характерным цветом от желтого до оранжевого, который получают в результате реакции с мочевиной и йодидом калия.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Концентрированная азотная кислота (d₂₀= 1,42 г/мл).

3.2. Мочевина

3.3. Раствор йодида калия, 10% (m/v): растворить 10 г йодида калия в 100 мл воды

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное лабораторное оборудование.

4.2. Реакционная емкость объемом 100 мл.

4.3. Автоклав с нагревательным элементом.

4.4.Фильтровальная бумага (ватман № 42 или эквивалент) или с мембранным фильтром 0,45 мм.

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. Около 1 г шампуня внести в реакционную емкость (4.2), добавить 2,5 мл концентрированной азотной кислоты (3.1) и оставить при 150˚С в течение 30 мин. в автоклаве с нагревательным элементом (4.3)

5.2. Пробу необходимо разбавить водой до 25 мл и профильтровать через фильтровальную бумагу или мембранный фильтр 0,45мм (4.4).

5.3. К 2,5 мл фильтрата добавить 5 мл воды, 2,5 г мочевины и прокипятить. Охладить и добавить 1 мл раствора йодида калия (3.3).

5.4. Желто-оранжевая окраска, которая быстро темнеет при стоянии, указывает на присутствие селена.

В. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод применяется для определения дисульфида селена в шампунях против перхоти, содержащих до 4,5% (m/m) дисульфида селена.

2. ПРИНЦИП

Образец обрабатывается азотной кислотой и селен определяется атомно-абсорбционной спектрометрией.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты

3.1. Концентрированная азотная кислота (d₂₀=1,42 г/мл

3.2. Раствор азотной кислоты, 5% (v/v):50 мл концентрированной азотной кислоты добавить к 500 мл воды в химическом стакане, постоянно помешивая. Этот раствор перенести в колбу на 1 л и довести до метки водой.

3.3. Исходный стандартный раствор селена, 1000 µg/мл в 0,5 М азотной кислоты ("SpectrosoL" или эквивалент)

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное лабораторное оборудование

4.2. Реакционная емкость с объемом 100 мл

4.3. Автоклав с нагревательным элементом

4.4. Фильтровальная бумага (ватман № 42 или эквивалент) или мембранный фильтр 0,45 мм

4.5. Атомно-абсорбционный спектрофотометр поглощения, оснащенный селеновой лампой

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. Приготовление пробы

5.1.1.Взвесить около 0,2 г (М) с точностью 0,001 г гомогенной пробы шампуня в реакционной емкости (4.2).

5.1.2. Добавить 5 мл концентрированной азотной кислоты (3.1) и оставить в автоклаве (4.3) при 150°С в течение 1 часа.

5.1.3. Раствор охладить и разбавить водой до 100 мл. Смесь профильтровать через фильтровальную бумагу или мембранный фильтр 0,45 mm (4.4) и сохранить отфильтрованный раствор для определения.

5.2. Условия атомно-абсорбционной спектрометрии

5.3.Эталонирование

5.3.1. В набор мерных колб на 100 мл внести 1,0;2.0;3.0;4,0 и 5,0 мл стандартного раствора селена (3.3). Каждую колбу довести до метки с помощью 5% (v/v) раствора азотной кислоты (3.2) и перемешать. Эти растворы содержат 10, 20, 30, 40 и 50 µg селена.

5.3.2. Измерить поглощение 5% (v/v) раствора азотной кислоты (3.2), и это значение использовать в качестве нулевой концентрации селена для эталонной кривой. Измерить поглощение каждого стандартного раствора селена (5.3.1).

5.4. Определение

Измерить оптическую плотность пробы (5.1). С эталонной кривой считать концентрацию селена, соответствующую значению оптической плотности, полученной для раствора пробы.

6. РАСЧЕТ

Содержание селена в пробе в % массы (m/m) рассчитать по формуле:

где:

м – масса в граммах пробы, отобранной для анализа (5.1.1);

с – концентрация селена в растворе образца (5.1.3), из эталонной кривой в мкг / мл.

7. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

При содержании дисульфида селена 1% (m/m) разница между результатами двух параллельных определений, проведенных с одной и той же пробой, не должна превышать 0,05% (m/m).

III. ОПРЕДЕЛЕНИЕ РАСТВОРИМОГО БАРИЯ

И СТРОНЦИЯ В ПИГМЕНТАХ В ВИДЕ СОЛЕЙ

ИЛИ ЛАКОВ

А. ОПРЕДЕЛЕНИЕ РАСТВОРИМОГО БАРИЯ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает извлечение и определение растворимого бария из пигментов в виде солей или лаков.

2. ПРИНЦИП

Пигмент экстрагируют 0,07 М раствором соляной кислоты при определенных условиях и количество бария в экстрагентах определяется атомно-абсорбционной спектрометрией.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Этанол, абсолютный.

3.2. Раствор соляной кислоты – 0,07 М.

3.3. Раствор соляной кислоты – 0,5 М.

3.4. Раствор хлорида калия, 8% (m/v): 16 г хлорида калия растворить в 200 мл 0,07 М соляной кислоты (3.2).

Стандартные растворы бария

3.5.1. Стандартный раствор бария, 1000µg/мл в 0,5 М азотной кислоты ("SpectrosoL" или эквивалент)

3.5.2. Рабочий стандартный раствор бария, 200 µg/мл: перенести в мерную колбу на 100 мл пипеткой 20,0 мл исходного стандартного раствора бария (3.5.1) и довести до метки 0,07 М раствором соляной кислоты (3.2) и перемешать.

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное лабораторное оборудование

4.2. рН-метр с точностью ± 0,02 единиц

4.3. Встряхиватель.

4.4. Мембранный фильтр с размером пор 0,45 m

4.5. Атомно-абсорбционный спектрофотометр, оснащенный лампой бария (с полым катодом).

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. Приготовление пробы

5.1.1. В конической колбе с точностью взвесить около 0,5 г (М) пигмента. Для того чтобы обеспечить достаточный объем для эффективного перемешивания пигмента, необходимо использовать колбу емкостью менее 150 мл.

5.1.2. В коническую колбу пипеткой добавить 1,0 мл этанола (3.1) и встряхивать колбу, чтобы добится полного смачивания пигмента. Бюреткой внести необходимое количество 0,07 М соляной кислоты (3.2), чтобы получить точное соотношение между объемом кислоты и массой пигмента 50 мл/г. Это общий объем смеси экстрактанта, включая этанол. Содержимое колбы встряхивать в течение 5 секунд, чтобы обеспечить тщательное перемешивание компонентов.

5.1.3. Измерение рН полученной суспензии с помощью рН-метра (4.2) и, если оно выше 1,5, по каплям добавить 0,5 m соляной кислоты (3.3) для достижения рН в диапазоне от 1,4 до 1, 5.

5.1.4. Закрыть колбу пробкой и немедленно поместить во встряхиватель (4.3) на 60 минут. Встряхиватель должен работать с достаточной скоростью до пенообразования. Профильтровать через мембранный фильтр с размером пор 0,45 mm (4.4) и собрать фильтрат. Перед фильтрацией экстракт центрифугировать. Пипеткой внести 5,0 мл фильтрата в мерную колбу на 50 мл; довести до метки раствором 0,07 М соляной кислоты (3.2) и перемешать. Этот раствор использовать для определения стронция (раздел B).

5.1.5. Пипеткой внести 5,0 мл раствора хлорида калия (3.4) в мерную колбу на 100 мл и порцию (W_Ba/мл) разбавленного фильтрата (5.1.4), чтобы получить ожидаемую концентрацию бария между 3 и 10 µg/мл (аликвота 10 мл является хорошей отправной точкой). Довести до метки раствором 0,07 М соляной кислоты (3.2) и перемешать.

5.1.6. Определить концентрацию бария в растворе (5.1.5) атомно-абсорбционной спектрометрией в тот же день.

5.2. Условия атомно-абсорбционной спектрометрии

5.3. Эталонирование

5.3.1. В набор мерных колб на 100 мл перенести пипеткой 1,0;2.0;3.0;4,0 и 5,0 мл стандартного раствора бария (3.5.2). В каждую колбу перенести пипеткой 5,0 мл раствора хлорида калия (3.4), довести до метки раствором 0,07 М соляной кислоты (3.2) и перемешать. Эти растворы содержат 2,0;4.0;6,0;8,0 и 10,0 µg бария на 1мл.

Аналогичным образом приготовить чистый раствор, без использования стандартного раствора бария.

5.3.2. Измерить оптическую плотность чистой пробы (5.3.1) и использовать полученное значение как концентрацию бария на эталонной кривой. Измерить оптическую плотность каждого стандартного раствора бария (5.3.1) и построить эталонную кривую.

5.4. Определение

Измерить оптическую плотность пробы (5.1.5). По эталонной кривой определить концентрацию бария, соответствующую значению оптической плотности, полученной для раствора пробы.

6. РАСЧЕТ

Содержание растворимого бария в пигментах в % массы (m/m) рассчитывают по формуле:

где:

m – масса пробы, взятой для анализа (5.1.1) в г;

с – концентрация бария в растворе пробы в µg на 1 мл, (5.1.5), полученная из эталонной кривой;

V – общий объем экстракта (5.1.2) в мл;

W_Ba- объем экстракта, в мл, указанного в пункте 5.1.5, настоящего раздела.

7. ПОВТОРЯЕМОСТЬ

Воспроизводимость этого метода для растворимого бария 2% (m/m). составляет 0,3%(ISO 5725)

8. ПРИМЕЧАНИЕ

8.1. При определенных условиях поглощение бария может быть повышено за счет присутствия кальция. Это может быть предотвращено добавлением иона магния в концентрацию 5 г на 1л (2).

8.2. В качестве альтернативы пламенной атомно-абсорбционной спектрометрии можно использовать атомно-эмиссионную спектрометрию с индуктивно-связанной плазмой.

В. ОПРЕДЕЛЕНИЕ РАСТВОРИМОГО СТРОНЦИЯ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает процедуру извлечения и определения растворимого стронция из пигментов в форме солей или лаков.

2. ПРИНЦИП

Пигмент экстрагируется 0,07 М раствором соляной кислоты при определенных условиях и количество стронция в экстрагентах определяется атомно-абсорбционной спектрометрией.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Этанол, абсолютный

3.2. Раствор соляной кислоты, 0,07 М

3.3. Раствор хлорида калия, 8% (m/v): 16 г хлорида калия растворить в 200 мл 0,07 М соляной кислоты (3.2).

Стандартные растворы стронция

3.4.1. Исходный стандартный раствор стронция, 1000 µg/мл в 0,5 М растворе азотной кислоты ("SpectrosoL" или эквивалент).

3.4.2. Разбавленный стандартный раствор стронция, 100µg/мл: в колбу на 100 мл внести пипеткой 10,0 мл исходного стандартного раствора стронция (3.4.1). Довести до метки 0,07 М раствором соляной кислоты (3.2) и перемешать.

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное лабораторное оборудование

4.2. Мембранный фильтр с размером пор 0,45 µm

4.3. Атомно-абсорбционный спектрофотометр, оснащеный стронциевой лампой (с полым катодом)

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. Приготовление пробы

Раствор, полученный в разделе A, пункт 5.1.4, используется для определения растворимого стронция.

5.1.1. В мерную колбу на 100 мл внести пипеткой 5,0 мл раствора хлорида калия (3.3) и аликвоту (W_Sr мл) разбавленного фильтрата (A.5.1.4) для получения концентрации стронция от 2 до 5 µg/мл (часть аликвоты на 25 мл является хорошей отправной точкой). Довести до метки 0,07 m раствором соляной кислоты (3.2) и перемешать.

5.1.2. Концентрация стронция в растворе (5.1.1) атомно-абсорбционной спектрометрией измеряется в тот же день.

5.2. Условия атомно-абсорбционной спектрометрии

Пламя: закись азота / ацетилен

Длина волны: 460,7 нм

Коррекция фона: нет

Условия горения: снижение пламени для максимального поглощения необходимо оптимизировать высоту горелки и состояние топлива

5.3. Эталонирование

5.3.1. В набор мерных колб на 100 мл пипеткой внести 1,0;2.0;3.0;4.0 и 5,0 мл стандартного раствора стронция (3.4.2).В каждую колбу с помощью пипетки добавить 5,0 мл раствора хлорида калия (3.3) и довести до метки 0,07 М раствором соляной кислоты (3.2) и перемешать.Эти растворы содержат 1,0;2.0;3.0;4,0 и 5,0 µg стронция на 1мл.

Аналогичным образом приготовить чистый раствор, без добавления стандартного раствора стронция.

5.3.2. Измерить оптическую плотность чистого раствора (5.3.1) и использавать полученное значение в качестве нулевой концентрации стронция на эталонной кривой. Измерить поглощение каждого стандартного раствора стронция (5.3.1) для построения эталонной кривой.

5.4. Определение

Измерить оптическую плотность пробы (5.1.1). Из эталонной кривой определить концентрацию стронция, соответствующую значению оптической плотности, полученной для раствора пробы.

6. РАСЧЕТ

Содержание растворимого стронция в пигментах в % массы (m/m) рассчитать по формуле:

где:

m – масса в граммах пробы, отобранной для анализа (А.5.1.1);

с – концентрация стронция в растворе пробы (5.1.1), по эталонной кривой, в µg на 1 мл;

V – общий объем экстракта в мл (А.5.1.2)

W_Sr- объем экстракта в мл, указанный в пункте 5.1.1 настоящего раздела.

7. ПОВТОРЯЕМОСТЬ

Повторяемость этого метода составляет 0,09 %, при содержании растворимого стронция 0,6% (m/m).

8. ПРИМЕЧАНИЕ

В качестве альтернативы пламенной атомно-абсорбционной спектрометрии можно использовать атомн-эмиссионную спектрометрию с индуктивно-связанной плазмой.

IV. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕНЗИЛОВОГО

СПИРТА В КОСМЕТИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ

А. ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Способ описывает идентификацию бензилового спирта в косметических продуктах.

2. ПРИНЦИП

Бензиловый спирт идентифицируется с помощью тонкослойной хроматографии на пластинах с силикагелем.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Бензиловый спирт.

3.2. Хлороформ.

3.3. Этанол, абсолютный.

3.4. n-Пентан.

3.5. Подвижная фаза: диэтиловый эфир

3.6. Стандартный раствор бензилового спирта: в мерной колбе на 100 мл взвесить 0,1 г бензилового спирта (3.1), довести до метки этанолом (3.3) и перемешать.

3.7. ТСХ, стекло, 100 мм × 200 мм или 200 мм × 200 мм, покрытое слоем силикагеля 60 F₂₅₄, с толщиной 0,25 мм.

3.8. Реагент для окрашивания: кислота 12-молибденовая, 10% (m/v) в этаноле (3.3).

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное оборудование для ТСХ

4.2. Хроматографическая камера с двумя отделениями, размером примерно 80×230×240мм

4.3. Хроматографическая бумага: ватман, или эквивалент

4.4. УФ свет с длиной волны 254 nm.

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. Приготовление пробы

В мерной колбе на 10 мл взвесить 1,0 г продукта для анализа. Добавить 3 мл хлороформа (3.2) и энергично встряхивать, пока продукт не растворится. Довести до метки этанолом (3.3) и энергично встряхивать до получения прозрачного или почти прозрачного раствора.

5.2. Тонкослойная хроматография

5.2.1. Хроматографическую камеру (4.2) насытить n-Пентаном (3.4) следующим образом: стенку камеры, прилегающей к задней части, выстлать хроматографической бумагой (4.3) так, чтобы нижний край бумаги находился в желобе. В задний отсек перенести 25 мл n-Пентана (3.4), вылив его на открытую поверхность хроматографической бумаги. Закрыть крышкой и оставить в течение 15 мин.

5.2.2. На соответствующие точки линии старта хроматографической пластины (3.7) нанести 10 µl раствора пробы (5.1) и 10 µl стандартного раствора бензилового спирта (3.6). Дать высохнуть.

5.2.3. В переднюю часть камеры пипеткой внести 10 мл диэтилового эфира (3.5) и немедленно положить туда пластину. Быстро закрыть крышкой и развивать хроматограмму на расстоянии 150 mm от линии старта. Вынуть пластину из хроматографической камеры и сушить при комнатной температуре.

5.2.4. Пластину (5.2.3) изучить при ультрафиолетовом свете и отметить места фиолетовых пятен. Опрыскать пластину проявляющим веществом (3.8), а затем нагревать в течение 15 минут при температуре 120°С. Бензиловый спирт проявляется темно-синим цветом.

5.2.5. Рассчет R_f- значения для стандартного раствора бензилового спирта. Темно-синее пятно с тем же R_f -значением, полученное из раствора пробы, указывает на наличие бензилового спирта.

Предел обнаружения: 0,1 µg бензилового спирта.

В. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод применяется для определения бензилового спирта в косметических продуктах.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Количество бензилового спирта определяется с помощью этого метода и выражается в % массы (% m/m).

3. ПРИНЦИП

Проба экстрагируется метанолом и количество бензилового спирта в экстракте определяется методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты и подходить для ВЭЖХ.

4.1. Метанол

4.2. 4-этоксифенол

4.3. Бензиловый спирт

4.4. Подвижная фаза: метанол (4,1) / вода = 45: 55 (v/v)

4.5. Исходный раствор бензилового спирта: Взвесить с точностью около 0,1g бензилового спирта (4.3) в мерной колбе на 100 мл. Довести до метки метанолом (4.1) и перемешать.

4.6. Исходный раствор внутреннего стандарта: в мерной колбе на 100 мл взвесить около 0,1 г 4-этоксифенола (4.2). Довести до метки метанолом (4.1) и перемешать.

4.7. Стандартные растворы: в набор мерных колб внести пипеткой по 25 мл исходного раствора бензилового спирта (4.5) и основного раствора внутреннего стандарта (4.6) в соответствии с приведенной ниже таблицей. Довести до метки метанолом (4.1) и перемешать.

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Стандартное лабораторное оборудование

5.2. Хроматограф для жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с УФ-детектором с переменной длиной волны и циклом ввода 10µl.

5.3. Аналитическая колонка: колонка из нержавеющей стали 250 мм × 4,6 мм, заполненая Spherisorb ODS 5µm или эквивалент.

5.4. Водяная баня.

5.5. Ультразвуковая баня.

5.6. Центрифуга.

5.7. Центрифужные пробирки объемом 15 мл.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Приготовление пробы

6.1.1. В центрифужную пробирку (5.7) внести около 0,1 г (M) образца с точностью до 0,001 г и добавить 5 мл метанола (4.1).

6.1.2. Нагреть в течение 10 минут на водяной бане (5.4) при 50°С, затем поместить пробирку в ультразвуковую баню (5.5), в которой полностью диспергируется проба.

6.1.3. Охладить и затем центрифугировать при 3500 оборотов в минуту в течение 5 минут.

6.1.4. Надосадочную жидкость перенести в мерную колбу на 25 мл.

6.1.5. Для пробы повторно экстрагировать 5 мл метанола (4.1). Экстракты объединить в мерную колбу на 25 мл.

6.1.6. В мерную колбу на 25 мл пипеткой внести 2,0 мл исходного раствора внутреннего стандарта (4.6). Довести до метки метанолом (4.1) и перемешать. Этот раствор используется на этапе определения, указанного в пункте 6.4 настоящей главы.

6.2. Хроматография

6.2.1.Жидкостный хроматограф (5.2) готовится к работе в обычном порядке. Регулируется поток подвижной фазы (4.4) до 2,0 мл / мин.

6.2.2. Длина волны УФ-детектора (5.2) на 210 nm.

6.3. Эталонирование

6.3.1. Впрыснуть по 10 µl каждого из стандартных растворов бензилового спирта (4.7) и измерить площадь пиков бензилового спирта и 4-этоксифенола.

6.3.2. Для каждого из стандартных растворов бензилового спирта (4.7) рассчитать соотношение площадей пиков бензилового спирта и 4-этоксифенола с построением стандартной кривой и использованием данных коэффициентов по оси ординат и соответствующих концентраций бензилового спирта в µg на 1 мл на оси абсцисс.

6.4. Определение

6.4.1. Вколоть 10 µl раствора образца (6.1.6) и измерить величину пиков бензилового спирта и 4-этоксифенола. Рассчитать соотношение между площадями пиков бензилового спирта и 4-этоксифенола. Эту процедуру повторить с другими аликвотами по 10 µl раствора пробы до получения устойчивых результатов.

6.4.2. Из эталонной кривой (6.3.2) рассчитать концентрацию бензилового спирта, соответствующую соотношению общей площади пиков бензилового спирта и 4-этоксифенола.

7. РАСЧЕТ

Содержание бензилового спирта в пробе, % (m/m), вычисляется по следующей формуле:

где:

m – масса в граммах пробы, отобранной для анализа (6.1.1);

с – концентрация бензилового спирта в растворе пробы (6.1.6) из эталонной кривой, в µg на 1мл.

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ⁽¹⁾

При содержании бензилового спирта,1% (м/м) разница между двумя параллельными определениями одной и той же пробы не должна превышать 0,10%.

V. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ЦИРКОНИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИРКОНИЯ,

АЛЮМИНИЯ И ХЛОРА В НЕАЭРОЗОЛЬНЫХ АНТИПЕРСПИРАНТАХ

Способ включает пять этапов:

А. Идентификация циркония.

В. Определение циркония.

С. Определение алюминия.

D. Определение хлора.

Е. Расчет соотношения атомов алюминия к атомам циркония и соотношения атомов алюминия и атомов циркония к атомам хлора.

А. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИРКОНИЯ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает идентификацию циркония в неаэрозольных антиперспирантах. Не существует описанных методов для идентификации комплекса гидроксида алюминия и циркония хлорида [Аl_XZr (OH)_YCl_Z· nH₂O].

2. ПРИНЦИП

Цирконий идентифицируется характерным красно-фиолетовым осадком, полученным с ализариновым красным S в сильно кислых условиях.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Концентрированная соляная кислота (d₂₀= 1,18 г/мл)

3.2. Раствор ализариновый красный S (Cl 58005): 2% (m/v) сульфонат ализарина на водном растворе гидрокарбоната натрия.

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное лабораторное оборудование

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. В пробирку на 1 г пробы добавить 2 мл воды. Закрыть пробкой и встряхнуть.

5.2. Добавить три капли ализаринового красного S (3.2), а затем 2 мл концентрированной соляной кислоты (3.1).Закрыть пробкой и встряхнуть.

5.3. Дать постоять в течение 2 минут.

5.4. Красно-фиолетовый окрашенный раствор супранатант и осадок указывают на присутствие циркония.

B. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИРКОНИЯ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод пригоден для определения циркония в циркониевых комплексах гидроксидахлорида алюминия и циркония до максимальной концентрации циркония в неаэрозольных антиперспирантах 7,5 % (m/m).

2. ПРИНЦИП

Цирконий экстрагируется из продукта в кислых условиях и определяется атомно-абсорбционной спектрометией в пламени.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Концентрированная соляная кислота (d₂₀= 1,18 г/мл)

3.2. Раствор соляной кислоты, 10% (v/v): в химический стакан внести 500 мл воды и 100 мл концентрированной соляной кислоты (3.1) при постоянном перемешивании. Этот раствор перенести в мерную колбу на 1 л и довести до метки водой.

3.3. Исходный стандартный раствор циркония: 1 000 µg /мл в 0,5 М растворе хлористоводородной кислоты ("SpectrosoL" или эквивалент).

3.4. Раствор хлорида алюминия (гидратированный) (AlCl₃· 6H₂O): 22,6 г гексагидрата хлорида алюминия растворить в 250 мл 10% (v/v) раствора соляной кислоты (3.2).

3.5. Раствор хлорида аммония: 5,0 г хлорида аммония растворить в 250 мл 10% (v/v) раствора соляной кислоты (3.2).

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное лабораторное оборудование

4.2. Нагреватель с магнитной мешалкой

4.3. Фильтровальная бумага (ватман № 41 или эквивалент)

4.4. Атомно-абсорбционный спектрофотометр с циркониевой лампой (с полым катодом)

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. Приготовление пробы

5.1.1. В стакан на 150 мл внести с точностью до 0,001 г около 1,0 г (М) однородной пробы продукта. Добавить 40 мл воды и 10 мл концентрированной соляной кислоты (3.1).

5.1.2. Поместить стакан на магнитную мешалку (4.2), начать перемешивание и нагреть до кипения. Для того чтобы предотвратить быстрое высыхание, стакан накрывают часовым стеклом. После кипячения в течение 5 минут стакан снять и охладить до комнатной температуры.

5.1.3. Содержимое стакана профильтравать через фильтровальную бумагу (4.3) в мерную колбу на 100 мл. Стакан промыть два раза 10 мл воды и промывные воды после фильтрации добавить в колбу. Довести до метки водой и перемешать. Этот раствор используется для определения алюминия (раздел C).

5.1.4. Пипеткой перенести 20,0 мл раствора пробы (5.1.3) в мерную колбу на 50 мл. Добавить 5,0 мл раствора хлорида алюминия (3.4) и 5,0 мл раствора хлорида аммония (3.5). Полученный объем довести до метки 10% (v/v) раствором хлороводородной кислоты (3.2) и перемешать.

5.2. Условия атомно-абсорбционной спектрометрии

5.3. Эталонирование

5.3.1.В набор из мерных колб на 50 мл с помощью пипетки внести 5,00;10.00;15.00;20.00 и 25.00 мл исходного стандартного раствора циркония (3.3). В каждую колбу с помощью пипетки добавить 5,0 мл раствора хлорида алюминия (3.4) и 5,00 мл раствора хлорида аммония (3.5). Полученный объем довести до метки 10% (v/v) раствором хлороводородной кислоты (3.2) и перемешать. Эти растворы содержат 100, 200, 300, 400 и 500 µg/мл циркония.

Аналогичным образом, приготовить чистый раствор, без добавления стандартного раствора циркония.

5.3.2. Измерить оптическую плотность чистой пробы (5.3.1) и использовать полученное значение в качестве нулевой концентрации циркония для эталонной кривой. Измерить поглощение каждого стандартного раствора циркония (5.3.1) для построения эталонной кривой.

5.4. Определение

Измерить оптическую плотность пробы (5.1.4). Из стандартной кривой считать концентрацию циркония, соответствующую значению оптической плотности, полученной для раствора пробы.

6. РАСЧЕТ

Содержание циркония в образце рассчитать в % массы (m/m) по формуле:

где:

m – масса в граммах пробы, отобранной для анализа (5.1.1);

с – концентрация циркония в растворе образца (5.1.4) в µg/ml, из калибровочного графика

7. ПОВТОРЯЕМОСТЬ⁽¹⁾

При содержании циркония 3,00% (m/m), разница между двумя параллельными определениями одного и того же образца не должна превышать 0,10% (m/m).

8. ПРИМЕЧАНИЕ

В качестве альтернативы пламенной атомно-абсорбционной спектрометрии используется атомо-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой.

С. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АЛЮМИНИЯ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод пригоден для определения алюминия в гидроксихлоридных алюминий-циркониевых комплексах до максимальной концентрации алюминия в неаэрозольных антиперспирантах 12% (m/m).

2. ПРИНЦИП

Алюминий экстрагируется из продукта в кислых условиях и определяется атомно-абсорбционной спектрометрией в пламени.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Концентрированная соляная кислота (d₂₀= 1,18 г/мл)

3.2. Раствор соляной кислоты, 1% (v/v): в химический стакан внести 500 мл воды и 10 мл концентрированной соляной кислоты (3.1) при постоянном перемешивании.Этот раствор перенести в мерную колбу на 1 л и довести до метки водой.

3.3. Стандартный раствор алюминия: 1 000 µg/ml в 0,5 М растворе хлористоводородной кислоты ("SpectrosoL" или эквивалент).

3.4. Реагент хлористого калия: 10,0 г хлорида калия растворить в 250 мл 1% (v/v) раствора соляной кислоты (3.2).

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное лабораторное оборудование

4.2. Атомно-абсорбционный спектрометр с алюминиевой лампой (полым катодом).

5. ПРОЦЕДУРА

5.1.Приготовление пробы

Раствор, полученный в пункте.5.1.3, используется для определения содержания алюминия.

5.1.1. 5,00 мл раствора пробы (В.5.1.3) внести в мерную колбу на 100 мл и добавить 10,0 мл реагента хлорида калия (3.4) Полученный объем довести до 1% (v/v) раствором соляной кислоты (3.2) и перемешать.

5.2. Условия атомно-абсорбционной спектрометрии

5.3. Эталонирование

5.3.1. В набор из мерных колб на 100 мл внести пипеткой 1,00;2.00;3.00;4.00 и 5.00 мл исходного стандартного раствора алюминия (3.3). В каждую колбу пипеткой добавить 10,00 мл реагента хлорида калия (3.4), довести объем до метки 1% (v/v) раствором соляной кислоты (3.2) и перемешать. Эти растворы содержат 10, 20, 30, 40 и 50 µg/ml алюминия.

Аналогичным образом готовят чистую пробу, без добавления стандартного раствора алюминия.

5.3.2. Измерить оптическую плотность чистой пробы (5.3.1) и использовать полученное значение в качестве нулевой концентрации алюминия для эталонной кривой. Измерить поглощение каждого калибровочного стандартного раствора алюминия. По калибровочной кривой определить концентрацию алюминия.

5.4. Определение

Измерить оптическую плотность образца (5.1.1). Из эталонной кривой считать концентрацию алюминия, соответствующую значению оптической плотности, полученной для раствора проб.

6. РАСЧЕТ

Содержание алюминия в пробе рассчитывается в % массы (m/m) по формуле:

где:

m – масса в граммах пробы, отобранной для анализа (5.1.1);

с – концентрация алюминия в растворе пробы в µg/ml (5.1.1), из калибровочной кривой.

7. ПОВТОРЯЕМОСТЬ⁽¹⁾

При содержании алюминия 3,5% (m / m), разность между двумя параллельными определениями одной и той же пробы не должна превышать 0,10% (m / m).

8. ПРИМЕЧАНИЕ

В качестве альтернативы пламенной атомно-абсорбционной спектрометрии используется атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой.

D. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ХЛОРА

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод пригоден для определения хлора, присутствующего в виде иона хлора в гидроксихлоридных алюминий-циркониевых комплексах в неаэрозольных антиперспирантах.

2. ПРИНЦИП

Ионы хлорида в продукте определяются потенциометрическим титрованием стандартным раствором нитрата серебра.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Концентрированная азотная кислота (d₂₀= 1,42 г / мл

3.2. Раствор азотной кислоты, 5% (v / v): 25 мл концентрированной азотной кислоты добавить к 250 мл воды в химическом стакане при перемешивании. Этот раствор перенести в мерную колбу на 500 мл и довести до метки водой.

3.3. Ацетон

3.4. Нитрат серебра 0,1 М стандартный раствор (AnalaR или эквивалент)

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное лабораторное оборудование.

4.2. Нагреватель с магнитной мешалкой.

4.3. Серебряный электрод.

4.4. Каломель электрод.

4.5. рН-метр/ милливольтметр, адекватный для потенциометрического титрования.

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. Приготовление пробы

5.1.1. В стеклянный стакан на 250 мл внести около 1,0 г гомогенизированной пробы продукта с точностью до 0,001 г. Добавить 80 мл воды и 20 мл 5% (v / v) раствора азотной кислоты (3.2).

5.1.2. Стакан поместить на нагреватель с магнитной мешалкой (4.2). Начать перемешивание и нагревание до кипения. Для того чтобы предотвратить быстрое высыхание, стакан накрыть часовым стеклом. Кипятить в течение 5 минут, стакан снять и охладить до комнатной температуры.

5.1.3. Добавить 10 мл ацетона (3.3), опустить электроды (4.3 и 4.4) в раствор и начать перемешивание, титровать потенциометрически 0,1 М раствором нитрата серебра (3.4) , построить дифференциальную кривую, чтобы определить конечную точку титрования (V в мл).

6. РАСЧЕТ

Содержание хлора в пробе, в % (m / m) рассчитывается по формуле:

где:

m – масса в граммах пробы, отобранной для анализа (5.1.1);

V – объем 0,1 М раствора нитрата серебра, титрованного в конечной точке в мл.

7. ПОВТОРЯЕМОСТЬ⁽¹⁾

При содержании хлора 4% (m / m) разность между двумя параллельными определениями одной и той же пробы не должна превышать 0,10% (m / m).

Е. РАСЧЕТ СООТНОШЕНИЙ АТОМОВ АЛЮМИНИЯ К АТОМАМ

ЦИРКОНИЯ И АТОМОВ АЛЮМИНИЯ И ЦИРКОНИЯ К АТОМАМ ХЛОРА

1. Расчет коэффициента атомов алюминия к атомам циркония

Al: Zr по формуле:

2. Расчет соотношения атомов алюминия и циркония к атомам хлора

Коэффициент (Al + Zr): Cl рассчитывается следующим образом:

VI. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕКСАМИДИНА,

ДИБРОМГЕКСАМИДИНА, ДИБРОМПРОПАМИДИНА И ХЛОРГЕКСИДИНА

1. OБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Метод описывает качественное и количественное определение:

- гексамидина и его солей, в частности, изетионата и 4-гидрокси бензоата;

- дибромгексамидина и его солей, в частности, изетионата;

- дибромпропамидина и его солей, в частности, изетионата;

- диацетата, дигидрохлорида и диглюконата хлоргексидина в косметических продуктах.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Концентрации гексамидина, дибромгексамидина, дибромпропамидина и хлоргексидина определяется с помощью этого метода и выражается в % массы (m / m).

3. ПРИНЦИП

Идентификация и определение осуществляются с помощью обратной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с УФ-детектированием. Гексамидин, дибромгексамидин, дибромпропамидин и хлоргексидин идентифицируются по их времени удерживания на хроматографической колонке.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты (АР) и "ВЭЖХ", где это возможно.

4.1. Метанол.

4.2. Натриевая соль 1-гептансульфониловой кислоты, моногидрат.

4.3. Ледяная уксусная кислота, (г ₂₀ = 1,05 г / мл).

4.4. Хлористый натрий.

Подвижные фазы:

4.5.1. Растворитель I: 0,005 М раствор натриевой соли 1-гептансульфониловой кислоты, моногидрата (4.2) в метаноле (4.1) довести до рН 3,5 ледяной уксусной кислотой (4.3).

4.5.2. Растворитель II: 0005 М раствор натриевой соли 1-гептансульфониловой кислоты, моногидрата (4,2) в воде, рН которого довести до 3,5 ледяной уксусной кислотой (4.3).

Примечание. Если необходимо улучшить форму пиков, подвижные фазы могут быть изменены следующим образом:

- растворитель I: растворить 5,84 г хлорида натрия (4.4) и 1,1013 г раствора натриевой соли 1-гептансульфониловой кислоты, моногидрата (4.2) в 100 мл воды. Добавить 900 мл метанола (4.1) и довести до рН 3,5 ледяной уксусной кислотой (4.3);

- растворитель II: растворить 5,84 г хлорида натрия (4.4) и 1,1013 г раствора натриевой соли 1-гептансульфониловой кислоты, моногидрата (4.2) в 1 л воды и довести до рН 3,5 ледяной уксусной кислотой (4.3).

4.6. Гексамидина диизетионат [C₂₀H₂₆N₄O₂ ;2C₂Н₆О₄S]

4.7. Дибромгексамидина диизетионат [C₂₀H₂₄Br₂Н₄О₂ ;.2C₂Н₆О₄S]

4.8. Дибромпропамидина диизетионат [C₁₇H₁₈Br₂Н₄О₂ ;.2C₂Н₆О₄S]

4.9. Хлоргексидина диацетат [C₂₂H₃₀Cl₂N₁₀ ;.2C₂Н₄О2]

4:10. Стандартные растворы: приготовить 0,05% (m / v) растворы каждого из четырех консервантов (4.6 – 4.9) в растворителе I (4.5.1).

4:11.3,4,4′ -трихлоркарбанилид (триклокарбан).

4:12.4,4 -дихлор-3- (трифторметил) карбанилид (халокарбан).

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Стандартное лабораторное оборудование.

5.2. Высокоэффективный жидкостный хроматограф с УФ-детектором с переменной длиной волны

5.3. Аналитическая колонка: из нержавеющей стали, длина 30 см, внутренний диаметр 4 мм, наполненный х-Bondapack С_18, 10µm или эквивалент.

5.4. Ультразвуковая баня

6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

6.1. Подготовка проб

Взвесить около 0,5 г пробы в мерной колбе на 10 мл и довести до метки растворителем (4.5.1). Колбу поместить в ультразвуковую баню (5.4) на 10 минут. Раствор профильтровать или центрифугировать. Фильтрат или центрифугат использовать для хроматографии.

6.2. Хроматография

6.2.1. Градиент подвижной фазы

6.2.2. Урегулировать расход подвижной фазы (6.2.1) до 1,5 мл / мин и температуру колонки до 35°С.

6.2.3. Зафиксировать длину волны детектора на 264 nm.

6.2.4. Впрыснуть по 10 µl каждого стандартного раствора (4.10) и записать их хроматограммы.

6.2.5. Впрыснуть 10 µl раствора пробы (6.1) и записать его хроматограмму.

6.3. Определить присутствие гексамидина, дибромгексамидина, дибромпропамидина или хлоргексидина, сравнивая время удержания пиков, зарегистрированных в пункте 6.2.5 настоящей главы, с результатами, полученными от эталонных растворов, указанных в пункте 6.2.4. настоящей главы.

7. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

7.1. Определение

Подготовка стандартных растворов.

Использовать один из консервантов (4.6 – 4.9), который отсутствует в пробе в качестве внутреннего стандарта. При отсутствии такого целесообразно использовать трихлоркарбан (4.11) или халокарбан (4.12).

7.1.1. Исходный раствор консерванта в растворителе I (4.5.1) 0,05% (m / v), определеный пунктом 6.3 настоящей главы.

7.1.2. Исходный раствор консерванта, 0,05% (m / v), выбран в качестве внутреннего стандарта в растворителе I (4.5.1).

7.1.3. Для каждого идентифицированного консерванта, приготовить четыре стандартных раствора путем переноса в набор мерных колб на 10 мл количеств исходного раствора идентифицированного консерванта (7.1.1) и соответствующих количеств исходного раствора внутреннего стандарта (7.1.2 ) в соответствии с приведенной ниже таблицей. Каждую колбу довести до метки растворителем (4.5.1) и перемешать.

7.2. Подготовка проб

7.2.1. Взвесить приблизительно 0,5 г (грамм) пробы в мерной колбе на 10 мл, добавить 1,0 мл раствора внутреннего стандарта (7.1.2) и 6 мл растворителя I (4.5.1) и перемешать.

7.2.2. Колбу поместить в ультразвуковую баню (5.4) на 10 минут и охладить. Довести до метки растворителем I и перемешать. Центрифугировать или профильтровать через складчатый бумажный фильтр. Собрать центрифугат или фильтрат для хроматографии.

7.3. Хроматография

7.3.1. Градиент подвижной фазы, скорость потока, температура колонки и длина волны детектора для ВЭЖХ (5.2) регулируются в соответствии с требованиями в стадии идентификации (6.2.1-6.2.3).

7.3.2. Впрыснуть 10 µl раствора пробы (7.2.2) и измерить пиковые области. Повторить процесс с впрыскиванием 10 µl раствора пробы до получения устойчивых результатов. Рассчитать отношение площади пика, полученного в анализируемой пробе, к площади пика внутреннего стандарта.

7.4. Эталонирование

7.4.1. Впрыснуть по 10 µl из всех стандартных растворов (7.1.3) и измерить величину пиков.

7.4.2. Для каждого стандартного раствора (7.1.3) рассчитать соотношение площадей пиков гексамидина, дибромгексамидина, дибромпропамидина или хлоргексидина и площади пика внутреннего стандарта, построить эталонную кривую, применяя эти коэффициенты на оси ординат и соответствующие концентрации идентифицированного консерванта в стандартных растворах на оси абсцисс , в µg/ml

7.4.3. По эталонной кривой (7.4.2) определить концентрации идентифицированного консерванта, соответствующие отношению площади пиков, рассчитанных в пункте 7.3.2.

8. РАСЧЕТ

8.1.1. Содержание гексамидина, дибромгексамидина, дибромпропамидина или хлоргексидина в образце в % массы (m / m) рассчитать по следующей формуле:

где:

р – масса в граммах пробы для анализа (7.2.1) ;

с – концентрация консерванта в растворе пробы, полученная из эталонной кривой, в / мл;

МW1- молекулярная масса основной формы консерванта;

МW₂ - молекулярная масса соответствующей соли (см. пункт 10).

9. ПОВТОРЯЕМОСТЬ⁽¹⁾

При концентрации 0,1% (м/м) гексамидина, дибромгексамидина, дибромпропамидина или хлоргексидина, разность между двумя параллельными определениями одной и той же пробы не должна превышать 0,005%.

10. Таблица консервантов с соответствующими формулами и молекулярными массами:

⁽¹⁾ ISO 5725.

⁽²⁾ "Магний в качестве модификатора для определения бария по пламени атомной эмиссионной спектрометрии". Jerrow, М. и др., Аналитические Материалы, 1991 28, 40.

⁽³⁾ Эти значения приведены для информации и соответствуют концентрации стандартных растворов, приготовленных с использованием растворов бензилового спирта (4.5) и 4-этоксифенола (4.6), которые содержат, соответственно, только 0,1% (m/v) бензилового спирта и 0,1% (m/v) 4-этоксифенола.

⁽⁴⁾ Эти значения даны как указание и соответствуют концентрации идентифицированного консерванта в стандартных растворах, полученных с использованием исходного раствора, содержащего точно 0,05% консерванта.

Приложение № 15

к Санитарному Регламенту

о косметических продуктах

МЕТОДЫ АНАЛИЗА,

необходимые для проверки состава косметической продукции (VI)

Методы анализа, необходимые для проверки состава косметической продукции (далее – Методы), приведены полностью в соответствии с положениями Шестой Директивы от 7 июля 1995 года о сближении законов государств-членов, относящихся к методам анализа, необходимых для проверки состава косметической продукции (95/32 / ЕЕС), опубликованной в Официальном журнале Европейских Сообществ (JOCE) L 178/20 от 28 июля 1995 г.

I. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕНЗОЙНОЙ КИСЛОТЫ,

4-ГИДРОКСИБЕНЗОЙНОЙ, СОРБИНОВОЙ, САЛИЦИЛОВОЙ,

ПРОПИОНОВОЙ КИСЛОТ В КОСМЕТИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ

1. СФЕРА И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Настоящий метод применяется для идентификации и определения бензойной, 4-гидроксибензойной, сорбиновой, салициловой и пропионовой кислот в косметических продуктах. Отдельные процедуры описывают идентификацию этих консервантов и определение пропионовой кислоты, 4-гидроксибензойной кислоты, салициловой кислоты, сорбиновой кислоты и бензойной кислоты.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание бензойной кислоты, 4-гидробензойной, сорбиновой, салициловой, пропионовой кислот во всех косметических продуктах, присутствующих в образцах, определяют в процентах массы свободных кислот.

А. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРИНЦИП

После кислотно-щелочной экстракции консервантов, экстракт анализируют методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) с использованием дериватизации. В зависимости от результатов, идентификация подтверждается методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) или в случае пропионовой кислоты (ГХ) – газовой хроматографии.

2. РЕАГЕНТЫ

2.1. Общие требования

Все реагенты должны быть аналитической чистоты, вода – дистиллированная или эквивалентной чистоты.

2.2. Ацетон.

2.3. Диэтиловый эфир.

2.4. Ацетонитрил.

2.5. Толуол.

2.6. n-Гексан.

2.7. Парафин жидкий.

2.8. Соляная кислота, 4 м.

2.9. Гидроксид калия, 4 м.

2.10. Кальций хлористый, CaCl ₂ · 2H ₂O.

2.11. Лития карбонат, Li ₂ CO_3.

2.12. 2-Бром-2′-ацетонафтон.

2.13. 4-Гидроксибензойная кислота.

2.14. Салициловая кислота.

2.15. Бензойная кислота.

2.16. Сорбиновая кислота.

2.17. Пропионовая кислота.

2.18. Стандарты (Эталоны).

Приготовить 0,1 % раствор (m/v) (100mg/100ml) для каждого из пяти консервантов (2.13-2.17) в диэтиловом эфире.

2.19. Реагент для дериватизации

Приготовить 0,5% (m/v) раствор 2-бром-2′-ацетонафтон (2.12) в ацетонитриле (2.4) (50 mg/10ml). Срок годности реагента одна неделя, хранить в холодильнике.

2.20. Раствор катализатора

Приготовить 0,3% ( m/v) раствор карбоната лития (2.11) в воде

(300 mg / 100 ml). Раствор готовится непосредственно перед употреблением.

2.21. Подвижная фаза

Толуол (2.5) / ацетон (2.2) 20: 0,5 (v / v).

2.22. Жидкий парафин (2.7) / n-гексан (2.6) (1: 2, v / v).

3. ОБОРУДОВАНИЕ

Стандартное лабораторное оборудование.

3.1. Водяная баня, способная поддерживать температуру 60°С.

3.2 Хроматографическая камера.

3.3. Источник УФ-излучения, 254 и 366 nm.

3.4. Тонкослойные пластины, Kieselgel 60, без индикатора флуоресценции, 20 × 20 см, толщина 0,25 мм, область концентрации 2,5 × 20 см (Merck 11 845 или эквивалент).

3.5. Микрошприц – 10 µl.

3.6. Микрошприц – 25 µl.

3.7. Печка (термостат), способная поддерживать 105°С.

3.8. Пробирки на 50 мл с винтовыми крышками.

3.9. Фильтровальная бумага – диаметр 90 мм, Шлейхер и Schull, Weissband № 5892 или эквивалент.

3.10. Универсальная индикаторная бумага, рН 1-11.

3.11. Флаконы для проб на 5 мл.

3.12. Ротационный испаритель (Rotavapor или эквивалент).

3.13. Плитка для подогрева.

4. ПРОЦЕДУРА

4.1. В стеклянной пробирке на 50 мл взвесить около 1 г (3.8) пробы. Добавить 4 капли 4 M соляной кислоты (2.8) и 40 мл ацетона (2.2). Для сильно щелочных продуктов, таких как мыло туалетное, необходимо добавить 20 капель 4 М хлористоводородной кислоты (2.8). Проверить значение рН, которое должно быть примерно 2 по индикаторной бумаге (3.10). Пробирку закрыть пробкой и энергично встряхивать в течение 1 мин.

При необходимости, для облегчения извлечения консервантов в фазе ацетона, смесь нагреть осторожно до 60° С, чтобы расплавить жидкую фазу.

Раствор охладить до комнатной температуры и профильтровать через фильтровальную бумагу (3.9) в коническую колбу.

Перенести 20 мл фильтрата в коническую колбу на 200 мл, добавить 20 мл воды и перемешать. рН смеси довести до 10 с помощью 4 М гидроксида калия (2.9). Для измерения рН используется индикаторная бумага (3.10).

Добавить 1 г хлорида кальция (2.10) и энергично встряхнуть. Смесь профильтровать через фильтровальную бумагу (3.9) в делительную воронку на 250 мл, содержащую 75 мл диэтилового эфира (2.3), и энергично встряхивать в течение 1 мин. Оставить, чтобы разделились слои, отделенный водяной слой вылить в коническую колбу на 250 мл. Эфирный слой удалить. Используя индикаторную бумагу (3.10), рН водяного слоя довести до около 2 хлористоводородной кислотой 4М (2.8). Добавить 10 мл диэтилового эфира (2.3), колбу закрыть и раствор интенсивно перемешивать в течение 1 мин. После разделения слоев эфирный слой перенести в ротационный испаритель (3.12). Водяной слой отбросить.

Эфирный слой выпарить почти досуха и остаток растворить в 1 мл диэтилового эфира (2.3). Раствор перенести в флакон для пробы (3.11).

4.2. Тонкослойная хроматография (ТСХ)

В каждой из стандартных растворов и растворов проб необходимо нанести микрошприцом (3.5) по 3μl карбоната лития (2.2) на приблизительно одинаковые расстояния на линии старта, в зоне максимальной концентрации пластины ТСХ (3.4), и высушить потоком холодного воздуха.

Тонкослойную хроматографическую пластину перенести на плиту (3.13), нагретую до 40 °C, чтобы сохранить пятна как можно меньшего размера. C помощью микрошприца (3.5) нанести по 10 μl стандартных растворов (2.18) и раствор пробы (4.1) на одинаковых расстояниях, точно на линии старта, на точки, куда предварительно был нанесен раствор карбоната лития. В конце на те же точки, куда были нанесены стандарты, нанести по 15 μl раствора 2-бромо-2-ацетонафтон. Пластину нагревать в печи 45 минут при температуре 80°С.

Пластину поместить в хроматографическую камеру с подвижной фазой толуол/ацетон где-то на 80 минут, пока подвижная фаза не поднимется на 15 см от линии старта. Сушить пластину в потоке холодного воздуха. Пятна могут быть визуализированы и отмечены в УФ-свете (3.3). Для улучшения проявления в УФ-свете мелких пятен пластину погружают в раствор жидкого парафина/n-гексан (2.22).

5. ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Рассчитать Rf для каждого пятна. Сравнить Rf эталонов и как ведут себя эталоны в УФ-свете с Rf исследуемой пробы и как ведет себя проба в УФ-свете. Сделать предварительный вывод о существовании консервантов. Провести процедуру определения методами высокоэффективной жидкостной (В.) и газовой хроматографии (С.). Сравнить пробу с эталонами и по времени удержания.

Объединить выводы по всем методам МТХ, МЖХ, МГХ и дать окончательный результат на содержание консервантов.

B. ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЗОЙНОЙ КИСЛОТЫ, 4-ГИДРОБЕНЗОЙНОЙ

КИСЛОТЫ, СОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ, САЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ

1. ПРИНЦИП

После подкисления, проба экстрагируется смесью спирта и воды. Далее используется метод жидкостной хроматографии.

2. РЕАКТИВЫ

2.1. Все реактивы должны быть аналитической чистоты или адекватные для жидкостной хроматографии. Используется бидистиллированная вода или эквивалент.

2.2. Этанол.

2.3. 4-гидробензойная кислота.

2.4. Салициловая кислота.

2.5. Бензойная кислота.

2.6. Сорбиновая кислота.

2.7. Aцетат натрия (CH₃COONa.3H₂O).

2.8. Уксусная кислота, (α)₄²⁰= 1,05 g/ml.

2.9. Aцетонитрил.

2.10. Серная кислота, 2 М.

2.11 Раствор гидроксида калия, 0,2 М.

2.12 2-Метоксибензойная кислота.

2.13 Смесь этанол/вода 9:1(v/v).

2.14. Внутренний стандарт

Приготовить раствор: 1г 2-метоксибензойной кислоты (2.12) в 500 мл смеси этанол/вода (2.13).

2.15.1. Мобильная фаза для высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Ацетатный буфер: на 1л воды добавить 6,35 г ацетата натрия (2.7) и 20 мл уксусной кислоты (2.8) и хорошо перемешать.

2.15.2. Приготовить подвижную (мобильную) фазу: 9 объемов буфера ацетата (2.15.1) и один объем ацетонитрила (2.9).

2.16. Исходный раствор консерванта

В мерной колбе на 50 мл взвесить 0,05 г 4-гидробензойной кислоты (2.3), 0,2 г салициловой кислоты (2.4) , 0,2г бензойной кислоты (2.5), 0,05 г сорбиновой кислоты (2.6) и довести до метки смесью этанол/вода 9:1(v/v). Хранить раствор в холодильнике. Раствор годен в течение одной недели.

2.17. Стандартные растворы консервантов

В набор мерных колб на 20 мл добавить соответственно по 0,05, 1,0, 2,0, 4,0, 8,0 мл стандартной пробы. В каждую колбу добавить по 10,0 мл внутреннего стандарта и 0,5 мл серной кислоты 2М и довести до метки смесью этанол/вода (2.13). Раствор использовать свежеприготовленным.

3. Оборудование

Обычное лабораторное оборудование.

3.1 Водяная баня с терморегулятором на 60°С.

3.2. Жидкостный хроматограф с УФ детектором, с разной длиной волны и циклом впрыскивания пробы 10 μl.

3.3. Аналитическая колонка

Колонка из нержавеющей стали, длина 12,5 – 25 см, внутренний диаметр 4,6 мм, наполнитель Нуклеосил 5C18 или эквивалент, соответствующий для определения данных консервантов.

3.4. Фильтровальная бумага диаметром 90 мм Schleicher и Schull, Weissband 5892 или эквивалент.

3.5. Пробирки стеклянные на 50 мл с винтовой крышкой.

3.6. Флаконы стеклянные для проб на 5 мл.

3.7. Гранулы для гомогенизации кипения, карборундум, размеры 2-4 мм или эквивалент.

4. ПРОЦЕДУРА

4.1.1. Подготовка пробы без добавки внутреннего стандарта.

В стеклянной пробирке с винтовой крышкой на 50 мл (3.5) взвесить 1,0 г пробы с точностью 1 ± 0,1 г. Пипеткой ввести 1,0 мл серной кислоты 2М (2.10) и 40 мл смеси этанол/вода (2.13). Добавить 1,0 г гранул для гомогенизации кипения (3.7), закрыть пробирку и энергично взбалтывать в течение 1 минуты до образования гомогенной суспензии. Для улучшения экстракции консервантов в фазе этанола пробирку поставить на водяную баню (3.1) при 60° С ровно на 5 минут. Далее быстро охладить под током воды и отстаивать один час при температуре 5°С. Профильтровать через фильтровальную бумагу. 2 мл экстракта перенести во флакон (3.6) для проб и хранить при температуре 5°С для дальнейшего хроматографирования ВЭЖХ в интервале 24 часов.

4.1.2. Подготовка пробы с добавлением внутреннего стандарта

В стеклянной пробирке на 50 мл (3.5) взвесить 1 г образца с точностью 1 ± 0,1 г ("a" грамм) пробы. В пробирку ввести пипеткой 1,00 мл 2 М серной кислоты (2.10) и 30 мл смеси этанол/вода (2.13). Добавить примерно 1 г гранул (3.7) и 10,00 мл раствора внутреннего стандарта (2.14). Пробирку закрыть и тщательно перемешивать в течение не менее одной минуты до получения однородной суспензии. Для облегчения экстракции консервантов в фазе этанол пробирку поместить на водяную баню (3.1) при температуре 60° С в течение ровно 5 минут.

Пробирку немедленно охладить холодной водой и оставить экстракт отстаиваться в течение 1 часа при температуре 5 ° C, затем профильтровать через фильтровальную бумагу (3.4). Перенести 2 мл экстракта во флакон для проб (3.6). Экстракт хранить при температуре 5 ° С и провести определение с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии в течение 24 часов после приготовления.

Высокоэффективная жидкостная хроматография.

Подвижная фаза – ацетонитрил/ацетатный буфер (2.15).

Урегулировать скорость подвижной фазы через колонку до 2,0 ± 0,5 мл/мин. Установить длину волны детектора на 240 nм.

4.2.1. Эталонирование

В жидкостный хроматограф (3.2) впрыснуть по 10 µl каждого из стандартных растворов консервантов (2.17). Для каждого раствора определить соотношение высот пиков исследуемых консервантов и высот пика внутреннего стандарта, полученного на основе хроматограмм. Построить калибровочный график для каждого консерванта, применяя отношение между высотами пиков к концентрации каждого стандартного раствора.

Калибровочные кривые для каждого стандартного раствора должны быть линейными.

4.2.2. Определение

В жидкостной хроматограф (3.1) ввести 10 µl экстракта пробы (4.1.1) и записать хроматограмму. Впрыснуть 10 µl стандартного раствора консерванта (2.17) и записать хроматограмму. Сравнить полученные хроматограммы. Если на хроматограмме экстракта пробы (4.1.1) нет никакого пика примерно с тем же временем удерживания, как у 2-метоксибензойной кислоты (рекомендуемый внутренний стандарт), то в жидкостный хроматограф необходимо ввести 10 µl экстракта пробы с добавлением внутреннего стандарта (4.1.2) и записать хроматограммы.

Если на хроматограмме экстракта пробы (4.1.1) наблюдается пик, который имеет время удерживания как у 2-метоксибензойной кислоты, тогда необходимо выбрать другой подходящий внутренний стандарт. (Если один из рассматриваемых консервантов отсутствует в хроматограмме, этот консервант может быть использован в качестве внутреннего стандарта).

Хроматограммы, полученные для стандартных растворов и растворов пробы, должны соответствовать следующим требованиям:

- при самом плохом разделении пары пиков р должен соответствовать 0,90 (для определения пика разделения, см. рис.1).

Если не получается желаемое разделение, необходимо использовать более эффективную хроматографическую колонку или менять состав мобильной фазы до желаемого результата.

Коэффициент асимметрии A_s для каждого пика должен быть в интервале 0,9 – 1,5. (Для определения фактора асимметрии см. рис.2). Для определения коэффициента асимметрии хроматограммы график должен регистрироваться со скоростью, по меньшей мере, 2 cм/минуту.

- Базовая линия должна быть равномерной и стабильной.

5. РАСЧЕТ

Для расчета концентрации консервантов в растворе пробы используются соотношения высот пиков исследуемых консервантов, высот пиков внутреннего стандарта (2-метокси-бензойной кислоты) и калибровочная кривая. Содержание бензойной кислоты, 4-гидроксибензойной кислоты, сорбиновой кислоты или салициловой кислоты рассчитать как процентное содержание массы (х), используя формулу:

где:

а – масса анализируемой пробы (4.1.2) в г;

b – концентрация консерванта в экстракте образца (4.1.2), полученная из калибровочной кривой, в µg / ml.

6. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

При содержании 4-гидроксибензойной кислоты 0,40%, разница между результатами двух определений, выполненных с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютного значения 0,035 %.

При содержании бензойной кислоты 0,50 %, разница между результатами двух измерений, выполненных с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютного значения 0,050 %.

При содержании салициловой кислоты 0,50 %, разница между результатами двух измерений, выполненных с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютного значения 0,045 %.

При содержании сорбиновой кислоты 0,60 %, разница между результатами двух измерений, выполненных с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютного значения 0,035 %.

7. ПРИМЕЧАНИЕ

7.1. Результаты одного теста надежности, полученные согласно данному методу, показали, что количество серной кислоты, добавленное для извлечения кислот из образца, критическое, и это ограничение должно строго соблюдаться и для анализируемой пробы.

7.2. При желании можно использовать адекватную хроматографическую колонку, которая соответствует тем же требованиям.

С. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРОПИОНОВОЙ КИСЛОТЫ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод применяется для определения пропионовой кислоты в косметических продуктах с максимальной концентрацией 2 % (m / m).

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Концентрация пропионовой кислоты, определяемая этим методом, выражается в процентах массы ( % m / m) продукта.

3. ПРИНЦИП

После экстракции пропионовой кислоты определение продукта осуществляется методом газовой хроматографии с использованием 2-метилпропионовой кислоты в качестве внутреннего стандарта.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

Необходимо использовать бидистиллированную воду или воду эквивалентной чистоты.

4.1. Этанол – 96% (v / v).

4.2. Пропионовая кислота.

4.3. 2-метилпропионовая кислота.

4.4. Ортофосфорная кислота – 10% (m / v).

4.5. Стандартный раствор пропионовой кислоты.

В мерной колбе на 50 мл взвесить примерно 1,00 г ("е" грамм) с точностью до 0,001 г пропионовой кислоты и довести до метки этанолом (4.1).

4.6. Внутренний стандартный раствор

В мерной колбе на 50 мл взвесить примерно 1,00 г ("е" грамм) с точностью 0,001 г 2-метилпропионовой кислоты и довести до метки этанолом (4.1).

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Стандартное лабораторное оборудование и:

5.2. Газовый хроматограф с детектором ионизации пламени.

5.3. Стеклянные пробирки (2 × 15 см) с винтовой крышкой.

5.4. Водяная баня на 60 ° C.

5.5. Воронки стеклянные на 10 мл с пористым фильтром (диаметр пор 0,45 µm).

6. ПРОЦЕДУРА

Подготовка пробы

6.1.1. Подготовка пробы без внутреннего стандарта

В стеклянной пробирке (5.3), взвесить примерно 1 г пробы с точностью 0,001 г. Добавить 0,5 мл фосфорной кислоты (4.4) и 9,5 мл этанола (4.1).

Пробирку закрыть и энергично встряхнуть. При необходимости пробирку поместить на водяную баню, нагретую до 60 ° C (5.4) в течение 5 мин., до полного растворения липидной фазы. Быстро охладить под струей воды. Часть раствора профильтровать через мембранный фильтр (5.5). Фильтрат хроматографировать в тот же день.

6.1.2. Подготовка пробы с внутренним стандартом.

В стеклянной пробирке (5.3) взвесить 1 г ("а" граммов) пробы с точностью 0,001 г. Добавить 0,5 мл фосфорной кислоты (4.4), 0,50 мл раствора внутреннего стандарта (4.6) и 9,0 мл этанола (4.1).

Пробирку закрыть и энергично встряхнуть. При необходимости пробирку поместить на водяную баню, нагретую до 60° C (5.4) в течение 5 мин., чтобы растворить липидную фазу. Быстро охладить под струей воды. Часть раствора профильтровать через мембранный фильтр (5.5). Фильтрат хроматографировать в тот же день.

УСЛОВИЯ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Рекомендуем следующие условия работы:

6.3 Хроматография

6.3.1. Эталонирование

В набор мерных колб на 20 мл налить по 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 и 4,00 мл раствора пропионовой кислоты (4.5). В каждую колбу добавить пипеткой по 1,00 мл раствора внутреннего стандарта (4.6), довести до метки этанолом (4.1) и перемешать. Полученные таким образом растворы содержат "е"мг/мл 2-метилпропионовой кислоты в качестве внутреннего стандарта (т.е.1 мг/ мл, где l = 000) и р/4, р/2, р, 2р и 4р мг/мл пропионовой кислоты (т.е. 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 и 4,00 мг / мл, если р = 1 000).

Ввести по 1 µl каждого из этих растворов и построить эталонную кривую, на оси абсцисс откладываются отношения масс пропионовой кислоты/2-метилпропионовой кислоты, а на оси ординат – отношения площадей пиков.

Для каждого стандартного раствора необходимо сделать по три впрыскивания и рассчитать среднее значение площадей пиков.

6.3.2. Определение

Ввести в хроматограф 1 µl фильтрата пробы (6.1.1). Сравнить хроматограмму пробы с хроматограммами стандартных образцов (6.3.1). Если пик образца имеет такое же время удерживания, что и время удерживания 2-метилпропионовой кислоты, необходимо изменить внутренний стандарт. Если не наблюдается никакого вмешательства, впрыснуть 1 µl фильтрата пробы (6.1.2) и измерить площади пиков пропионовой кислоты и внутреннего стандарта.

Сделать по три впрыскивания из каждого стандартного раствора и рассчитать среднее значение площади пиков.

7. РАСЧЕТ

7.1. Из эталонной кривой, полученной в соответствии с пунктом 6.3.1 настоящего раздела, получить отношение масс (K) к площади пиков, рассчитанной в пункте 6.3.2 настоящего раздела.

7.2. Из полученного таким образом соотношения масс рассчитать количество пропионовой кислоты (Х) в процентах массы с использованием формулы:

где:

K – соотношение, рассчитанное в пункте 7.1 настоящего раздела;

е – масса внутреннего стандарта, взвешенная в соответствии с требованиями пункта 4.6 настоящего раздела, в г;

а – масса образца, взвешенная в соответствии с требованиями пункта 6.1.2 настоящего раздела, в г.

Результат округляется до второго десятичного знака.

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

При содержании пропионовой кислоты 2% (m/m) в пробе разница между результатами двух параллельных измерений одного и того же образца не должна превышать 0,12%.

II. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГИДРОХИНОНА, МОНОМЕТИЛОВОГО ЭФИРА ГИДРОХИНОНА, МОНОЭТИЛОВОГО ЭФИРА ГИДРОХИНОНА И МОНОБЕНЗИЛЭФИРА ГИДРОХИНОНА В КОСМЕТИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ

А. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Метод применяется для обнаружения и идентификации гидрохинона, монометилового эфира гидрохинона, моноэтилового эфира гидрохинона и монобензилового эфира гидрохинона (бензилоксифенола) в косметических продуктах для отбеливания кожи.

2. ПРИНЦИП

Гидрохинон и его эфиры идентифицированы методом тонкослойной хроматографии (ТСХ).

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Этанол – 96% (v/ v).

3.2. Хлороформ.

3.3. Диэтиловый эфир.

3.4. Подвижная фаза:

Хлороформ/диэтиловый эфир = 66:33 (v/v).

3.5. Аммиак, 25% (m / m) (d ₄ ²⁰ = 0,91 г/мл).

3.6. Аскорбиновая кислота.

3.7. Гидрохинон.

3.8. Монометиловый эфир гидрохинона.

3.9. Моноэтиловый эфир гидрохинона.

3.10. Монобензиловый эфир гидрохинона (бензилоксифенол)

СТАНДАРТНЫЕ РАСТВОРЫ

Стандартные растворы следует готовить непосредственно перед употреблением, так как они стабильны только в течение одного дня.

3.11.1. В градуированной пробирке на 10 мл взвесить 0,05 г гидрохинона (3.7). Добавить 0,250 г аскорбиновой кислоты (3.6) и 5 мл этанола (3.1). Добавлять аммиак (3.5) до тех пор, пока рН не будет равен 10, и довести до метки этанолом (3.1).

3.11.2. В градуированной пробирке на 10 мл взвесить 0,05 г монометилового эфира гидрохинона (3.8). Добавить 0,250 г аскорбиновой кислоты (3.6) и 5 мл этанола (3.1). Добавлять аммиак (3,5) до тех пор, пока рН не будет равен 10, и довести до метки этанолом (3.1).

3.11.3. В градуированной пробирке на 10 мл взвесить 0,05 г моноэтилового эфира гидрохинона (3.8). Добавить 0,250 г аскорбиновой кислоты (3.6) и 5 мл этанола (3.1). Добавлять аммиак (3,5) до тех пор, пока рН не будет равен 10, и довести до метки этанолом (3.1).

3.11.4. В градуировочной пробирке на 10 мл взвесить 0,05 г монобензилового эфира гидрохинона (3.10). Добавить 0,250 г аскорбиновой кислоты (3.6) и 5 мл этанола (3.1). Добавлять аммиак (3,5) до тех пор, пока рН не будет равен 10 и довести до метки этанолом (3.1).

3.12. Нитрат серебра.

3.13. 12- молибденофосфорная кислота.

3.14. Калий цианид железа гексагидрат.

3.15. Хлорид железа гексагидрат.

3.16.1 Проявительный раствор.

В 5% (m /v) водный раствор нитрата серебра (3.1.2) добавить аммиак (3.5) до растворения осадка.

Nota bene:

Со временем раствор становится неустойчивым к взрыву, поэтому после использования следует выбросить.

3.16.2. Приготовить 10% (m /v) раствор 12-молибденофосфорной кислоты (3.13) в этаноле (3.1).

3.16.3. Приготовить 1% (m / v), водный раствор кровяной соли (3.14) и 2% (m / v) водный раствор хлористого железа (3.15). Смешать эти растворы в соотношении равных объемов непосредственно перед употреблением.

4. ОБОРУДОВАНИЕ

Стандартное лабораторное оборудование:

4.1. Стандартное оборудование для тонкослойной хроматографии.

4.2. Подготовленные пластины для тонкослойной хроматографии, покрытые силикагелем GHR/УФ 254; 20 × 20 см (Machery, Nagel или эквивалент); толщина слоя 0,25 мм.

4.3. Ультразвуковая баня.

4.4. Центрифуга.

4.5. Лампа УФ, 254 nm.

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. Подготовка пробы

В градуированной пробирке на 10 мл взвесить 3,0 г образца. Добавить 0,250 г аскорбиновой кислоты (3.6) и 5 мл этанола (3.1). Добавлять аммиак (3.5) до тех пор, пока рН не будет равен 10, и довести до метки этанолом (3.1). Пробирку закрыть пробкой и гомогенизировать в ультразвуковой банне в течение 10 мин. Смесь профильтровать через фильтровальную бумагу или центрифугировать при 3000 оборотов в минуту.

Тонкослойная хроматография

5.2.1. Насытить хроматографическую камеру проявляющим растворителем (3.4).

5.2.2. Нанести на хроматографическую пластину на линии старта по 2 µl стандартных растворов (3.11) и 2 µl раствора пробы (5.1). Пластину поместить в хроматографическую камеру (5.2.1), насыщенную подвижной фазой. Разгонка проводится в темноте при комнатной температуре до тех пор, пока фронт растворителя не достигнет 15 см от линии старта.

5.2.3. Удалить пластину из хроматографической камеры и сушить при комнатной температуре.

Проявление

5.3.1. Рассмотреть пластину под УФ-светом при 254 nм, и отметить положение пятен.

5.3.2. Пульверизировать :

- раствором нитрата серебра (3.16.2); или

- реактивом 12-молибденофосфорной кислоты (3.16.2), который нагревается приблизительно до 120º; или

- раствором ферроцианистого калия и раствором хлористого железа (3.16.3)

6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Рассчитать Rf-значение для каждого пятна.

Сравнить пятна, полученные из раствора пробы с пятнами стандартных растворов, учитывая их Rf-значения, цвет пятен под УФ-излучением и цвет пятен после визуализации с проявительным раствором.

Использовать метод высокоэффективной жидкостной хроматографии, описанный в разделе (В), и сравнить время удерживания пиков пробы с временем удерживания пиков стандартных растворов.

Объединить результаты ТСХ и ВЭЖХ, чтобы подтвердить наличие гидрохинона и его эфиров.

7. ПРИМЕЧАНИЕ

В описанных условиях наблюдаются следующие Rf-значения:

В. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Данный метод применяется для определения гидрохинона, монометилового эфира гидрохинона, моноэтилового эфира гидрохинона и монобензилового эфира гидрохинона в косметических продуктах для отбеливания кожи.

2. ПРИНЦИП

Пробу экстрагировать смесью вода/метанол при слабом нагревании для расплавления липидного материала. Вещества в анализируемом растворе определить методом инверсионной жидкостной хроматографии с УФ-детекцией.

3. РЕАГЕНТЫ

3.1.Все реагенты должны быть аналитической чистоты, а вода – дистиллированная или эквивалентной чистоты.

3.2.Метанол.

3.3.Гидрохинон.

3.4. Монометиловый эфир гидрохинона.

3.5. Моноэтиловый эфир гидрохинона.

3.6. Монобензиловый эфир гидрохинона (бензилоксифенол).

3.7. Тетрагидрофуран, чистый для"ВЭЖХ"

3.8. Смесь вода/метанол 1 : 1 (v/v). Смешать один объем воды с одним объемом метанола (3.2).

3.9. Подвижная фаза: cмесь ТГФ тетрагидрофуран/вода 45:55(v/ v). Смешать 45 объемов тетрагидрофурана (3.7) и 55 объемов воды.

3.10. Приготовление стандартных растворов.

В мерной колбе на 50 мл взвесить 0,06 г гидрохинона (3.3), 0,08 г монометилового эфира гидрохинона (3.4), 0,10 г моноэтилового эфира гидрохинона (3.5) и 0,12 г монобензилового эфира гидрохинона (3.6). Растворить и довести до метки метанолом (3.2). Стандартный рабочий раствор приготовить разбавлением 10,00 мл этого раствора до 50,00 мл смесью вода/метанол (3.8). Эти растворы приготовить непосредственно перед употреблением.

4. ОБОРУДОВАНИЕ

Стандартное лабораторное оборудование и:

4.1. Водяная баня с терморегулятором на 60°С

4.2. Высокоэффективный жидкостной хроматограф с УФ-детектором с переменной длиной волны и циклом впрыскивания по 10 µl.

4.3. Аналитическая колонка:

Хроматографическая колонка из нержавеющей стали, длина 250 мм, внутренний диаметр 4,6 мм, заполненная Zorbax фенилом (химически связаны phenethylsilane на Zorbax Sil, на концах триметилхлорсиланом), размер частиц 6 µm, или эквивалент. Не использовать защитную колонку, за исключением защитной колонки с фенилом, или эквивалент.

4.4. Фильтровальная бумага, диаметр 90 мм, Scheicher и Schull, Weissband, № 5892 или эквивалент.

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. Подготовка пробы

В мерной колбе на 50 мл взвесить 1г пробы ("a"грамм) с точностью 0,001г. Пробу растворить в смеси 25 мл воды/метанола (3.8). Пробирку закрыть пробкой и энергично встряхивать до получения однородной суспензии. Встряхивать, по крайней мере, 1 мин. Для улучшения экстракции колбу поместить на водяную баню (4.1) при 60°С, а затем охладить и довести до метки смесью вода/метанол (3.8). Экстракт профильтровать через фильтровальную бумагу (4.4). Хроматографирование ВЭЖХ необходимо проводить в течение 24 часов после приготовления экстракта.

Высокоэффективная жидкостная хроматография

5.2.1. Скорость подвижной фазы (3.9) регулируется до 1,0 мл / мин., а длина волны детектора – до 295 nm.

5.2.2. Ввести 10 µl раствора пробы, полученной, как описано в пункте 5.1, и записать хроматограмму. Измерить площадь пика. Калибровку выполнить, как описано в пункте 5.2.3. Сравнить хроматограммы, полученные для пробы и стандартных растворов. Чтобы вычислить концентрацию анализируемых веществ в растворе образца, использовать площади пиков и коэффициенты (Rf), полученные в соответствии с 5.2.3.

5.2.3. Эталонная кривая

Впрыснуть 10 µl стандартного раствора (3.10) и записать хроматограмму. Впрыски продолжать до получения постоянной площади пика.

Определить значение коэффициента отклика Rfi:

где

рi – площадь пика для гидрохинона, монометилового эфира гидрохинона, моноэтилового эфира гидрохинона или монобензилового эфира гидрохинона;

Сi – концентрация стандартного раствора (3.10) гидрохинона, монометилового эфира гидрохинона, моноэтилового эфира гидрохинона или монобензилового эфира гидрохинона в г / 50 мл.

Хроматограммы, полученные для стандартных растворов и раствора образца, должны соответствовать следующим требованиям:

- самое плохое разделение пары пиков, р должно быть, по меньшей мере, 0,90. (Для определения пиков разделения см.рис 1.)

Рис.1 Хроматограмма разделения стандартного раствора и пробы.  

Если не получается хорошее разделение пиков, необходимо использовать более эффективную колонку или подобрать мобильную фазу до получения нужного результата.

Коэффициент асимметрии (As) всех полученных пиков должен быть в диапазоне от 0,9 до 1,5.

(Для определения коэффициента асимметрии см. рис.2). Для определения коэффициента асимметрии скорость хроматограммы должна быть, по меньшей мере, 2 см/мин.

Рис.2.  Хроматограмма определения коэффициента асимметрии.  

- Базовая линия должна быть стабильной.

6. РАСЧЕТ

Для расчета концентраций анализируемых веществ в пробе используются соответствующие площади пиков анализируемых веществ. Концентрация анализируемых веществ в образце рассчитывается в процентах по массе (х%) m/m:

где:

а – масса пробы в г;

b – площадь пика анализируемого вещества в пробе "i".

7. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

7.1. При содержании в пробе гидрохинона 2,0%, разница между результатами двух измерений, выполненных в той же пробе, не должна превышать абсолютного значения 0,13 %.

7.2. При содержании монометилового эфира гидрохинона 1,0 %, разница между результатами двух измерений, выполненных в той же пробе, не должна превышать абсолютного значения 0,1 %.

7.3. При содержании моноэтилового эфира гидрохинона 1,0% разница между результатами двух определений, выполненных в той же пробе, не должна превышать абсолютного значения 0,11 %.

7.4. При содержании монобензилового эфира гидрохинона 1,0 % разница между результатами двух определений, выполненных в той же пробе, не должна превышать абсолютного значения 0,11 %.

8. ВОСПРОИЗВОДИМОСТЬ ⁽¹⁾

8.1. При содержании гидрохинона 2,0 % разница между результатами двух измерений, выполненных в той же пробе при различных условиях (разные лаборатории, разные операторы, различные устройства или в разное время), не должна превышать абсолютного значения 0,37% .

8.2. При содержании монометилового эфира гидрохинона 1,0 % разница между результатами двух измерений, выполненных в той же пробе при различных условиях (разные лаборатории, разные операторы, различные устройства или в разное время), не должна превышать абсолютного значения 0,21 %.

8.3. При содержании моноэтилового эфира гидрохинона 1,0 % разница между результатами двух измерений, выполненных в той же пробе при различных условиях (разные лаборатории, различные операторы, разные устройства или в разное время), не должна превышать абсолютного значения 0,19 %.

8.4. При содержании монобензилового эфира гидрохинона 1,0 % разница между результатами двух измерений, выполненных в той же пробе при различных условиях (разные лаборатории, разные операторы, различные устройства или в разное время), не должна превышать абсолютного значения 0,11 %.

9. ПРИМЕЧАНИЕ

9.1. Если содержание гидрохинона значительно больше, чем 2%, и требует точной оценки содержания, экстракты образцов (5.1) должны быть разбавлены до концентрации, которая может быть получена из пробы, содержащей 2% гидрохинона, затем повторить определение.

(Для некоторых приборов поглощение может превысить пределы детектирования при высоких концентрациях гидрохинона.)

9.2. Мешающие вещества

Описанный метод позволяет определить гидрохинон и его эфиры в одном изократическом цикле. Использование колонки "фенил" обеспечивает достаточное удержание гидрохинона, что не может быть гарантировано при использовании колонки С18 с описанной подвижной фазой.

Тем не менее этот метод является чувствительным к помехам из-за ряда парабензеновых радикалов. В таких случаях определение повторяют, используя различные мобильные/стационарные фазы. Адекватные способы могут быть найдены в ссылках 1 и 2, а именно:

колонка: Zorbax ODS, 4,6 мм × 25 мм, или эквивалент:

колонка: Spherisorb S5 – ODS, или эквивалент:

Эти условия пригодны для гидрохинона (3).

(¹) ISO 5725.

(²) М. Herpol-Borremans и M.-O. Маssе, Идентификация и дозировка гидрохинона, метиловых и бензиловых эфиров в косметических продуктах для отбеливания кожи. Int. J. Cosmet. Sci., 8-203-214 (1986).

(³) J.Firth and I Rix, Определение гидрохинона в тонизирующих кремах для кожи. Analyst (1986), 111, стр. 129.

Приложение № 16

к Санитарному Регламенту

о косметических продуктах

МЕТОДЫ АНАЛИЗА,

необходимые для проверки состава косметической продукции (VII)

Методы анализа, необходимые для проверки состава косметической продукции (далее – методы), приведены полностью в соответствии с положениями Седьмой Директивы от 2 июля 1996 года о сближении законов государств-членов, относящихся к методам анализа, необходимых для проверки состава косметической продукции (96/45/ЕЕС), опубликованной в Официальном журнале Европейских Сообществ (JOCE) L 213/8 от 22 августа 1996 г.

I. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ 2-ФЕНОКСИЭТАНОЛА,

1-ФЕНОКСИПРОПАНДИОЛА, МЕТИЛ, ЭТИЛ, ПРОПИЛ, БУТИЛ И

БЕНЗИЛ-4-ГИДРОКСИБЕНЗОАТА В КОСМЕТИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ

А. ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает процедуру тонкослойной хроматографии, которая в сочетании с методом, представленным в разделе В, позволяет идентифицировать 2-феноксиэтанол, 1-феноксипропанол, метил-4-гидроксибензоат, этил-4-гидроксибензоат, пропил-4-гидроксибензоат, бутил 4-гидроксибензоат и бензиловый 4-гидроксибензоат в косметических продуктах.

2. ПРИНЦИП.

Консерванты из подкисленных косметических проб экстрагируются ацетоном. После фильтрации раствор ацетона смешать с водой в щелочной среде, жирные кислоты осаждаются в виде их кальциевых солей. Щелочную смесь ацетон/вода экстрагировать диэтиловым эфиром, чтобы удалить липофильные вещества. После подкисления проб консерванты экстрагируют диэтиловым эфиром. Аликвоту экстракта диэтилового эфира поместить на хроматографическую пластину тонкослойной хроматографии ТСХ, покрытую силикагелем. После разгонки хроматографические пластины наблюдать в УФ-свете и визуализировать с использованием реагента Millon.

3. РЕАГЕНТЫ

3.1. Общие требования.

Все используемые реагенты должны быть аналитической чистоты. Вода должна быть дистиллированной или водой, по меньшей мере, такого же качества.

3.2. Ацетон.

3.3. Диэтиловый эфир.

3.4. n-Пентан.

3.5. Метанол.

3.6. Уксусная кислота, ледяная.

3.7. Раствор соляной кислоты, с (HCl) = 4 моль/л.

3.8. Раствор гидроксида калия, (КОН) = 4 моль/л.

3.9. Дигидрат хлорида кальция (CaCl ₂ · 2H₂O).

3.10. Реактив-проявитель: Millon.

Реагент Millon (нитрат ртути (II)) готовый реактив, который имеется в продаже (Fluka 69820).

3.11. 2-Феноксиэтанол.

3.12. 1-Феноксипропанол.

3.13. Метил-4-гидроксибензоат (метилпарабен кислота).

3.14. Этил-4-гидроксибензоат (этилпарабен кислота).

3.15. n-Пропил-4-гидроксибензоат (пропилпарабен кислота).

3.16. n-Бутил-4-гидроксибензоат (бутилпарааминобензоевая кислота).

3.17. Бензил-4-гидроксибензоат (бензилпарабен).

3.18. Приготовление стандартных растворов.

Приготовить в метаноле 0,1% (m/v) раствор каждого из эталонных веществ, указанных в пунктах 3.11, 3.12, 3.13, 3.14, 3.15, 3.16 и 3.17 настоящего раздела.

3.19. Подвижная фаза

Смешать 88 объемов n-пентана (3.4) с 12 объемами ледяной уксусной кислоты (3.6).

4. ОБОРУДОВАНИЕ

Обычное лабораторное оборудование, а также:

4.1. Водяная баня, способная поддерживать температуру 60°С.

4.2. Хроматографическая камера (не выложенная фильтровальной бумагой).

4.3. Источник ультрафиолетового света, 254 nм

4.4. Хроматографические пластины 20 см х 20 см, предварительно покрытые 0,25 мм силикагелем 60F_254, с зоной концентрирования (Merck nr.11798, Darmstadt или эквивалент).

4.5. Печка, способная поддерживать температуру до 100° С.

4.6. Фен для волос, пропускающий поток горячего воздуха.

4.7. Валик, для подкрашивания шерсти, длина примерно 10 см, внешний диаметр примерно 3,5 см. Толщина слоя шерсти должна быть от 2 до 3 мм, при необходимости можно регулировать.

См. примечание в разделе 5.2.

4.8. Стеклянные пробирки на 50 мл с винтовой крышкой.

4.9. Электрический нагревательный элемент с термостатическим регулятором температуры. Контроль температуры: около 80°. Плита покрывается алюминиевой пластиной 20см × 20см толщиной около 6мм, для получения равномерного распределения тепла.

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. Подготовка образца

В стеклянной пробирке на 50 мл с винтовой крышкой взвесить около 1 г образца (4.8). Добавить 4 капли раствора соляной кислоты (3.7) и 40 мл ацетона.

Для сильно щелочных косметических продуктов, таких как туалетное мыло, необходимо добавить 20 капель раствора соляной кислоты. Пробирки закрыть, осторожно нагреть смесь до примерно 60°С, чтобы облегчить экстракцию консервантов во фракции ацетона, и энергично встряхивать в течение 1 минуты.

Измерить рН раствора с рН-индикаторной бумагой и рН раствора довести до значения ≤3 с помощью хлористоводородной кислоты. Встряхивать повторно в течение одной минуты.

Раствор охладить до комнатной температуры и профильтровать через фильтровальную бумагу в коническую колбу. 20 мл фильтрата перевести в коническую колбу на 200 мл, добавить 60 мл воды и перемешать. рН смеси довести приблизительно до 10 раствором гидроксида калия (3.8) с использованием индикаторной бумаги.

Добавить 1 г дигидрата хлорида кальция (3.9) и энергично встряхнуть. Раствор профильтровать через фильтровальную бумагу в делительную воронку на 250 мл, содержащую 75 мл диэтилового эфира и энергично встряхивать в течение 1 минуты. Оставить раствор до хорошего разделения фракций, водный слой собрать в коническую колбу на 200 мл. Значение рН раствора довести до приблизительно 2 с помощью раствора соляной кислоты, используя индикаторную бумагу. Затем добавить 10 мл диэтилового эфира и энергично встряхивать в течение 1 минуты. Оставить до хорошего разделения фракций и примерно 2 мл слоя диэтилового эфира перевести во флакон для проб емкостью 5 мл.

5.2. Тонкослойная хроматография

Пластину для тонкослойной хроматографии ТСХ (4.4) поместить на нагретую алюминиевую пластину (4.9). Нагревать по 10 µl из каждого раствора (3.18) и 100 µl раствора пробы (5.1) на линию старта в концентрационной зоне пластины ТСХ.

При необходимости может быть использован поток воздуха, чтобы облегчить испарение растворителя. ТСХ-пластинку извлечь из нагревательной печи и дать остыть до комнатной температуры. Налить 100 мл подвижной фазы (3.19) в хроматографическую камеру (4.2).

ТСХ пластины немедленно поместить в ненасыщенную хроматографическую камеру и дать элюенту подняться при комнатной температуре до 15 см от линии старта. Удалить пластину из хроматографической камеры и оставить сушиться в потоке горячего воздуха с помощью фена.

Пластину рассмотреть под ультрафиолетовым светом (4.3) и отметить пятна на пластине. Нагревать пластину в течение 30 минут в печи (4.5) при 100° С, чтобы удалить избыток уксусной кислоты. Консерванты проявляются на пластине с помощью реагента Millon (3.10) путем погружения валика (4.7) в реагент и проведения валиком по TСХ пластине до ее равномерного смачивания.

Примечание. Пятна могут визуализироваться с помощью тщательного применения одной капли реагента Millon на каждый из участков пятна, отмеченных в УФ-свете.

Эфиры 4-гидроксибензойной кислоты проявляются в виде красных пятен, 2-феноксиэтанол и 1-феноксипропанол – в виде желтых пятен. Следует отметить, что сама 4-гидроксибензойная кислота, которая может быть обнаружена в образцах в качестве консерванта или продуктах разложения из радикалов гидроксипарабензоатов, также проявляется в виде красного пятна. См. пункты 7.3 и 7.4 настоящего раздела.

6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Рассчитать значение R_f для каждого пятна. Сравнить пятна, полученные из раствора пробы, с пятнами стандартных образцов с точки R_f-значений поведения в УФ-излучении цвета после визуализации. Сделать предварительные выводы о наличии консервантов.

В присутствии радикалов парабензоатов осуществить процедуру высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), описанную в разделе В. Для подтверждения наличия 2-феноксиэтанола, 1-феноксипропандиола и радикалов гидроксипарабензоатов объединить все результаты из ТСХ и ВЭЖХ.

7. ПРИМЕЧАНИЕ

7.1. Из-за токсичности реагента Millon (этот реагент описан ранее в одной из процедур) опрыскивание им не рекомендуется.

7.2. Другие соединения, содержащие гидроксильные группы, также могут быть окрашены реагентом Millon. Таблицу окрашивания и Rfзначений, полученных для ряда консервантов с использованием TСХ, можно найти в: N. dе Kruijf, М.А.H. Rijk, L.A. Pranato-Soetardhi и А. Schouten (1987): Определение консервантов в косметических продуктах: процедура тонкослойной хроматографии для выявления консервантов в косметической продукции (J. Chomatography 410, 395-411). Определение консервантов в косметической продукции I: процедуры тонкослойной хроматографии для идентификации консервантов в косметической продукции.

7.3. Rfзначения, которые могут быть получены, представлены в ниже приведенной таблице:

7.4. Нет разделения для 4-гидроксибензойной кислоты и метилпарабен- или бензилпарабен- и этилпарабеновой кислоты. Идентификация этих соединений может быть подтверждена путем процедуры ВЭЖХ, описанной ранее в разделе В, и сравнением полученного времени удерживания проб с временем удерживания стандартов.

В. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает определение 2-феноксиэтанола, 1-феноксипропан-диола, метил-4-гидроксибензоата, этил-4-гидроксибензоата, пропил-4-гидроксибензоата, бутил-4-гидроксибензоата и бензил-4-гидроксибензоата в косметических продуктах.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание консервантов, определенное данным методом, выражено в процентах массы.

3. ПРИНЦИП

Проба подкисляется серной кислотой и затем суспендируется в смеси этанола и воды. После осторожного нагревания смеси до расплавления липидной фазы и количественной экстракции смесь профильтровать.

Консерванты из фильтрата определяются инверсионной высокоэффективной жидкостной хроматографией при использовании изопропил 4-гидроксибензоата в качестве внутреннего стандарта.

4. РЕАГЕНТЫ

4.1. Общие требования.

Все реагенты должны быть аналитической чистоты или подходящие для ВЭЖХ. Вода должна быть дистиллированной или водой, по меньшей мере, такой же чистоты.

4.2. Этанол, абсолютный.

4.3. 2-Феноксиэтанол.

4.4. 1-Феноксипропандиол.

4.5. Метил-4-гидроксибензоат (метилпарабеновая кислота).

4.6. Этил-4-гидроксибензоат (этилпарабеновая кислота).

4.7. n-Пропил-4-гидроксибензоат (пропилпарабеновая кислота).

4.8. Изопропиловый 4-гидроксибензоат (изопропилпарабен).

4.9. n-Бутил-4-гидроксибензоат (бутилпарааминобензойная кислота).

4.10. Бензил-4-гидроксибензоат (бензилпарабен).

4.11. Тетрагидрофуран.

4.12. Метанол.

4.13. Ацетонитрил.

4.14. Серная кислота, раствор С (Н₂SO _{4) = 2 моль / л}

4.15. Смесь этанол/вода.

Смешать девять объемов этанола (4.2) и один объем воды.

4.16. Внутренний стандартный раствор

Взвесить с точностью 0,001г 0,25 г изопропилпарабена (4.8), перевести в мерную колбу на 500 мл, растворить и довести до метки смесью этанол/вода (4.15).

4.17. Подвижная фаза: смесь тетрагидрофуран/вода/метанол/ацетонитрил.

Смешать 5 объемов тетрагидрофурана, 60 объемов воды, 10 объемов метанола и 25 объемов ацетонитрила.

4.18. Стандартный раствор консерванта

В мерной колбе на 100 мл точно взвесить 0,2 г 2-феноксиэтанола, 0,2 г 1-фенокси-2-пропандиола, 0,05г метилпарабеновой кислоты, 0,05г этилпарабеновой кислоты, 0,05г пропилпарабеновой кислоты, 0,05г бутилпарааминобензойной кислоты и 0,025 г бензилпарабена, растворить и довести до метки смесью этанол/вода.

Раствор стабилен в течение одной недели в холодильнике.

4.19. Стандартные растворы консерванта

В набор мерных колб на 50 мл из исходного раствора (4.18) перевести соответственно, 20,00 мл, 10,00 мл, 5,00 мл, 2,00 мл и 1,00 мл . В каждую колбу добавить по 10,00 мл раствора внутреннего стандарта ( 4.16) и 1,0 мл серной кислоты (4.14) и довести до метки смесью этанол/вода. Растворы должны быть свежеприготовленными.

5. ОБОРУДОВАНИЕ

Стандартное лабораторное оборудование, а также:

5.1. Водяная баня, способная поддерживать температуру 60°С ± 1°С

5.2. Хроматограф ВЭЖХ с УФ-детектором, длина волны 280 nm.

5.3. Аналитическая (хроматографическая) колонка:

нержавеющая сталь, внутренний диаметр 25 см × 4,6 мм (или 12,5 см × 4,6 мм); наполненная Nucleosil 5C18 или эквивалентом (см. пункт 10.1).

5.4. Стеклянные пробирки на 100 мл с винтовой крышкой.

5.5. Гранулы для гомогенизации кипения, карборундум размером 2 – 4 мм или эквивалент.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Подготовка пробы.

6.1.1. Подготовка пробы без добавления внутреннего стандарта.

В стеклянной пробирке с винтовой крышкой на 100 мл взвесить 1,0 г ± 0,1 г образца. Пипеткой ввести 1,0 мл серной кислоты (4.14) и 50,0 мл смеси этанол/вода (4.15). Добавить примерно 1 г гранул (5.5). Пробирку закрыть и энергично встряхивать до получения однородной суспензии не менее одной минуты. Поместить пробирку в течение пяти минут на водяную баню (5.1) при 60 ° C ± 1°C, чтобы облегчить экстракцию консервантов в спиртовой фазе.

Пробирку немедленно охладить в потоке холодной воды и поместить экстракт в холодильник на один час. Профильтровать экстракт через фильтровальную бумагу. 2 мл фильтрата перевести во флакон для проб на 5мл. Хранить экстракты в холодильнике и провести определение с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии ВЭЖХ в течение 24 часов.

6.1.2. Подготовка проб с добавлением внутреннего стандарта.

В стеклянной пробирке с винтовой крышкой на 100 мл взвесить 1,0 г ± 0,1 г пробы. Пипеткой добавить 1,0 мл раствора серной кислоты и 40,0 мл смеси этанол/вода. Добавить примерно 1 г гранул (5.5) и точно 10,00 мл раствора внутреннего стандарта. Пробирку закрыть и энергично встряхивать до получения однородной суспензии. Встряхивать не менее одной минуты. Затем на пять минут поместить на водяную баню (5.1) при 60° C ± 1°C, чтобы облегчить экстракцию консервантов в спиртовой фазе.

После этого пробирку немедленно охладить под потоком холодной воды и поместить экстракт в холодильник на один час. Экстракт профильтровать через фильтровальную бумагу. 2 мл фильтрата перевести во флакон для проб на 5 мл. Необходимо хранить экстракты в холодильнике и провести определение с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии ВЭЖХ в течение 24 часов.

6.2. Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)

6.2.1. Хроматографические условия:

6.2.2. Эталонирование

Впрыснуть в хроматограф по 10 µl каждого из стандартных растворов консервантов (4.19). Из полученных хроматограмм определить соотношения между высотами пиков стандартных растворов консервантов и высотой пика внутреннего стандартного раствора. Для каждого консерванта построить калибровочную кривую, выявив соотношение высоты пиков к концентрации стандартных образцов.

6.2.3. Определение.

Впрыснуть в хроматограф 10 μl раствора пробы без внутреннего стандарта (6.1.1) и записать хроматограмму.

Впрыснуть 10 μl из одного из стандартных растворов консервантов (4.19) и записать хроматограмму. Сравнить полученные хроматограммы.

Если на хроматограмме образца (6.1.1) нет никакого пика в то же время удерживания, как и у изопропилпарабена (рекомендуемый внутренний стандарт), продолжить вводить по 10 µl образца раствора с внутренним стандартом (6.1.2). Записать хроматограммы и измерить высоты пиков.

Если на хроматограмме пробы наблюдается пик примерно в то же время удерживания, как и у изопропилпарабена, необходимо выбрать другой внутренний стандарт.

Если один из рассматриваемых консервантов отсутствует на хроматограмме пробы, этот консервант может быть использован в качестве альтернативного внутреннего стандарта.

Рассчитать соотношение высот пиков исследуемых консервантов к высоте пика внутреннего стандарта.

Эталонные кривые стандартных образцов должно быть линейными.

Проверить, если хроматограммы, полученные для стандартного раствора и раствора образца, отвечают следующим требованиям:

Разделение самой плохой пары пиков должно быть, по крайней мере, 0,90.

Для определения пикового разделения см.рис. 1).

Рис.1 Хроматограмма разделения стандартного раствора и пробы  

Если требуемое разделение не достигнуто, необходимо использовать более эффективную колонку или подобрать состав подвижной фазы до достижения нужного результата.

Коэффициент асимметрии всех полученных пиков должен находиться в диапазоне от 0,9 до 1,5.

Для определения коэффициента асимметрии пика см. рис.2.

Для определения коэффициента асимметрии рекомендуемая скорость записи хроматограммы должна быть, по крайней мере, 2 см/мин.

Рис. 2 Хроматограмма определения коэффициента асимметрии

- Базовая линия должна быть стабильной

7. РАСЧЕТ

Для расчета концентрации консерванта в растворе пробы используется эталонная кривая (6.2.2) и соотношение между высотами пиков исследуемых консервантов в образцах и высотами пиков внутреннего стандарта. Рассчитать содержание 2-феноксиэтанола, 1-феноксипропандиола, метил-4-гидроксибензоата, этил-4-гидроксибензоата, пропил-4-гидроксибензоата, бутил-4-гидроксибензоата и бензил-4-гидроксибензоата, в процентах массы (% m/m), используя формулу:

где:

b_i – концентрация (µg/ml) консерванта "i" испытуемого раствора, рассчитанная по эталонной кривой; и

а – масса (г) анализируемой пробы.

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ ⁽¹⁾

См.примечание к пункту 10.5 настоящей главы.

9. ВОСПРОИЗВОДИМОСТЬ ⁽¹⁾

См.примечание к пункту 10.5 настоящей главы.

10. ПРИМЕЧАНИЕ

10.1. Стационарная фаза

Степень удержания растворенных веществ в определениях, проведенных с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии ВЭЖХ, в значительной степени зависит от типа, качества и состава неподвижной фазы. Можно узнать, если используемая колонка эффективна для разделения исследуемых консервантов по результатам, полученным для стандартных образцов (см. примечание к пункту 6.2.3). Кроме предлагаемой фазы для колонки может быть использована и фаза Hypersil ODS и Zorbax ODS.

Рекомендуемая подвижная фаза также может быть оптимизирована до получения желаемого разделения.

10.2. Детектируемая длина волны

Тест на надежность описанного метода показал, что небольшое изменение в длине волны детектирования может оказать существенное влияние на результаты определения.

Таким образом, этот параметр должен тщательно проверяться в ходе анализа.

10.3. Мешающие вещества.

В условиях, описанных в настоящем методе, многие другие соединения, такие как консерванты и косметические добавки, могут оставаться элюированными. Время удерживания большого количества консервантов, указанных в приложении VI к директиве Совета о косметических продуктах, перечислено в: N. dе Kruijf, M.A.H. Rijк, L.A. Pranato-Soetardhi и А. Schouten, (1989). Определение консервантов в косметических продуктах.

II: Высокая производительность, идентификация жидкостной хроматографии (J.Chromatography хроматографии 469, 317-398).

10.4. Для сохранения аналитической колонки можно использовать соответствующую адекватную защитную колонку.

10.5. Этот метод был изучен в качестве теста в девяти сотрудничающих между собой лабораториях. Они проанализировали три пробы. Приведенная ниже таблица показывает для каждой из трех проб среднее значение в % m/m (m), повторяемость (r) и воспроизводимость (R), установленные в анализируемых веществах:

^{__________________}

⁽¹⁾ ISO 5725.

Приложение № 17

к Санитарному регламенту о косметической продукции

Бланк уведомления о косметической продукции

[Приложение N 17 введено Пост.Прав. N 616 от 04.09.2024, в силу 01.11.2024]